МИКРА ЭКЗАМЕН

1.Определение микробиологии как науки. Микробиология медицинская, санитарная, экологическая и др. Задачи медицинской микробиологии
Микробиология – наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, называемые микроорганизмами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами.
Основные разделы микробиологии: общая, техническая, сельскохозяйственная, ветеринарная, медицинская, санитарная.
Общая микробиология изучает наиболее общие закономерности, свойственные каждой группе перечисленных микроорганизмов: структуру, метаболизм, генетику, экологию и т. д.
Основной задачей технической микробиологии является разработка биотехнологии синтеза микроорганизмами биологически активных веществ: белков, ферментов, витаминов, спиртов, органических веществ, антибиотиков и др.
Сельскохозяйственная микробиология занимается изучением микроорганизмов, которые участвуют в круговороте веществ, используются для приготовления удобрений, вызывают заболевания растений и др.
Ветеринарная микробиология изучает возбудителей заболеваний животных, разрабатывает методы их биологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения, направленного на уничтожение микробов-возбудителей в организме больного животного.
Предметом изучения медицинской микробиологии являются болезнетворные (патогенные) и условно-патогенные для человека микроорганизмы, а также разработка методов микробиологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения вызываемых ими инфекционных заболеваний.
Разделом медицинской микробиологии является иммунология, которая занимается изучением специфических механизмов защиты организмов людей и животных от болезнетворных микроорганизмов.
Предметом изучения санитарной микробиологии являются санитарно-микробиологическое состояние объектов окружающей среды и пищевых продуктов, разработка санитарных нормативов.
Медицинская микробиология изучает биологические свойства микроорганизмов, их систематику, экологию, взаимоотношения с другими организмами, в первую очередь – патогенез (механизм развития) заболеваний, вызванных микроорганизмами. Медицинская микробиология разрабатывает методы микробиологической диагностики, специфической профилактики и этиотропной терапии (то есть направленной на причину заболевания, микроорганизм-возбудитель).
Задачи: 1) получение высокоактивных штаммов; 2) изучение закономерностей смешанного культивирования (Z.B. получение биотоплива, очистка сточных вод, получение антибиотиков и витаминов); 3) защита высокоактивных штаммов от бактериофагов; 4) разработка методов сохранения высокопродукт. штаммов м/о (морозильная (-270о), сушка, пересев).

2.Роль медицинской микробиологии в практической деятельности врача.
Медицинская микробиология изучает биологические свойства микроорганизмов, их систематику, экологию, взаимоотношения с другими организмами, в первую очередь – патогенез (механизм развития) заболеваний, вызванных микроорганизмами. Медицинская микробиология разрабатывает методы микробиологической диагностики, специфической профилактики и этиотропной терапии (то есть направленной на причину заболевания, микроорганизм-возбудитель).
Собственно, медицинская микробиология – это пропедевтика инфекционных заболеваний и эпидемиологии. На кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии можно получить полные данные по этиологии и начальные – по вопросам патогенеза, клиники, диагностики, лечения и профилактики инфекционных заболеваний.
Медицинская микробиология изучает еще и этиологию болезни, в патогенезе которых участвуют микроорганизмы, но не относятся к инфекционным болезням, а диагностику и лечение которых проводят в терапевтических, хирургических, гинекологических, офтальмологических, дермато-венерологических и других клиниках.
Медицинская микробиология – самостоятельная медицинская наука, а врач-микробиолог – самостоятельная врачебная профессия. Основная задача врача-микробиолога – определение микробиологического диагноза, а его практическая работа связана с лабораторной диагностикой. Каждый врач должен знать возможности и ограничения микробиологической диагностики, уметь принять исследуемый материал для микробиологического анализа, прочитать результаты исследований и использовать их в диагностике, выборе лечения и контроле за ним. Только слаженная совместная работа врача-клинициста и врача-микробиолога дает возможность эффективной диагностики и лечения многих, в том числе и неинфекционных заболеваний.

3.Исторические этапы развития микробиологии.
В становлении и развитии медицинской микробиологии выделяют четыре исторических периода.
1. Первый период – начальный (вторая половина XVIII – середина XIX вв.) – Состоялось открытие микроорганизмов, микробиология зародилась как наука.
2. Второй период – пастеровский (вторая половина XIX в.) – Становление и развитие микробиологии и иммунологии как единой научной дисциплины, развитие медицинской микробиологии.
3. Третий период (первая половина ХХ ст.) – Бурное развитие микробиологии и иммунологии, достижение которых использовались в практике, происходило становление вирусологии.
4. Четвертый период (современный) – повышение роли микробиологии и иммунологии в научно-техническом прогрессе, медицине и биологии.
Начальный период развития микробиологии – это открытие мира микроорганизмов и описание их морфологии. Гипотеза о существовании невидимых живых организмов интуитивно высказывалась многими мыслителями древности. Выдающиеся врачи и естествоиспытатели Гиппократ (460-377 гг. Н.э.), Гален (131-211 гг н. Н.э.) и другие высказывали гипотезы о живой природе причины инфекционных болезней (сопиадиишуиуиш). Авиценна (980-1037 гг н. Н.э.) в «Каноне медицины» писал, что причиной чумы, оспы и других болезней является невидимые глазом мельчайшие живые существа, передающиеся через воду и воздух.
Но открыли микроорганизмы лишь в XVII в., причем сделал это не ученый, а любитель. Первооткрывателем микробов стал голландский коммерсант Антоний Левенгук (1632-1723), который не имел университетского образования. Это не помешало ему стать одним из самых естествоиспытателей своего времени. Его самым большим увлечением в жизни было изготовление микроскопов и рассмотрения в них всего, что для его пытливого ума казалось интересным.
Левенгук первым открыл сперматозоиды, красные кровяные тельца, капилляры. Но в основном с его именем связывают открытие всех основных групп одноклеточных микроорганизмов – простейших, водорослей, дрожжей и бактерий. Его рисунки морфологии микроорганизмов были настолько точными, что на них можно даже распознать отдельные виды. Левенгук называл открытых им живых существ «анималькулямы» – живыми зверушками. Он первым указал на чрезвычайно большое количество микроорганизмов. Например, он писал: «В моем доме побывало несколько дам, которые с интересом рассматривали крошечных« червей », живущих в уксусе; но в некоторых такой показ вызвал такое отвращение, что они клялись никогда больше не пользоваться уксусом. Ну, а если бы им сказали, что в соскобе из человеческого зуба таких существ больше, чем людей в целом королевстве?

4. Основные принципы систематики бактерий.(Таксономические системы: нумерическая, хемотаксономия, серологическая, генетическая. Таксономические категории: домены микробов - отдел, класс, порядок, семейство, род, вид.)
Систематика- распределение микроорганизмов в соответствии с их происхождением и биологическим сходством. Систематика занимается всесторонним описанием видов организмов, выяснением степени родственных отношений между ними и объединением их в различные по уровню родства классификационные единицы- таксоны. Основные вопросы, решаемые при систематике (три аспекта, три кита систематики)-классификация, идентификация и номенклатура. Классификация- распределение (объединение) организмов в соответствии с их общими свойствами (сходными генотипическими и фентипическими признаками) по различным таксонам. Таксономия- наука о методах и принципах распределения (классификации) организмов в соответствии с их иерархией. Наиболее часто используют следующие таксономические единицы (таксоны)- штамм, вид, род.Последующие более крупные таксоны- семейство, порядок, класс. В современном представлении вид в микробиологии- совокупность микроорганизмов, имеющих общее эволюционное происхождение, близкий генотип (высокую степень генетической гомологии, как правило более 60%) и максимально близкие фенотипические характеристики. ^ Нумерическая (численная) таксономия основывается на использовании максимального количества сопоставляемых признаков и математическом учете степени соответствия. Больщое число сравниваемых фенотипических признаков и принцип их равной значимости затрудняло классификацию.
Основной таксономической единицей систематики бактерий является вид.
Вид – это эволюционно сложившаяся совокупность особей, имеющая единый генотип, который в стандартных условиях проявляется сходными морфологическими, физиологическими, биохимическими и другими признаками.
Виды, связанные генетическим родством, объединяют в роды, роды – в семейства, семейства – в порядки. Более высокими таксономическими категориями являются классы, отделы, подцарства и царства.
Согласно современной систематике патогенные микроорганизмы относятся к царству прокариот, патогенные простейшие и грибы – к царству эукариот, вирусы объединяются в отдельное царство – Vira.
Все прокариоты, имеющие единый тип организации клеток, объединены в один отдел – Bacteria. Однако отдельные их группы отличаются структурными и физиологическими особенностями. На этом основании выделяют:
1) собственно бактерии;
2) актиномицеты;
3) спирохеты;
4) риккетсии;
5) хламидии;
6) микоплазмы.
В настоящее время для систематики микроорганизмов используется ряд таксономических систем.
1. Нумерическая таксономия. Признает равноценность всех признаков. Для ее применения необходимо иметь информацию о многих десятках признаков. Видовая принадлежность устанавливается по числу совпадающих признаков.
2. Серотаксономия. Изучает антигены бактерий с помощью реакций с иммунными сыворотками. Наиболее часто применяется в медицинской бактериологии. Недостаток – бактерии не всегда cодержатвидоспецифический антиген.
3. Хемотакcономия. Применяются физико-химические методы, с помощью которых исследуется липидный, аминокислотный состав микробной клетки и определенных ее компонентов.
4. Генная систематика. Основана на способности бактерий с гомологичными ДНК к трансформации, трансдукции и конъюгации, на анализе внехромосомных факторов наследственности – плазмид, транспозонов, фагов.
Совокупность основных биологических свойств бактерий можно определить только у чистой культуры – это бактерии одного вида, выращенные на питательной среде.

5.Видовые категории: биовар, серовар, фаговар, патовар, морфовар
Основной таксономической единицей систематики бактерий является вид.
Вид – это эволюционно сложившаяся совокупность особей, имеющая единый генотип, который в стандартных условиях проявляется сходными морфологическими, физиологическими, биохимическими и другими признаками.
Вид не является конечной единицей систематики. Внутри вида выделяют варианты микроорганизмов, отличающиеся отдельными признаками. Так, различают:
1) серовары (по антигенной структуре);
2) хемовары (по чувствительности к химическим веществам);
3) фаговары (по чувствительности к фагам);
4) ферментовары;
5) бактериоциновары;
6) бактериоциногеновары.
Штамм- любой конкретный образец (изолят) данного вида. Штаммы одного вида, различающиеся по антигенным характеристикам, называютсеротипами (серовариантами- сокращенно сероварами), по чувствительности к специфическим фагам- фаготипами, биохимическим свойствам- хемоварами, по биологическим свойствам- биоварами и т.д. 
5. Популяция, штамм, культура, клон.
Популяции микроорганизмов совокупность особей одного вида, относительно длительно обитающих на определенной территории (в биотопе).
ШТАММ – объединяет микроорганизмы одного и того же вида, но выделенные из различных источников или даже из одного и того же источника, но в разное время. Штаммы одного вида могут быть абсолютно идентичными или различаться по отдельным признакам, нпр., по способности ферментировать к.-л. сахар, по устойчивости к к.-л. антибиотику и т.д.
КОЛОНИЯ – изолированные скопления клеток, образующиеся на поверхности плотных пит.сред.
КЛОН – это культура микроорганизмов, полученная из единичной клетки, которая размножилась и дала начало целой популяции.
ЧИСТАЯ КУЛЬТУРА – популяция микробов.состоящая из особей одного вида.

6.Бинарная (биноминальная) номенклатура бактерий. Определитель бактерий Д. Берджи.)
БИНАРНАЯ НОМЕНКЛАТУРА (биноминальная номенклатура) , обозначение видов животных, растений и микроорганизмов двумя латинскими словами: первое - название рода, второе - видовой эпитет (напр., Lepuseuropaeus - заяц-русак, Centaureacyanus - василек синий). Предложена К. Баугином (1620), положена в основу систематики К. Линнеем (1753).
Определитель Берджи систематизирует все известные бактерии по нашедшим в практической бактериологии наибольшее распространение принципам идентификации бактерий, основанным на различиях в строении клеточной стенки и отношении к окраске по Граму. Определи -тель выделяет четыре основных категории бактерий Gracillicutes [от лат. gracilis, изящный, тонкий, + cutis, кожа] виды с тонкой клеточной стенкой, окрашивающиеся грамотрицательно; firmicutes [от лат. flrmus, крепкий, + cutis, кожа] бактерии с толстой клеточной стенкой, окрашивающиеся грамположительно; Tenericutes [от лат. tener, нежный, + cutis, кожа] бактерии, лишённые клеточной стенки (микоплазмы и прочие представители класса Mollicutes) и Mendosicutes [от лат. mendosus, неправильный, + cutis, кожа] архебакте-рии (метан- и сульфатредуцирующие, галофильные, термофильные и архебактерии, лишённые клеточной стенки). Описание бактерий даётся по группам (секциям), в состав которых включены семейства, роды и виды; в некоторых случаях в состав групп входят классы и порядки. Патогенные для человека бактерии входят в небольшое число групп.
Группа 1 определителя Берджи. Спирохеты. Включает свободноживущие и паразитические виды; для человека патогенны представители родов Treponema, Borrelia и Leptospira.
Группа 2 определителя Берджи. Аэробные и микроаэрофильные подвижные извитые и изогнутые грамотрицательные бактерии. Патогенные для человека виды входят в роды Campylobacter, HelicobactersSpirillum.
Группа 3 определителя Берджи. Неподвижные (редко подвижные) грамотрицательные бактерии. Не содержит патогенные виды.
Группа 4 определителя Берджи. Грамотрицательные аэробные и микроаэрофильные палочки и кокки. Патогенные для человека виды включены в состав семейств Legionellaceae, Neisseriaceae и Pseudomonada-сеае, в группу входят также патогенные и условно-патогенные бактерии родов Acinetobacter, Afipia, Alcaligenes, Bordetella, Brucella, Flavobacterium, Francisella, Kingella и Moraxella.
Группа 5 определителя Берджи. Факультативно анаэробные грамотрицательные палочки. Группа образована тремя семействами Enterobacteriaceae, Vibrionaceae и Pasteurellaceae, каждое из которых включает патогенные виды, а также патогенные и условно-патогенные бактерии родов Calymmobaterium, Cardiobacterium, Eikenetta, Gardnerella и Streptobacillus.
Группа 6 определителя Берджи. Грамотрицательные анаэробные прямые, изогнутые и спиральные бактерии. Патогенные и условно-патогенные виды входят в состав родов Bacteroides, Fusobacterium, Porphoromonas и Prevotelta.

7. Принципиальные отличия прокариотов от эукариотов.
Основные отличия прокариотических и эукариотических клеток.
Микроорганизмы относятся к царству прокариот:
1) отсутствие ядерной мембраны,
2) слабо развитая ЭПС,
3) нет митохондрий, хлоропластов,
4) нет КГ,
5) не обладают эндоцитозом.
6) Ядерное вещество представлено 1 хромосомой - двухнитчатая, кольцевидной формы молекулы ДНК.
7) Ядерный материал сосредоточен в центральной части и имеет вид филоментозных образований.
8) Цитоплазма имеет вид зернистого образования, куда входят различные вакуоли, рибосомы, гликоген, крахмал, зерна волютина (питательный запас).

8.Основные формы и размеры бактерий.
Характеристика основных морфологических форм бактерий.
По морфологическим признакам выделяют 3 основных группы:
1. Кокковидные:
микрококки, диплококки, тетракокки, стрептококки, стафилококки, сарцины
2. Палочковидные:
короткие, длинные, толстые, тонкие, могут выстраиваться друг за другом, в виде частокола, под углом (в виде V ), с закругленными концами, с заостренными концами, коккобациллы (оч. мелкие палочки, их можно спутуть с кокками)
3. Извитые формы:
- в виде запятой (напр., вибрион холеры)
- в виде латинской S (напр., Campillobacter, Helicobacter
Форма тех или иных микроорганизмов может изменяться в зависимости от способа культивирования, внутри макроорганизма, поэтому часто отмечается полиморфизм.
По размеру различают морги:
а) мелкие мк® - Д < 2 мкм
б) средние – 2< Д< 4 мкм
в) крупные – Д > 4

9. Структура бактериальной клетки.(перечислить все структурные компоненты)
В бактериальной клетке различают:
1) основные органеллы: (нуклеоид, цитоплазма, рибосомы, цитоплазматическая мембрана, клеточная стенка);
2) дополнительные органеллы (споры, капсулы, ворсинки, жгутики)
Цитоплазма представляет собой сложную коллоидную систему, состоящую из воды (75 %), минеральных соединений, белков, РНК и ДНК.
Нуклеоид – ядерное вещество, распыленное в цитоплазме клетки. Не имеет ядерной мембраны, ядрышек. Это чистая ДНК, она не cодержит белков гистонов. В нуклеоиде закодирована основная генетическая информация, т. е. геном клетки.
В цитоплазме могут находиться автономные кольцевые молекулы ДНК с меньшей молекулярной массой – плазмиды.
Рибосомы рибонуклеопротеиновые частицы размером 20 нм, состоящие из двух субъединиц – 30 S и 50 S. Рибосомы отвечают за синтез белка.
Мезосомы являются производными цитоплазматической мембраны. Мезосомы могут быть в виде концентрических мембран, пузырьков, трубочек.
Клеточная стенка – упругое ригидное образование толщиной 150–200 ангстрем. Выполняет следующие функции:
1) защитную, осуществление фагоцитоза;
2) регуляцию осмотического давления;
3) рецепторную;
4) принимает участие в процессах питания деления клетки;
5) антигенную;
6) стабилизирует форму и размер бактерий;
7) обеспечивает систему коммуникаций с внешней средой;
8) косвенно участвует в регуляции роста и деления клетки.
Цитоплазматическая мембрана. Она обладает избирательной проницаемостью, принимает участие в транспорте питательных веществ, выведении экзотоксинов, энергетическом обмене клетки, является осмотическим барьером, участвует в регуляции роста и деления, репликации ДНК.

10.Жгутики,ворсинки Химический состав и функциональное значение , методы их выявления.
Ворсинки (пили, фимбрии) – это тонкие белковые выросты на поверхности клеточной стенки. Комон-пили отвечают за адгезию бактерий на поверхности клеток макроорганизма. Они характерны для грамположительных бактерий. Секс-пили обеспечивают контакт между мужскими и женскими бактериальными клетками в процессе конъюгации. Через них идет обмен генетической информацией от донора к реципиенту.
Жгутики– органеллы движения. Это особые белковые выросты на поверхности бактериальной клетки, содержащие белок – флагелин. Количество и расположение жгутиков может быть различным:
1) монотрихи (имеют один жгутик);
2) лофотрихи (имеют пучок жгутиков на одном конце клетки);
3) амфитрихи (имеют по одному жгутику на каждом конце);
4) перитрихи (имеют несколько жгутиков, по периметру).
О подвижности бактерий судят, рассматривая живые микроорганизмы, либо косвенно – по характеру роста в среде Пешкова (полужидкомагаре). Неподвижные бактерии растут строго по уколу, а подвижные дают диффузный рост.
Жгутики являются органами передвижения. Они крепятся к внутренней поверхности ЦПМ, имеют нитевидную форму. 1 жгутик- это монотрихий, жгутики по периметру - перетрих. Жгутики очень тонки, окрашиваются по Морозову - искусственно увеличиваются размеры жгутиков. Так же этот метод окраски используется для окраски особо крупных микроорганизмов - обработка кислотой, жгутики разрыхляются, увеличиваются в размерах, обрабатывают танином (закрепляют), красят азото- кислым серебром.

11.Капсула, Химический состав и функциональное значение , методы выявления.
Капсулы представляют собой дополнительную поверхностную оболочку. Функция капсулы – защита от фагоцитоза и антител.
Различают макро– и микрокапсулы. Макрокапсулу можно выявить, используя специальные методы окраски, сочетая позитивные и негативные методы окраски. Микрокапсула – утолщение верхних слоев клеточной стенки. Обнаружить ее можно только при электронной микроскопии.
Среди бактерий различают:
1) истиннокапсульные бактерии (род Klebsiella) – сохраняют капсулообразование и при росте на питательных средах, а не только в макроорганизме;
2) ложнокапсульные – образуют капсулу только при попадании в макроорганизм.
Капсулы могут быть полисахаридными и белковыми. Они играют роль антигена, могут быть фактором вирулентности.
Многие микроорганизмы имеют капсулу, она состоит из скопления слизистого материала и выполняет защитную функцию. У патогенных микроорганизмов капсула образуется только внутри макроорганизма, она является фактором патогенности, препятствует фагоцитозу, доступу к микробу антител, бактериофагов. Капсула не окрашивается обычными красителями, только по Гимсу-Бурри. Препарат смешивают с черной тушью, которая образует темный фон, затем окрашивают фуксином.

12.Клеточная стенка, Химический состав и функциональное значение, методы выявления.
Клеточная стенка- присуща большинству бактерий (кроме микоплазм, ахолеплазм и некоторых других не имеющих истинной клеточной стенки микроорганизмов). Она обладает рядом функций, прежде всего обеспечивает механическую защиту и постоянную форму клеток, с ее наличием в значительной степени связаны антигенные свойства бактерий. В составе - два основных слоя, из которых наружный- более пластичный, внутренний- ригидный. Основное химическое соединение клеточной стенки, которое специфично только для бактерий- пептидогликан (муреиновые кислоты). От структуры и химического состава клеточной стенки бактерий зависит важный для систематики признак бактерий- отношение к окраске по Граму. В соответствии с ним выделяют две большие группы- грамположительные (“грам+”) и грамотрицательные (“грам - “) бактерии. Стенка грамположительных бактерий после окраски по Граму сохраняет комплекс йода с генциановым фиолетовым (окрашены в сине- фиолетовый цвет), грамотрицательные бактерии теряют этот комплекс и соответствующий цвет после обработки и окрашены в розовый цвет за счет докрашивания фуксином.Метод выявления клеточной стенки - электронная микроскопия, плазмолиз.

13.Цитоплазматическая мембрана. Химический состав и функциональное значение, методы выявления.
Цитоплазматическая мембрана располагается под клеточной стенкой (между ними - периплазматическое пространство). По строению является сложным липидобелковым комплексом, таким же, как у клеток эукариот (универсальная мембрана). Функции цитоплазматической мембраны: 1. Является основным осмотическим и онкотическим барьером. 2. Участвует в энергетическом метаболизме и в активном транспорте питательных веществ в клетку, так как является местом локализации пермеаз и ферментов окислительногофосфорилирования. 3. Участвует в процессах дыхания и деления. 4. Участвует в синтезе компонентов клеточной клетки (пептидогликана). 5. Участвует в выделении из клетки токсинов и ферментов. Цитоплазматическая мембрана выявляется только при электронной микроскопии.

14.Цитоплазма. Химический состав и функциональное значение , методы выявления.
Цитоплазма- сложная коллоидная система, содержащая различные включения метаболического происхождения (зерна волютина, гликогена, гранулезы и др.), рибосомы и другие элементы белоксинтезирующей системы, плазмиды (вненуклеоидное ДНК), мезосомы (образуются в результате инвагинации цитоплазматической мембраны в цитоплазму, участвуют в энергетическом обмене, спорообразовании, формировании межклеточной перегородки при делении).
Цитоплазма бактерий занимает основной объем клетки и состоит из растворимых белков. Рибосомы бактерий имеют коэффициент седиментации 70 S в отличие от рибосом, характерных для эукариотических клеток (80 S). Поэтому некоторые антибиотики, действие которых основано на подавлении синтеза белка путем связывания их с рибосомами бактерий, не оказывают влияния на синтез белка эукариотических клеток. В цитоплазме имеются различные включения полисахариды, полир-масляная кислота и полифосфаты (волютин). Они накапливаются при избытке питательных веществ в окружающей среде и выполняют роль запасных веществ для питания и энергетических потребностей. Зерна волютина выявляются у дифтерийной палочки в виде интенсивно прокрашивающихся полюсов клетки.

15.Нуклеоид. Химический состав и функциональное значение , методы выявления.
В центре бактериальной клетки находится нуклеоид- ядерное образование, представленное чаще всего одной хромосомой кольцевидной формы. Состоит из двухцепочечной нити ДНК. Нуклеоид не отделен от цитоплазмы ядерной мембраной.
Нуклеоид (образование, подобное ядру) эквивалент ядра у бактерий. Нуклеоидрасположен в центральной зоне бактерий в виде двунитчатой ДНК, замкнутой в кольцо и плотно уложенной наподобие клубка. В отличие от эукариот ядро бактерий не имеет ядерной оболочки, ядрышка и основных белков (гис- тонов). Обычно в бактериальной клетке содержится одна хромосома, представленная замкнутой в кольцо молекулой ДНК. При нарушении деления в ней может находиться 4 хромосомы и более.Нуклеоид выявляется в световом микроскопе после окраски специфическими для ДНК методами по Фельгену или Гимзе. На электронограммах ультратонких срезов бактерий нуклеоид имеет вид светлых зон с фибриллярными, нитевидными структурами ДНК.Кроменуклеоида, представленного одной хромосомой, в бактериальной клетке имеются внехромосомные факторы наследственности плазмиды.

16.Спора. Химический состав и функциональное значение, методы выявления.
Споры – это особые формы существования некоторых бактерий при неблагоприятных условиях внешней среды. Спорообразование присуще грамположительным бактериям. В отличие от вегетативных форм споры более устойчивы к действию химических, термических факторов.
К спорообразованию способна лишь небольшая группа эубактерий, а из патогенных для чка только – Clostridium и Bacillus. Каждая вегетативная 
· образует 1 эндоспору. Споры УСТОЙЧИВЫ к температуре, высыханию, радиации и химическим в-вам (включая 70° этанол). Могут сохраняться оч длительное время. Предположительно споры могут храниться в сухой почве до 1000 лет, но фактически уже за 50 лет 90% спор теряют жизнеспособность.
Морфологически споры м.б. круглыми, овальными, эллиптическими, некоторые снабжены «рёбрами жесткости».
ПРОЦЕСС СПОРУЛЯЦИИ начинается сразу при возникновении дефицита питательных в-в и длится около 8ч, при этом никаких внешних источников питания или энергии не требуется. Стимулируют – глюкоза, Р и NH4, угнетают –пептон, лактоза, NaCl, CaCl2.
При световой микроскопии часто используют метод выявления спор по Ожешко. Высокая резистентность связана с большим содержанием кальциевой соли дипиколиновой кислоты в оболочке спор. Расположение и размеры спор у различных микроорганизмов отличается, что имеет дифференциально- диагностическое (таксономическое) значение. Основные фазы “жизненного цикла” спор- споруляция (включает подготовительную стадию, стадию предспоры, образования оболочки, созревания и покоя) и прорастание, заканчивающееся образованием вегетативной формы. Процесс спорообразования генетически обусловлен.

17.Волютиновые зерна. Химический состав и функциональное значение структурных компонентов, методы выявления.
В цитоплазме имеются различные включения в виде гранул гликогена, полисахаридов, бета-оксимасляной кислоты и полифосфатов (волютин). Они накапливаются при избытке питательных веществ в окружающей среде и выполняют роль запасных веществ для питания и энергетических потребностей.
Волютин обладает сродством к основным красителям и легко выявляется с помощью специальных методов окраски (например, по Нейссеру) в виде метахроматических гранул. Толуидиновымсиним или метиленовым голубым волютин окрашивается в красно-фиолетовый цвет, а цитоплазма бактерии в синий. Характерное расположение гранул волютина выявляется у дифтерийной палочки в виде интенсивно прокрашивающихся полюсов клетки. Метахроматическое окрашивание волютина связано с высоким содержанием полимеризо-ванного неорганического полифосфата. При электронной микроскопии они имеют вид электронно-плотных гранул размером 0,11,0 мкм.
Примеры микроорганизмов, имеющих зерна волютина: - Spirillumvolutans - сапрофит - Corynebacteriumxerosis - нормальный обитатель глаз - Corynebacteriumdiphtheriae - возбудитель дифтерии (расположены полюсно) - Corynebacteriumulcerans - возбудитель дифтериеподобных поражений кожи

18. L-формы бактерии.
при действии лизоцима, пенициллина и некоторых других веществ, разрушающих пептидогликан или нарушающих его синтез, бактерии вначале превращаются в сферопласты, а далее, полностью утратив клеточную стенку, – в бесформенные протопласты, быстро подвергающиеся плазмолизу.
Дефектные по клеточной стенке бактерии, которые образуются в организме, обладают жизнеспособностью и патогенностью, называют L–формами в честь института Листера, где они были открыты.
L-формы  [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], частично или полностью лишённые [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], но сохранившие способность к развитию. Впервые обнаружены в[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] году [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
Образуются под воздействием некоторых хим. веществ (напр., пенициллина). L-формы бактерий
адаптивные или инволюционные формы бактерий, полностью или частично утратившие способность к синтезу компонентов клеточной стенки, особенно пептидогликана, но сохранившие в отличие от протопластов и сферопластов способность к длительному переживанию как в организме, так и на средах. Образуют стрептококки, гонококки, бациллы, микобактерии, коринебактерии, энтеробактерии, бактероиды и др.
 L-формам придается большое значение в развитии хронических инфекций, носительстве возбудителей, в длительной персистенции их в организме.методы выявления присутствия L-форм в организме мало разработаны.

19. Особенности морфологии и структуры актиномицетов
Actinomyces - Актиномицеты - Лучистые грибы. Неистинные грибы. Относятся к почвенным бактериям. При своем росте образуют структуры, напоминающие мицелий грибов, т.е. они являются промежуточной формой микроорганизмов. С грибами их роднит мицелиообразование и спорообразования (бласто- , артро- и хламидоспоры). С бактериями - обитают в почве, Гр+, видны под световым микроскопом с иммерсией. Имеют ядерный материал, ЦПМ, клеточную стенку. Делятся обычным делением и спорами. На питательных средах образуют нечто похожее на субстратный мицелий. Выделяют 3 группы:
1) Псевдоактиномицеты - некоторые бактериальные формы, например микобактерии туберкулеза, бифидобактерии. Для этой группы характерна удлиненная форма и специфическое деление.
2) Проактиномицеты. У этих микроорганизмов сохраняется мицелий, образуют артроспоры. К ним относятся Nocardia- вызывают нокардиоз.
3) Эуактиномицеты - истинные лучистые грибки. Представитель - род Sthreptomyces. Образуют истинный мицелий, артроспоры. Могут образовывать спорангии (стрептоспорангии), экзоспоры по типу высших грибов. Эта группа дает до 95% антибиотиков.

20. Особенности морфологии и структуры спирохет.
Спирохеты- имеют различное число завитков, аксостиль- совокупность фибрилл, специфический для различных представителей характер движения и особенности строения (особенно концевых участков). Из большого числа спирохет наибольшее медицинское значение имеют представители трех родов- Borrelia, Treponema, Leptospira.

21.Особенности морфологии и структуры риккетсий
Рикеттсии - это группа микроорганизмов, которые являются естественными симбионтами членистоногих насекомых: клещей, вшей, блох. Обитая в организме насекомых, рикеттсии могут передаваться человеку и животным при укусе. Рикеттсии являются возбудителями сыпного тифа.
Структура рикеттсий.
Гр- и по структуре имеют много общего с другими Гр- бактериями. Полиморфные микроорганизмы, могут быть в виде кокко- бактерий, палочковидной, нитевидной формы. Облигатные внутриклеточные паразиты, могут размножаться только в живой клетке. Во внешней среде сохраняются некоторое время. У рикеттсий выделяют 2 морфоформы, которые образуются в клетке хозяина:
Вегетативная форма, которая размножается внутри клетки.
Покоящаяся форма, сохраняется в клетке, но не размножается. Имеет меньшие размеры. Вызывают хронический сыпной тиф.
Рикеттсии обладают минимальным собственным обменом веществ из-за особого строения ЦПМ. Они практически не способны выделять продукты метаболизма, это метаболически зависимые от клетки- хозяина микроорганизмы. Культивируются на куриных эмбрионах, культурах клеток, в живом организме (организме членистоногих).

22.Особенности морфологии и структуры хламидий.
Хламидии имеют много общего с рикеттсиями, но они передаются непосредственно от хозяина хозяину воздушно- капельным или половым путем. Гр-. Обитают на слизистых оболочках, их можно отнести к нормальной микрофлоре если они находятся в небольшом количестве. Помимо человека, они вызывают заболевания у птиц - орнитоз, пситаккоз. Геном маленький. Облигатные внутриклеточные паразиты, вне клетки хозяина не размножаются. Культивируются как рикеттсии. Метаболически зависимы от клетки - хозяина. Внутри клетки хозяина образуют 2 формы: Элементарное тельце - очень мелкие клетки, похожие на покоящиеся формы рикеттсий. Инфекционны. Проникают в клетку-хозяина, где из этой формы образуются ретикулярные тельца, которые внутри клетки хозяина бинарно делятся, затем снова переходят в элементарные тельца. Скопления телец внутри клетки-хозяина - это внутриклеточные включения, их обнаруживают иммунно-люминесцентной микроскопией, окраской по Романовскому-Гимзе. Заболевание, вызываемое хламидиями – хламидиоз - воспалительные процессы слизистых. Новорожденные могут заражаться при прохождении через родовые пути матери. У них часто возникают конъюктивиты.

23.Особенности морфологии и структуры микоплазм.
Микоплазмы (сем Mycoplasmacea, класс Mollicutes) не способны синтезировать компоненты клеточной стенки. Вместо неё микоплазмы покрыты трехслойной эластичной мембраной, состоящей из липопротеиновых соединений, фосфолипидов с включением стеринов, которых нет у бактерий и риккетсий. Содержат большое количество белка и нуклеиновых кислот; количество углеводов варьирует.
Морфология и способы размножения. Большинство из них – факультативные анаэробы. Так как микоплазмы не имеют ригидной оболочки, они очень полиморфны. В мазках из культур обнаруживаются различные микроструктуры: гранулы, в виде крошечных кокков и элементарных телец; крупные шары; кольца; палочки, нити и ветвящиеся мицелиальные формы; аморфные массы, меняющиеся в конфигурации. Размеры микоплазм варьируют от 125–250 нм у мелких гранулярных форм до 0,4 –150 мкм у нитевидных структур. Микоплазмы не образуют жгутиков, капсул и спор. По Граму окрашиваются отрицательно, лучше окрашиваются по Романовскому–Гимзе. Размножаются путем бинарного деления, некоторые способны к почкованию и сегментации.
Колонии мелкие с приподнятым центром («яичница глазунья»), врастают в среду. На поверхности колоний располагаются крупные, часто вакуолизированные клетки, в глубине – мелкие, оптически плотные организмы.
Методы микроскопии. В световом микроскопе можно обнаружить лишь самые большие формы и виды микоплазм, размеры которых превышают 0,2 мкм в длину и в поперечнике. В живом состоянии их изучают в темном поле и фазово–контрастном микроскопе, ультраструктурные элементы выявляют при электронной микроскопии.

24.Морфология грибов
Грибы (Myces) относятся к эукариотам.  Грибов в природе огромное количество и только небольшая их часть вызывает заболевания животных и человека. Основной структурный элемент грибов – гифы - нитевидные структуры, переплетающиеся между собой. В результате переплетения гиф образуется мицелий. Грибы в лабораторных условиях культивируются на специальных питательных средах, где образуют мицелий как поверхностный(воздушный), так и субстратный.
Грибы размножаются спорами бесполым путем. Высшие грибы размножаются половым путем: 2 споры сливаются, образуя зиготу. По образованию спор грибы делятся на низшие и высшие. У низших грибов помимо особенности спорообразования мицелий одноклеточный несегментированный. У высших грибов мицелий делится перегородками на отдельные клетки. В перегородках находятся отверстия.
У низших грибов споры образуются в специальных закрытых спорангиях. Споры, закрытые оболочкой спорангия, называются эндоспорами. У высших грибов экзоспоры- соприкасаются с внешней средой.
Артроспоры - гиф мицелия начинает дробиться и каждый образующийся при этом фрагмент дает начало новому мицелию.
Хламидоспоры - на концах в местах сочленения мицелия образуются выпуклости, одна из которых утолщается и превращается в спору.
Бластоспоры - характерны для дрожжевого грибка. От материнской клетки отпочковываются дочерние.
Аскоспоры - это половые споры, не образующие мицелий.
Классы грибов:
- Овомицеты.
- Аскомицеты (сумчатые).
- Базидиомицеты.
- Несовершенные грибы или дейтеромицеты.
Патогенность грибов.
Грибы у человека способны вызывать микозы, как поверхностные (поражения кожи, ногтей, волос), так и глубокие (мышцы, клетчатка). Грибы могут вызывать системные поражения. Криптокиккоз - заболевания, вызываемые грибком на фоне ВИЧ-инфекции (в 30% случаев). Заболевание вызывает Cryptococcus. Он имеет дрожжеподобные клетки размером 4- 20 мкм. Образует бластоспоры. Нитчатые формы отсутствуют. Может образовывать капсулу.
Blastomyces вызывает бластомикоз. Встречается в двух формах - висцеральный и кожный. В тканях определяются довольно крупные дрожжеподобные клетки.
Candida - входит в состав нормальной микрофлоры. У маленьких детей часто наблюдается кандидоз полости рта - молочница. Активизируются на фоне иммунодефицита.
Hystoplasma - Гистоплазма - вызывает гистоплазмоз. В клетках, тканях образует одноклеточные образования округлой или грушевидной формы. Образует бласто- и хламидоспоры. На питательных средах дает воздушный мицелий.
Coccidioides вызывают системное заболевание кокцидиоз, острая форма напоминает грипп. При хронической форме поражается костная ткань. Образует эндоспоры. На питательных средах образует воздушный мицелий. Часто встречается на фоне ВИЧ-инфекции.

25.Методы микроскопирования- иммерсионная
Размеры микробов, имеющих клеточное строение, составляют 0,2–20 мкм и они легко обнаруживаются в иммерсионном микроскопе. Вирусы во много раз меньше. Диаметр самых больших из них, например вируса натуральной оспы, около 300 нм, а у самых мелких составляет 20–30 нм. Ввиду этого для выявления вирусов используются электронные микроскопы.
В микробиологических исследованиях применяют световые и электронные микроскопы; методы оптической и электронной микроскопии.
Оптический микроскоп. Наиболее важной оптической частью микроскопа являются объективы, которые делятся на сухие и иммерсионные.
Сухие объективы с относительно большим фокусным расстоянием и слабым увеличением применяются для изучения микроорганизмов, имеющих крупные размеры (более 10–20 мкм), иммерсионные (лат. immersio – погружение) с фокусным расстоянием – при исследовании более мелких микробов.
При микроскопии иммерсионным объективом х90 обязательным условием является его погружение в кедровое, персиковое или в вазелиновое масло, показатели преломления света у которых близки предметному стеклу, на котором делают препараты. В этом случае падающий на препарат пучок света не рассеивается и, не меняя направления, попадает в иммерсионный объектив. Разрешающая способность иммерсионного микроскопа находится в пределах 0,2 мкм, а максимальное увеличение объекта достигает 1350.
При использовании иммерсионного объектива вначале центрируют оптическую часть микроскопа. Затем поднимают конденсор до уровня предметного столика, открывают диафрагму, устанавливают объектив малого увеличения и при помощи плоского зеркала освещают поле зрения. На предметное стекло с окрашенным препаратом наносят каплю масла, в которую под контролем глаза осторожно погружают объектив, затем, поднимая тубус, смотрят в окуляр и вначале макро–, а потом микровинтом устанавливают четкое изображение объекта. По окончании работы удаляют салфеткой масло с фронтальной линзы объектива.

26. Методы микроскопированиятемнопольная,принцип работы
Микроскопия в темном поле зрения проводится при боковом освещении и обычно применяется при изучении подвижности бактерий или обнаружении патогенных спирохет, поперечник которых может быть меньше 0,2 мкм. Чтобы получить яркое боковое освещение, обычный конденсор заменяют специальным параболоидом–конденсором, в котором центральная часть нижней линзы затемнена, а боковая поверхность зеркальная. Этот конденсор задерживает центральную часть параллельного пучка лучей, образуя темное поле зрения. Краевые лучи проходят через кольцевую щель, попадают на боковую зеркальную поверхность конденсора, отражаются от нее и концентрируются в его фокусе. Если на пути луча нет каких–либо частиц, он преломляется, падая на боковую зеркальную поверхность, отражается от нее и выходит из конденсора. Когда луч встречает на своем пути микробы, свет отражается от них и попадает в объектив – клетки ярко светятся. Так как для бокового освещения необходим параллельный пучок света, применяется только плоское зеркало микроскопа. Обычно исследование в темном поле зрения проводится под сухой системой. При этом небольшую каплю материала помещают на предметное стекло и накрывают покровным, не допуская образования пузырьков воздуха.

27. Методы микроскопирования фазово-контрастная,принцип работы
Фазово–контрастная и аноптральная микроскопия основаны на том, что оптическая длина пути света в любом веществе зависит от показателя преломления. Это свойство используют с целью увеличить контрастность изображения прозрачных объектов, какими являются микробы, т. е. для изучения деталей их внутреннего строения. Световые волны, проходя через оптически более плотные участки объекта, отстают по фазе от световых волн, не проходящих через них. При этом интенсивность света не меняется, а только изменяется фаза колебания, не улавливаемая глазом и фотопластинкой. Для повышения контрастности изображения фазовые колебания при помощи специальной оптической системы превращаются в амплитудные, хорошо улавливаемые глазом. Препараты в световом поле зрения становятся более контрастными – положительный контраст; при отрицательном фазовом контрасте на темном фоне виден светлый объект. Вокруг изображений нередко возникает ореол.
Большей четкости изображения малоконтрастных живых микробов (даже некоторых вирусов) достигают в аноптральном микроскопе. Одной из важнейших его деталей является линза объектива, расположенная вблизи «выходного» зрачка, на которую нанесен слой копоти или меди, поглощающий не менее 10 % света. Благодаря этому фон поля зрения приобретает коричневый цвет, микроскопируемые объекты имеют различные оттенки – от белого до золотисто–коричневого.

28. Методы микроскопирования.люминесцентная,принцип работы
Люминесцентная микроскопия основана на способности некоторых клеток и красителей светиться при попадании на них ультрафиолетовых и других коротковолновых лучей света. Люминесцентные микроскопы представляют собой обычные световые микроскопы, снабженные ярким источником света и набором светофильтров, которые выделяют коротковолновую часть спектра, возбуждающую люминесценцию. Между зеркалом микроскопа и источником света устанавливают сине–фиолетовый светофильтр (УФС–3, ФС–1 и пр.). На окуляр надевают желтый светофильтр (ЖС–3 или ЖС–18).
Различают собственную (первичную) флюоресценцию и наведенную (вторичную). Так как большая часть микробов не обладает собственной флюоресценцией, они обрабатываются красителями, способными флюоресцировать (вторичная люминесценция). В качестве флюорохромов используют аурамин (для обработки микобактерий туберкулеза), акридин желтый (гонококки), корифосфин (коринебактерии дифтерии), флюоресцеинизотиоцианат (для мечения антител).
Люминесцентная микроскопия отличается рядом преимуществ: дает цветное изображение и значительную контрастность; позволяет обнаружить живые и погибшие микроорганизмы, прозрачные и непрозрачные объекты; установить локализацию бактерий, вирусов и их антигенов в пораженных клетках организма.

29.электронная микроскопия.принцип работы
Электронный микроскоп. В электронном микроскопе вместо света используется поток электронов в безвоздушной среде, на пути которых находится анод. Источником электронов является электронная пушка (вольфрамовая нить, разогреваемая до 2500–2900 °С). Оптические линзы заменены электромагнитами. Между вольфрамовой нитью и анодом возникает электрическое поле в 30 000–50 000 Вт, что сообщает электронам большую скорость, и они, проходя через отверстие анода, попадают в первую электромагнитную линзу (конденсор). Электронные лучи на выходе из конденсора собираются в плоскости исследуемого объекта. Они отклоняются под разными углами за счет различной толщины и плотности препарата и попадают в объективную электромагнитную линзу, снабженную диафрагмой. Электроны, незначительно отклонившиеся при встрече с объектом, проходят через диафрагму, а отклонившиеся под большим углом – задерживаются, благодаря чему обеспечивается контрастность изображения. Линза объектива дает промежуточное увеличение изображения, которое наблюдается через смотровое окно. Проекционная линза может увеличивать изображение во много раз. Это изображение принимается на флюоресцирующий экран и фотографируется. Разрешающая способность электронных микроскопов равна 1,0 –0,14нм

30. Методы приготовления препаратов-мазков.
При приготовлении мазка с плотной питательной среды на обезжиренное предметное стекло нанести петлей небольшую каплю воды. В правую руку взять бактериологическую петлю, в левую - пробирку с культурой. Простерилнзовать петлю, внося ее в пламя горелки в вертикальном положении. После того как петля накалится докрасна, провести конец петледержателя через пламя. Вынуть пробку из пробирки, захватить ее мизинцем правой руки. Обжечь на спиртовке крал пробирки. Внося петлю в пробирку, охладить ее, касаясь стенок пробирки. Затем петлей с поверхности среды снять очень небольшое количество культуры. Не касаясь стенок пробирки, вынуть петлю, еще раз обжечь края пробирки над спиртовкой и закрыть ее пробкой. Захваченную петлей культуру внести в приготовленную ранее каплю воды, хорошо размешать и равномерно распределить по стеклу в виде небольшого круга или овала (1-1,5 см в диамет-ре). По окончании приготовления мазка вновь простерилнзовать петлю. Для приготовления мазка из бульонной культуры на предметное стекло нанести 1-2 петли исследуемого материала и равномерно распределить по стеклу (не требуется использование воды). С обратной стороны стекла карандашом по стеклу записать шифр препарата и обвести мазок,
Высушивание. Высушивание мазка производится на воздухе. Для ускорения высушивания предметное стекло с мазком, обращенным кверху, подержать в струе теплого воздуха, высоко над пламенем спиртовки, не внося препарат в пламя.
Фиксация. Используют физический и химический методы фиксаций. Физический - фиксация мазка над пламенем горелки или спиртовки в течение нескольких секунд мазком вверх. Эту операцию проводят достаточно быстро, стараясь не перегреть мазок так как при перегревании могут произойти необратимые изменения в клетке. Химический метод фиксации - более мягкий по сравнению с фиксацией на пламени. В качестве фиксаторов используют этанол, ацетон, смесь Никифорова (этанол + эфир 1:1), метанол, фйрмалин. После фиксации мазок можно окрашивать.
Окраска мазка. На мазок нанести несколько капель раствора красителя так, чтобы весь мазок был покрыт краской. Оставить краску на определенное время. Промыть препарат водой, просушить фильтровальной бумагой.
Рассматривать препарат с использованием иммерсионной системы. Каплю иммерсионного масла можно наносить только на сухой мазок.
Отношение микроорганизмов к красящим веществам называется тинкториальным свойством. Наибольшее применение имеют основные краски: метиленовый синий, основной фуксин, генцианвиолет, кристаллический фиолетовый и другие.

31. Простые и сложные методы окраски препаратов-мазков. Методы Грама, Циль-Нильсена.
Окраска микроорганизмов имеет большое диагностическое значение, так как дает возможность установить морфологические и тинкториальные особенности микроба. В некоторых случаях этого достаточно для постановки микробиологического диагноза.
Окраска микроорганизмов представляет собой сложный физико-химический процесс, в механизме которого существенную роль играют явления адсорбции, капиллярности, химического сродства между красителем и окрашиваемым объектом и рН среды, в которой они находятся. Различают простые и сложные методы окраски
К простым относятся методы с использованием одного вида красителя, к сложным - нескольких красителей.
Простые методы окраски:
метиленовым синим - окраска в течение 3-5 мин; генцнанвиолетом - окраска в течение 1 -2 мин; фуксином водным - окраска в течение 1-2 мин.
Простыми методами окраски пользуются для обнаружения в микроскопируемом материале микробов, определения их количества, формы и расположения. Сложные методы окраски используют для дифференциации микробов по морфологическим и тинкториальным свойствам.
Грама метод - метод дифференцированной окраски бактерий, при к-ром одни бактерии окрашиваются в темно-фиолетовый цвет (грамположительные бактерии, см.), др. -в красный или розовый (грамотрицателъныебактерии,см.). Сущность метода состоит в том, что клеточная стенка грам+ бактерий прочно фиксирует генцианвиолет, не обесцвечивается этанолом и потому не воспринимает дополнительный краситель (фуксин). У грам- микробов генцианвиолет легко вымывается из клетки этанолом, и они окрашиваются дополнительным красителем. Техника окраски: 1) на фиксированный препарат помещают полоску фильтровальной бумаги и на нее наносят р-р генцианвиолета (см. Красители) на 1 - 2 мин; 2) краситель и фильтровальную бумагу сливают и препарат обрабатывают в течение 1 мин р-ром Люголя (см. Люголя раствор); 3) р-р Люголя сливают и на препарат наносят на 30 с 95% этанол; 4) промывают водой, воду сливают и препарат докрашивают дополнительным красителем (водным фуксином) в течение 1-2 мин; 5) промывают водой, высушивают и микроскопируют. Общим правилом для всех этапов является более длительная экспозиция в случае толстых мазков (из материала, из плотной среды) и более кратковременная, если мазки тонкие, напр., из бульонной к-ры. В связи с недостаточной стандартностью методики и возможными ошибками в ней (перекрашивание или недоокрашивание одним из красителей, несоблюдение экспозиции или концентрации реактивов, передержка или недодержка этанола, несливание воды и др.) результат окрашивания может быть неправильным. Для контроля за этим целесообразно на том же мазке рядом делать препарат из смеси заведомо грам+ и грам- микробов.
Окраска по методуЦИЛЯ – НИЛЬСЕНА.
Для выявления грамположительных КИСЛОТО– И СПИРТОУСТОЙЧИВЫХ микобактерий туберкулеза и лепры, которые из–за большого количества в клеточных оболочках жировосковых веществ, миколовой кислоты и других оксикислот непроницаемы для разведенных растворов красителей, используют окраску по методуЦИЛЯ – НИЛЬСЕНА. Окрашивание их по этому способу достигается при помощи концентрированного фенолового фуксина Циля с подогреванием над пламенем горелки до закипания и отхождения паров. Окрашенные с применением термокислотной обработки микобактерии не обесцвечиваются слабыми растворами минеральных кислот и этилового спирта.
Техника окраски: 1. Фиксированный мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, на которую наносят фуксин Циля, и несколько раз подогревают над пламенем горелки до появления паров, подливая краситель, далее бумагу снимают и промывают водой.
2. Препарат обрабатывают (обесцвечивают) 5 % раствором серной кислоты и промывают водой.
3. На мазок наливают водно–спиртовой раствор метиленового синего, спустя 3–5 мин промывают водой и высушивают. Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в интенсивно красный цвет, остальные виды микробов, обесцвечивающиеся в процессе обработки препарата кислотой, – в светло–синий.

32.Тинкториальные свойства бактерий.
При изучении, идентификации и классификации микроорганизмов чаще всего изучают следующие (гено- и фенотипические) характеристики: 1.Морфологические- форма, величина, особенности взаиморасположения, структура. 2.Тинкториальные- отношение к различным красителям (характер окрашивания), прежде всего к окраске по Граму. По этому признаку все микроорганизмы делят на грамположительные и грамотрицательные.

33. Экзоферменты, эндоферменты..
В основе всех метаболических реакций в бактериальной клетке лежит деятельность ферментов, которые принадлежат к 6 классам: оксиредуктазы, трансферазы, гидролазы, лигазы, лиазы, изомеразы. Ферменты, образуемые бактериальной клеткой, могут локализоваться как внутри клетки эндоферменты, так и выделяться в окружающую среду  экзоферменты.Экзоферменты играют большую роль в обеспечении бактериальной клетки доступными для проникновения внутрь источниками углерода и энергии. Большинство гидролаз является экзоферментами, которые, выделяясь в окружающую среду, расщепляют крупные молекулы пептидов, полисахаридов, липидов до мономеров и димеров, способных проникнуть внутрь клетки. Ряд экзоферментов, например гиалуронидаза, коллагеназа и другие, являются ферментами агрессии. Некоторые ферменты локализованы в периплазматическом пространстве бактериальной клетки. Они участвуют в процессах переноса веществ в бактериальную клетку. Ферментативный спектр является таксономическим признаком, характерным для семейства, рода и в некоторых случаях для видов. Поэтому определением спектра ферментативной активности пользуются при установлении таксономического положения бактерий. Наличие экзоферментов можно определить при помощи дифференциально-диагностических сред, поэтому для идентификации бактерий разработаны специальные тест-системы, состоящие из набора дифференциально-диагностических сред.

34.Классификация бактерий по типам питания: аутотрофы, гетеротрофы. (Источники углерода, азота и минеральных веществ. Факторы роста.
Под питанием понимают процессы поступления и выведения питательных веществ в клетку и из клетки.
Среди необходимых питательных веществ выделяют органогены (углерод, кислород, водород, азот, фосфор, калий, магний, кальций).
В зависимости от источника получения углерода бактерии делят на:
1) аутотрофы (используют неорганические вещества – СО2);
2) гетеротрофы;
3) метатрофы (используют органические вещества неживой природы);
4) паратрофы (используют органические вещества живой природы).
Типы питания. Микроорганизмы нуждаются в углеводе, азоте, сере, фосфоре, калии и других элементах. В зависимости от источников углерода для питания бактерии делятся на аутотрофы, использующие для построения своих клеток диоксид углерода С02 и другие неорганические соединения, игетеротрофы, питающиеся за счет готовых органических соединений. Аутотрофными бактериями являются нитрифицирующие бактерии, находящиеся в почве; серобактерии, обитающие в воде с сероводородом; железобактерии, живущие в воде с закисным железом, и др. Гетеротрофы, утилизирующие органические остатки отмерших организмов в окружающей среде, называются сапрофитами. Гетеротрофы, вызывающие заболевания у человека или животных, относят к патогенным и условно-патогенным. Среди патогенных микроорганизмов встречаются облигатные и факультативные паразиты (от греч. parasitos нахлебник). Облигатные паразиты способны существовать только внутри клетки, например риккетсии, вирусы и некоторые простейшие.

35. Механизм транспорта питательных веществ в бактериальную клетку.)
По источникам энергии микроорганизмы делят на:
1) фототрофы (способны использовать солнечную энергию);
2) хемотрофы (получают энергию за счет окислительно-восстановительных реакций);
3) хемолитотрофы (используют неорганические соединения);
4) хемоорганотрофы (используют органические вещества).
Пути поступления метаболитов и ионов в микробную клетку.
1. Пассивный транспорт (без энергетических затрат):
1) простая диффузия;
2) облегченная диффузия (по градиенту концентрации).
2. Активный транспорт (с затратой энергии, против градиента концентрации; при этом происходит взаимодействие субстрата с белком-переносчиком на поверхности цитоплазматической мембраны).

36.Дыхание бактерий. (Энергетические потребности бактерий. Основные типы биологического окисления субстрата (аэробный и анаэробный). Аэробы, анаэробы, факультативные анаэробы, микроаэрофилы,аэротолерантные)
Дыхание, или биологическое окисление, основано на окислительно-восстановительных реакциях, идущих с образованием АТФ-универсального аккумулятора химической энергии. Энергия необходима микробной клетке для ее жизнедеятельности. При дыхании происходят процессы окисления и восстановления: окисление  отдача донорами (молекулами или атомами) водорода или электронов; восстановление  присоединение водорода или электронов к акцептору. Акцептором водорода или электронов может быть молекулярный кислород (такое дыхание называется аэробным) или нитрат, сульфат, фумарат (такое дыхание называется анаэробным нитратным, сульфатным, фумаратным).  Анаэробиоз (от греч.аег воздух + bios жизнь) жизнедеятельность, протекающая при отсутствии свободного кислорода. Если донорами и акцепторами водорода являются органические соединения, то такой процесс называется брожением. При брожении происходит ферментативное расщепление органических соединений, преимущественно углеводов, в анаэробных условиях. С учетом конечного продукта расщепления углеводов различают спиртовое, молочнокислое, уксуснокислое и другие виды брожения. По отношению к молекулярному кислороду бактерии можно разделить на три основные группы: облигатные, т.е. обязательные, аэробы, облигатные анаэробы и факультативные анаэробы.
Классификация бактерий по типам дыхания:
Облигатные аэробы (возбудители туберкулеза, чумы, холеры) – микроорганизмы, для оптимального роста которых необходимо 21 % кислорода.
Облигатные анаэробы (возбудители столбняка, ботулизма, газовой анаэробной инфекции, бактероиды, фузобактерии) – бактерии, которые растут при отсутствии свободного молекулярного кислорода за счет процессов брожения. Они получают кислород из органических соединений в процессе их метаболизма. Некоторые из них не выносят даже незначительного количества свободного кислорода.
Факультативные анаэробы (стафилококки, ешерихии, сальмонели, шигели и другие) – приспособились, в зависимости от условий среды (наличию или отсутствию кислорода), переключать свои метаболические процессы с использованием молекулярного кислорода на брожение и наоборот.
Микроаэрофилы (молочнокислые, азотфиксирующие бактерии) – особенная группа микробов, для которых концентрация кислорода при культивировании может быть уменьшена до 2 %. Высшие его концентрации способны задерживать рост.
Капнеические (возбудитель бруцеллеза бычьего типа) – микроорганизмы, которые требуют, кроме кислорода, еще и до 10 % углекислого газа.

37.Пигменты микроорганизмов. Физиологическая роль.Примеры
Многие микроорганизмы в процессе своей жизнедеятельности синтезируют пигменты, различающиеся по цвету, химическому составу и растворимости.
Жирорастворимые, каротиноидные пигменты красного, оранжевого или желтого цветов образуют сарцины, микобактерии туберкулеза, некоторые актиномицеты. Эти пигменты предохраняют их от действия УФ-лучей. Нерастворимые в воде и даже сильных кислотах пигменты черного или коричневого цвета меланины синтезируются облигатными анаэробами Bacteroides niger и др. К пирроловым пигментам ярко-красного цвета относится продигиозин, образуемый некоторыми серациями. Водорастворимые фенозиновые пигменты, например пиоцианин, продуцируются синегнойными бактериями (Pseudomonas aerugino-sa). При этом питательная среда с нейтральным или щелочным рН окрашивается в сине-зеленый цвет.
Цвет пигмента используется в качестве теста для индентификации пигментообразующих бактерий.
Бактерии, растущие на плотных питательных средах, образуют изолированные колонии округлой формы с ровными или неровными краями (S- и R-формы), различной консистенции и цвета, зависящего от пигмента бактерий. Пигменты, растворимые в воде, диффундируют в питательную среду и окрашивают её. Другая группа пигментов нерастворима в воде, но растворима в органических растворителях. И, наконец, существуют пигменты, не растворимые ни в воде, ни в органических соединениях. Наиболее распространены среди микроорганизмов такие пигменты, как каротины, ксантофиллы и меланины. Меланины являются нерастворимыми пигментами черного, коричневого или красного цвета, синтезирующимися из фенольных соединений. Меланины наряду с каталазой, супероксидцисмутазой и пероксидазами защищают микроорганизмы от воздействия токсичных перекисных радикалов кислорода. Многие пигменты обладают антимикробным, антибиотикоподобным действием.

38.Определение биохимической активности микроорганизмов .Сахаролитические свойства

39.Определение биохимической активности микроорганизмов.Пептолитические свойства.

40.Определение биохимической активности микроорганизмов.протеолитические свойства.

41.Рост и размножение бактерий.Фазы роста в жидкой питательной среде.
Размножение бактерий – процесс, обеспечивающий увеличение числа особей в популяции. Бактерии характеризуются высокой скоростью размножения.
Бактерии размножаются поперечным бинарным делением.
На плотных питательных средах бактерии образуют скопления клеток – колонии. На жидких средах рост бактерий характеризуется образованием пленки на поверхности питательной среды, равномерного помутнения или осадка.
Фазы размножение бактериальной клетки на жидкой питательной среде:
1) начальная стационарная фаза(то количество бактерий, которое попало в питательную среду и в ней находится);
2) лаг-фаза (фаза покоя) (начинается активный рост клеток, но активного размножения еще нет);
3) фаза логарифмического размножения (активно идут процессы размножения клеток в популяции);
4) максимальная стационарная фаза (бактерии достигают максимальной концентрации; количество погибших бактерий равно количеству образующихся);
5) фаза ускоренной гибели.

42.Бактериологический (культуральный) метод исследования микроорганизмов. (Материал для исследования: правила забора и доставки в лабораторию. Основные принципы культивирования бактерий. )
Бактериологический метод исследования является важнейшим в практической деятельности любой микробиологической лаборатории. От правильного его выполнения зависит определение этиологического фактора, который вызывал заболевание, и, соответственно, выбор тактики лечения инфекционного больного. Важность этого метода объясняется тем, что во многих случаях врачи имеют дело с микробными ассоциациями, тогда необходимо устанавливать роль каждого из микробов в возникновении болезни.
 Потому перед освоением основных принципов и методов выделения чистых культур необходимо овладеть техникой посевов и пересеваний бактерий в жидких и на плотные питательные среды.
 
Техника посевов микроорганизмов. Посевы проводят как с целью выделение возбудителей из исследуемого материала от больных, так и для нагромождения чистых культур с целью последующего их изучения и идентификации. Техника посевов в жидких и на плотные питательные среды имеет свои особенности.
В левую руку берут две пробирки. В одной находится питательная среда (плотное или жидкое), в другой – исследуемый материал. Пробирки зажимают большим и указательным пальцами. Для того, чтобы можно было наблюдать за содержанием пробирок, их держат сверху кисти руки. Пробирки должны быть кое-что наклоненными, и нужно следить, чтобы при открытии их материал или посторонние микробы зповитря и окружающих предметов из одной не попали в другую. Пробки из пробирок вынимают, держа их 4 и 5 пальцами правой руки. Тремя другими пальцами правой руки, как карандаш, держат бактериологическую петлю или пипетку, которыми распределяют исследуемый материал.
Сначала стерилизуют петлю в верхней части пламени газовой горелки. Пробирки открываюти край их проносят через пламя горелки. Петлю опускают в пробирку, где есть исследуемый материал, и, осторожно касаясь стенки, охлаждают. В последующем петлю опускают в пробирку и набирают материал. Если он находится в жидком состоянии, для посева достаточно капли жидкости, которая задерживается в кильке бактериологической петли. Когда используют микробов, которые выросли на поверхности среды, осторожно плавным движением набирают небольшое количество их, следя, чтобы не повредить питательную среду. Петлю медленно вынимают из пробирки, не касаясь ее стенок, и переносят в другую пробирку со средой. Штриховыми движениями от одной стенки пробирки к другой, начиная с нижней части среды,проводят занял материалу по скошенной поверхности агара снизу кверху.
Петлю вынимают из пробирки, пробки и края пробирок проносят через пламя и закрывают. Петлю прожаривают в пламени, чтобы уничтожить микроорганизмы.
При посеве материала на жидкую питательную среду петлю с материалом окунают в жидкость. Если он не снимается из петли, его осторожно растирают на стенке пробирки и омывают средой.
Материал, который набирали пастеровской или градуированной пипеткой, выливают в питательную среду, а для равномерного распространения его пробирку осторожно, чтобы не замочить пробку, стряхивают или вращают, зажав в ладонях.
Для посева материала на плотную питательную среду в чашках Петри небольшое количество материала набирают стерильной петлей и втирают в поверхность среды возле края чашки.
После этого петлю стерилизуют в пламени, чтобы уничтожить избыток материала, охлаждают. Следующий этап посева начинают с места, где закончился предыдущий. Петлю кладут горизонтально на поверхность агара, где было сделано занял, проводят один-два разы по поверхности и делают занял по остальным среды. Необходимо пытаться, чтобы штрихи посева длились от края к краю чашки, не повреждали поверхности агара и располагались близко друг к другу. Этим искусственно продлевается линия посева и создаются возможности для получения изолированных колоний.
Посев шпателем и тампоном в чашки Петри. Материал предварительно наносят на поверхность питательной среды возле края чашки петлей или пипеткой. Стерильный шпатель проносят через пламя, охлаждают, касаясь стенки чашки. Осторожными круговыми движениями, держа чашку полузакрытой, распределяют материал равномерно по поверхности среды.
При посеве тампоном чашку кое-что открывают одной рукой, тампоном касаются поверхности агара возле края чашки и начинают проводить занял штрихами от края к краю чашки, втирая осторожно материал в поверхность среды, не повреждая его, постепенно вращая тампон. После проведения посева чашку вращают на 90° и повторяют занял перпендикулярно к предыдущему.
При посеве уколом в столбик питательной среды пробирку с м’ясо-пептонним агаром, желатином и тому подобное берут в левую руку, петлю с материалом – в праву и делают укол к дну пробирки в среду. Петлю осторожно вынимают, а пробирку закрывают.
Посев материала в толщу питательной среды. Перед посевом материал должен быть в жидком состоянии. Стерильной градуированной пипеткой набирают 0,1, 0,5 или 1,0 млматериалу и выливают его в стерильные чашки Петри. После этого материал заливают 15-20 млрастопленного и охлажденного до 45-50 °С МПА. Осторожно покачивая чашку, круговыми движениями по поверхности стола перемешивают в ней материал, достигая его равномерного деления в среде. Чашку оставляют закрытой к полномузастудневаниюагара, а затем переворачивают вверх дном.
Для того, чтобы выделить чистую культуру микроорганизмов, следует отделить многочисленные бактерии, которые находятся в материале, одна от другой. Это можно достичь с помощью методов, которые основаны на двух принципах – механическом и биологическомразобщении бактерий.

43.Питательные среды и их классификация.
Классификация питательных сред.
1. По происхождению:
1) естественные (молоко, желатин, картофель и др.);
2) искусственные – среды, приготовленные из специально подготовленных природных компонентов (пептона, аминопептида, дрожжевого экстракта и т. п.);
3) синтетические – среды известного состава, приготовленные из химически чистых неорганических и органических соединений.
2. По составу:
1) простые – мясопептонный агар, мясопептонный бульон;
2) сложные – это простые с добавлением дополнительного питательного компонента (кровяного, шоколадного агара): сахарный бульон, желчный бульон, сывороточный агар, желточно-солевой агар, среда КиттаТароцци.
3. По консистенции:
1) твердые (содержат 3–5 % агар-агара);
2) полужидкие (0,150,7 % агар-агара);
3) жидкие (не содержат агар-агара).
4. По назначению:
1) общего назначения – для культивирования большинства бактерий (мясопептонный агар, мясопептонный бульон, кровяной агар);
2) специального назначения:
а) элективные – среды, на которых растут бактерии только одного вида (рода), а род других подавляется (щелочной бульон, 1 %-наяпептонная вода, желточно-солевой агар, казеиново-угольный агар и др.);
б) дифференциально-диагностические – среды, на которых рост одних видов бактерий отличается от роста других видов по тем или иным свойствам, чаще биохимическим (среда Эндо, Левина, Гиса, Плоскирева и др.);
в) среды обогащения – среды, в которых происходит размножение и накопление бактерий-возбудителей какого-либо рода или вида (селенитовый бульон).

44. Методы выделения чистых культур аэробных бактерий
Для получения чистой культуры необходимо владеть методами выделения чистых культур:
1. Механическое разобщение (метод штриха обжигом петли, метод разведений в агаре, распределение по поверхности твердой питательной среды шпателем, метод Дригальского).
2. Использование элективных питательных сред.

45.Методы культивирования и выделения чистых культур анаэробных бактерий. (Температурный режим, концентрация водородных ионов (рН) и окислительно-восстановительный потенциал. )
В лабораторной практике часто придется работать с анаэробными микроорганизмами. Они более прихотливы к питательным средам, чем аэробы, чаще нуждаются в специальных ростовых добавках, требуют прекращения доступа кислорода при их культивировании, длительность роста их длиннее. Потому работа с ними более сложна, требует значительного внимания бактериологов и лаборантов.
Важной является защита материала, который содержит анаэробные возбудители от токсичного влияния атмосферного кислорода. Потому материал из очагов гнойной инфекции рекомендуется забирать во время их пункции с помощью шприца, время между взятием материала и посевом его на питательную среду должно быть максимально коротким.
Поскольку для культивирования анаэробных бактерий используют специальные питательные среды, которые не должны содержать кислорода и имеют низкий окислительно восстановительный потенциал (-20 -150 мВ), к их составу вводят индикаторы – резазурин,метиленовий синей и тому подобное, которые реагируют на смену этого потенциала. При его росте возобновлены бесцветные формы индикаторов изменяют свой цвет: резазурин окрашивает среду в розовый цвет, а метиленовий синей – в голубой. Такие изменения свидетельствуют о невозможности использования сред для культивирования анаэробных микробов.
Способствует снижению окислительно восстановительного потенциала введения в среду не меньше 0,05 % агару, который, увеличивая его вязкость, способствует уменьшению поступления кислорода. Это, в свою очередь, достигается еще и использованием свежих (не позже двух часов после изготовления) и редуцируемых питательных сред.
Следует учесть, что через особенности бродильного типа метаболизма анаэробных бактерий они требуют более богатых на питательные компоненты и витамины сред. Чаще всего используют сердечно мозговой и печеночный настои, соевые и дрожжевые экстракты,гидролитичнийперевар казеина, пептон, триптон. Обязательным является добавление факторов росту, таких как твин-80, гемин, менадион, цельная или гемолизированная кровь.
Физические методы. 1. Перед посевом бактерий на питательную среду его обязательно регенерируют для удаления избытка растворенного кислорода. С этой целью среду кипятят в течение 15-20 мин на водяной бане, а затем быстро охлаждают к необходимой температуре.
2. Для предупреждения проникненя кислорода в среду его заливают слоем стерильного вазелинового масла или парафином.
3. Столбик питательной среды в пробирках должен быть достаточно высоким (10-12 см). Кислород, как правило, дифундирует в толщу столбика на глубину до 2 см, потому ниже создаются благоприятные условия для культивирования анаэробных микробов.
4. Эвакуационно заместительный метод заключается в использовании анаэростатов. Они представляют собой герметические металлические или пластмассовые банки, из которых можно выкачать кислород и заменить его инертным газом (гелий, азот, аргон). Допускается использование трехкомпонентной газовой смеси, которая состоит из 80 % азота, 10 % диоксидууглерода и 10 % водорода. Порой допустимым считается использование природного газа. Для поглощения кислорода, который остается в анаэростате, используют палладиевые катализаторы. С целью поглощения водяной пары используют хлорид кальция, силикагель и тому подобное, которые помещают на дно анаеростата.
Химические методы. 1. Использование веществ, способных поглощать кислород. С этой целью допустимым является применение щелочного раствора пирогаллола. При этом учитывают поглощающую активность вещества: на 100 мл емкости герметического сосуда, в котором находятся чашки Петри, используют 1 г пирогаллола и 10 мл 2,5 N раствора гидроксида натрия.
Кислородосвязывающий эффект имеет также гидросульфит натрия (Na2S2O4). Для связывания кислорода в 1 л воздуха используют смесь, которая состоит из 100 мл свежего 20 % раствору Na2S2O4 и 16 мл 50 % гидроксида калия.
2. Применение веществ-редуцентов. Учитывая, что рост облигатно-анаэробных бактерий происходит в средах с низким уровнем окислительно восстановительного потенциала, к ним добавляются специальные восстановители: цистеин (0,03-0,0,5 %), тиогликолевую кислоту илитиогликолат натрия (0,01-0,02 %), сульфид натрия, аскорбиновую кислоту (0,1 %), разнообразные сахара.
Функции обновителей могут выполнять кусочки паренхиматозних органов животных (печенка, почки, сердце) или даже растений (картофель, другие корнеплоды).
Степень поглощения кислорода или степень возобновления среды измеряют или электрометрически или с помощью индикаторов (резазурин, нейтральный красный,феносафранин).
3. Использование специальных газогенерирующих систем, которые позволяют создать бескислородные условия в микроанаеростатах, транспортных пластиковых пакетах и тому подобное. Одной из самых распространенных есть система “GasGeneratingBox”. В ее состав входят химические генераторы водорода (борогидрит натрию) и углекислого газа (таблетки бикарбоната натрия и лимонной кислоты), а также палладиевый катализатор, который поглощает кислород.
Чашки с посевами помещаются в микроанаеростат, на дне которого находится слой палладиевого катализатору. Кончик пакета “GasGeneratingBox” надрезают ножницами, и у него наливают 10-15 мл воды. Пакет располагают в микроанаеростати. Через 15-20 мин в нем создаются анаэробные условия. Водород, который выделяется, взаимодействует с кислородом, образовывая воду, а углекислота продуцируется при взаимодействии бикарбоната натрия с лимонной кислотой.

46.Особенности культивирования риккетсий, хламидий, микоплазм.
Основные методы культивирования вирусов:
1) биологический – заражение лабораторных животных. При заражении вирусом животное заболевает;
2) культивирование вирусов в развивающихся куриных эмбрионах. Куриные эмбрионы выращивают в инкубаторе 710 дней, а затем используют для культивирования.
В результате заражения могут происходить и появляться:
1) гибель эмбриона;
2) дефекты развития;
3) накопление вирусов в аллантоисной жидкости;
4) размножение в культуре ткани.
Различают следующие типы культур тканей:
1) перевиваемые – культуры опухолевых клеток; обладают большой митотической активностью;
2) первично трипсинизированные – подвергшиеся первичной обработке трипсином; эта обработка нарушает межклеточные связи, в результате чего выделяются отдельные клетки.
Для поддержания клеток культуры ткани используют специальные среды. Это жидкие питательные среды сложного состава, содержащие аминокислоты, углеводы, факторы роста, источники белка, антибиотики и индикаторы для оценки развития клеток культуры ткани.
О репродукции вирусов в культуре ткани судят по их цитопатическому действию.
Основные проявления цитопатического действия вирусов:
1) размножение вируса может сопровождаться гибелью клеток или морфологическими изменениями в них;
2) некоторые вирусы вызывают слияние клеток и образование многоядерного синцития;
3) клетки могут расти, но не делиться, в результате чего образуются гигантские клетки;
4) в клетках появляются включения (ядерные, цитоплазматические, смешанные). Включения могут окрашиваться в розовый цвет (эозинофильные включения) или в голубой (базофильные включения);
5) если в культуре ткани размножаются вирусы, имеющие гемагглютинины, то в процессе размножения клетка приобретает способность адсорбировать эритроциты (гемадсорбция).

47. Понятие о вирионе, вирусе. Современные принципы классификации и номенклатуры вирусов.
Вирусы мельчайшие микробы, не имеющие клеточного строения, белоксинтезирующей системы, содержащие только ДНК или РНК. Относятся к царству Vira. Являясь облигатными внутриклеточными паразитами, вирусы размножаются в цитоплазме или ядре клетки. Они автономные генетические структуры. Отличаются особым разобщенным (дисъюнктивным) способом размножения (репродукции): в клетке отдельно синтезируются нуклеиновые кислоты вирусов и их белки, затем происходит их сборка в вирусные частицы. Сформированная вирусная частица называется вирионом.
Морфологию вирусов изучают с помощью электронной микроскопии, так как их размеры малы (18-400 нм) и сравнимы с толщиной оболочки бактерий.
Форма вирионов может быть различной: палочковидной (вирус табачной мозаики), пулевидной (вирус бешенства), сферической (вирусы полиомиелита, ВИЧ), нитевидной (филовирусы), в виде сперматозоида (многие бактериофаги). Различают просто устроенные и сложно устроенные вирусы.
Простые, или безоболочечные, вирусы состоят из нуклеиновой кислоты и белковой оболочки, называемой капсидом. Капсид состоит из повторяющихся морфологических субъединиц капсомеров. Нуклеиновая кислота и капсид взаимодействуют друг с другом, образуя нуклеокапсид.
Сложные, или оболочечные, вирусы снаружи капсида окружены ли-попротеиновой оболочкой (суперкапсидом, или пеплосом). Эта оболочка является производной структурой от мембран вирус-инфицированной клетки. На оболочке вируса расположены гликопротеиновые шипы, или шипики(пепломеры). Под оболочкой некоторых вирусов находится матриксный М-белок.
Тип симметрии. Капсидили нуклеокапсидмогут иметь спиральный, икосаэдрический (кубический) или сложный тип симметрии. Икосаэдрическийтип симметрии обусловлен образованием изометрически полого тела из капсида, содержащего вирусную нуклеиновую кислоту (например, у вирусов гепатита А, герпеса, полиомиелита). Спиральныйтип симметрии обусловлен винтообразной структурой нуклеокапсида (например, у вируса гриппа).
Включения скопление вирионов или отдельных их компонентов в цитоплазме или ядре клеток, выявляемые под микроскопом при специальном окрашивании. Вирус натуральной оспы образует цитоплазмати-ческие включения тельца Гварниери; вирусы герпеса и аденовирусы внутриядерные включения.
Название семейства вирусов заканчивается на “viridae”, рода- “virus”, для вида обычно используют специальные названия, например - вирус краснухи, вирус иммунодефицита человека- ВИЧ, вирус парагриппа человека типа 1 и т.д.

48.Вирион, его морфология, строение и химический состав. Понятие о вироиде и прионах.
Порины – это белки, образующие поры. Они являются основными белками наружной мембраны.
Молекула порина состоит из трех идентичных мономеров, т.е. является тримером. Каждый мономер представляет собой цилиндр, образованный 16-18 антипараллельными бета-тяжами, который окружает водонаполненный канал. Пориныиммуногенны, они являются протективными антигенами. В этом качестве порины обладают рядом преимуществ перед традиционно применяемыми липополисахаридами: они являются видоспецифическими антигенами, иммунный ответ к ним носит Т-зависимый характер, они не токсичны. Эти обстоятельства в последние годы привели к созданию на основе поринов эффективных препаратов для защиты от ряда инфекций. Порины являются перспективными диагностическими антигенами.

49.Репродукция вирусов. (Стадии взаимодействия вируса с клеткой-хозяином при репродуктивной и интегративной инфекции.Понятие о вирогении, ее механизмы и последствия для клетки.)
Существует четыре типа взаимодействия:
1) продуктивная вирусная инфекция (происходит репродукция вируса, а клетки погибают);
2) абортивная вирусная инфекция (репродукции вируса не происходит, а клетка восстанавливает нарушенную функцию);
3) латентная вирусная инфекция (идет репродукция вируса, а клетка сохраняет свою функциональную активность);
4) вирус-индуцированная трансформация (клетка, инфицированная вирусом, приобретает новые, свойства).
Исходы взаимодействия вирусов с клеткой хозяина. 1.Абортивный процесс- когда клетки освобождаются от вируса: - при инфицировании дефектным вирусом, для репликации которого нужен вирус- помощник, самостоятельная репликация этих вирусов невозможна ( так называемые вирусоиды). Например, вирус дельта (D) гепатита может реплицироваться только при наличии вируса гепатита B, его Hbs - антигена, аденоассоциированный вирус- в присутствии аденовируса); - при инфицировании вирусом генетически нечувствительных к нему клеток; - при заражении чувствительных клеток вирусом в неразрешающих условиях. 2.^ Продуктивный процесс- репликация (продукция) вирусов: - гибель (лизис) клеток (цитопатический эффект)- результат интенсивного размножения и формирования большого количества вирусных частиц - характерный результат продуктивного процесса, вызванного вирусами с высокой цитопатогенностью. Цитопатический эффект действия на клеточные культуры для многих вирусов носит достаточно узнаваемый специфический характер; - стабильное взаимодействие, не приводящее к гибели клетки (персистирующие и латентные инфекции) - так называемая вирусная трансформация клетки. 3.^ Интегративный процесс- интеграция вирусного генома с геномом клетки хозяина. Это особый вариант продуктивного процесса по типу стабильного взаимодействия. Вирус реплицируется вместе с геномом клетки хозяина и может длительно находиться в латентном состоянии. Встраиваться в ДНК- геном хозяина могут только ДНК- вирусы (принцип “ДНК- в ДНК”). Единственные РНК- вирусы, способные интегрироваться в геном клетки хозяина- ретровирусы, имеют для этого специальный механизм. Особенность их репродукции- синтез ДНК провируса на основе геномной РНК с помощью фермента обратной транскриптазы с последующим встраиванием ДНК в геном хозяина.

50.Методы культивирования вирусов.( в клеточных культурах (первичных, полуперевиваемых перевиваемых), в куриных эмбрионах и в организме животных).
Культуры клеток готовят из тканей животных или человека. Культуры подразделяют на первичные (неперевиваемые), полуперевиваемые и перевиваемые.  ^ Приготовление первичной культуры клеток складывается из нескольких последовательных этапов: измельчения ткани, разъединения клеток путем трипсинизации, отмывания полученной однородной суспензии изолированных клеток от трипсина с последующим суспендированием клеток в питательной среде, обеспечивающей их рост, например в среде 199 с добавлением телячьей сыворотки крови. ^ Перевиваемые культуры в отличие от первичных адаптированы к условиям, обеспечивающим им постоянное существование invitro, и сохраняются на протяжении нескольких десятков пассажей. Перевиваемые однослойные культуры клеток приготовляют из злокачественных и нормальных линий клеток, обладающих способностью длительно размножаться invitro в определенных условиях. К ним относятся злокачественные клетки HeLa, первоначально выделенные из карциномы шейки матки, Нер-3 (из лимфоидной карциномы), а также нормальные клетки амниона человека, почек обезьяны и др. ^ К полуперевиваемым культурам относятся диплоидные клетки человека. Они представляют собой клеточную систему, сохраняющую в процессе 50 пассажей (до года) диплоидный набор хромосом, типичный для соматических клеток используемой ткани. Диплоидные клетки человека не претерпевают злокачественного перерождения и этим выгодно отличаются от опухолевых. ^ О размножении (репродукции) вирусов в культуре клеток судят по цитопатическому действию (ЦПД), которое может быть обнаружено микроскопически и характеризуется морфологическими изменениями клеток.  Характер ЦПД вирусов используют как для их обнаружения (индикации), так и для ориентировочной идентификации, т. е. определения их видовой принадлежности. ^ Один из методов индикации вирусов основан на способности поверхности клеток, в которых они репродуцируются, адсорбировать эритроциты реакция гемадсорбции. Для ее постановки в культуру клеток, зараженных вирусами, добавляют взвесь эритроцитов и после некоторого времени контакта клетки промывают изотоническим раствором хлорида натрия. На поверхности пораженных вирусами клеток остаются прилипшие эритроциты. ^ Другой метод реакция гемагглютинации (РГ). Применяется для обнаружения вирусов в культуральной жидкости культуры клеток либо хорионаллантоисной или амниотической жидкости куриного эмбриона.  ^ Количество вирусных частиц определяют методом титрования по ЦПД в культуре клеток. Для этого клетки культуры заражают десятикратным разведением вируса. После 67-дневной инкубации их просматривают на наличие ЦПД. За титр вируса принимают наибольшее разведение, которое вызывает ЦПД в 50 % зараженных культур. Титр вируса выражают количеством цитопатических доз. ^ Более точным количественным методом учета отдельных вирусных частиц является метод бляшек.  Некоторые вирусы можно обнаружить и идентифицировать по включениям, которые они образуют в ядре или цитоплазме зараженных клеток. ^ Куриные эмбрионы. Куриные эмбрионы по сравнению с культурами клеток значительно реже бывают контаминированы вирусами и микоплазмами, а также обладают сравнительно высокой жизнеспособностью и устойчивостью к различным воздействиям. Для получения чистых культур риккетсий, хламидий. и ряда вирусов в диагностических целях, а также для приготовления разнообразных препаратов (вакцины, диагностикумы) используют 812-дневные куриные эмбрионы. О размножении упомянутых микроорганизмов судят по морфологическим изменениям, выявляемым после вскрытия эмбриона на его оболочках. О репродукции некоторых вирусов, например гриппа, оспы, можно судить по реакции гемагглютинации (РГА) с куриными или другими эритроцитами. К недостаткам данного метода относятся невозможность обнаружения исследуемого микроорганизма без предварительного вскрытия эмбриона, а также наличие в нем большого количества белков и других соединений, затрудняющих последующую очистку риккетсий или вирусов при изготовлении различных препаратов. ^ Лабораторные животные. Видовая чувствительность животных к определенному вирусу и их возраст определяют репродуктивную способность вирусов. Во многих случаях только новорожденные животные чувствительны к тому или иному вирусу (например, мыши-сосунки к вирусам Коксаки). Преимущество данного метода перед другими состоит в возможности выделения тех вирусов, которые плохо репродуцируются в культуре или эмбрионе. К его недостаткам относятся контаминация организма подопытных животных посторонними вирусами и микоплазмами, а также необходимость последующего заражения культуры клеток для получения чистой линии данного вируса, что удлиняет сроки исследования.

51.Индикация вирусов .(по цитопатическому действию, реакциям гемагглютинации и гемадсорбции, бляшкообразованию, внутриклеточным включениям.
О размножении (репродукции) вирусов в культуре клеток судят по цитопатическому действию (ЦПД), которое может быть обнаружено микроскопически и характеризуется морфологическими изменениями клеток.  Характер ЦПД вирусов используют как для их обнаружения (индикации), так и для ориентировочной идентификации, т. е. определения их видовой принадлежности. ^ Один из методов индикации вирусов основан на способности поверхности клеток, в которых они репродуцируются, адсорбировать эритроциты реакция гемадсорбции. Для ее постановки в культуру клеток, зараженных вирусами, добавляют взвесь эритроцитов и после некоторого времени контакта клетки промывают изотоническим раствором хлорида натрия. На поверхности пораженных вирусами клеток остаются прилипшие эритроциты. ^ Другой метод реакция гемагглютинации (РГ). Применяется для обнаружения вирусов в культуральной жидкости культуры клеток либо хорионаллантоисной или амниотической жидкости куриного эмбриона.  ^ Количество вирусных частиц определяют методом титрования по ЦПД в культуре клеток. Для этого клетки культуры заражают десятикратным разведением вируса. После 67-дневной инкубации их просматривают на наличие ЦПД. За титр вируса принимают наибольшее разведение, которое вызывает ЦПД в 50 % зараженных культур. Титр вируса выражают количеством цитопатических доз. ^ Более точным количественным методом учета отдельных вирусных частиц является метод бляшек.  Некоторые вирусы можно обнаружить и идентифицировать по включениям, которые они образуют в ядре или цитоплазме зараженных клеток.

52. Идентификация вирусов.
Идентификация вирусов - лабораторный процесс определения систематического положения неизвестного штамма вирусов вплоть до вида или варианта.

53.Морфологические и структурные особенности фагов. (Химический состав.Вирулентные и умеренные фаги.)
Бактериофаги  вирусы бактерий, обладающие способностью специфически проникать в бактериальные клетки, репродуцироваться в них и вызывать их растворение (лизис). ^ Взаимодействие фага с бактериальной клеткой. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги.  Вирулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, автономно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий. Процесс взаимодействия вирулентного фага с бактерией протекает в виде нескольких стадий и весьма схож с процессом взаимодействия вирусов человека и животных с клеткой хозяина. Однако для фагов, имеющих хвостовой отросток с сокращающимся чехлом, он имеет особенности. Эти фаги адсорбируются на поверхности бактериальной клетки с помощью фибрилл хвостового отростка. В результате активации фагового фермента АТФазы происходит сокращение чехла хвостового отростка и внедрение стержня в клетку. В процессе «прокалывания» клеточной стенки бактерии принимает участие фермент лизоцим, находящийся на конце хвостового отростка. Вслед за этим ДНК фага, содержащаяся в головке, проходит через полость хвостового стержня и активно впрыскивается в цитоплазму клетки. Остальные структурные элементы фага (капсид и отросток) остаются вне клетки. После биосинтеза фаговых компонентов и их самосборки в бактериальной клетке накапливается до 200 новых фаговых частиц. Под действием фагового лизоцима и внутриклеточного осмотического давления происходит разрушение клеточной стенки, выход фагового потомства в окружающую среду и лизис бактерии. Один литический цикл (от момента адсорбции фагов до их выхода из клетки) продолжается 3040 мин. Процесс бактериофагии проходит несколько циклов, пока не будут лизированы все чувствительные к данному фагу бактерии. Умеренные фаги лизируют не все клетки в популяции, с частью из них они вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае геномом фага называют профаг. Профаг, ставший частью хромосомы клетки, при ее размножении реплицируется синхронно с геном бактерии, не вызывая ее лизиса, и передается по наследству от клетки к клетке неограниченному числу потомков.  Биологическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бактерий, содержащая профаг, получила название лизогенной. Это название отражает способность профага самопроизвольно или под действием ряда физических и химических факторов исключаться из хромосомы клетки и переходить в цитоплазму, т. е. вести себя как вирулентный фаг, лизирующий бактерии. Лизогенные культуры посвоим основным свойствам не отличаются от исходных, но они невосприимчивы к повторному заражению гомологичным или близкородственным фагом и, кроме того, приобретают дополнительные свойства, которые находятся под контролем генов профага. Изменение свойств микроорганизмов под влиянием профага получило название фаговой конверсии. Последняя имеет место у многих видов микроорганизмов и касается различных их свойств: культуральных, биохимических, токсигенных, антигенных, чувствительности к антибиотикам и др. Кроме того, переходя из интегрированного состояния в вирулентную форму, умеренный фаг может захватить часть хромосомы клетки и при лизисе последней переносит эту часть хромосомы в другую клетку. Если микробная клетка станет лизогенной, она приобретает новые свойства. Таким образом, умеренные фаги являются мощным фактором изменчивости микроорганизмов.

54. Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой.
^ Взаимодействие фагов с бактериальной клеткой характеризуется определенной степенью специфичности. По специфичности действия различают поливалентные фаги, способные взаимодействовать с родственными видами бактерий, моновалентные фаги, взаимодействующие с бактериями определенного вида, и типовые фаги, взаимодействующие с отдельными вариантами (типами) данного вида бактерий.

55.Лизогения и ее значение. Профаг. Дефектные фаги. Фаговая конверсия.
В некоторых случаях вирулентных свойств фага оказывается недостаточно для разрушения бактерии. Подобные вирусы  умеренные фаги  претерпевают любопытные превращения, известные как редукция фага. При этом процессе ДНК вируса не вызывает образования вирусспецифических белков и нуклеиновых кислот, но включается в бактериальную хромосому. С практической точки зрения бактерия приобретает новый набор генов (встроенного вируса), а также становится «иммунной» к повторному заражению (интерференция вирусов).
Подобный феномен известен как лизогения, а популяции бактерий как лизогенные культуры. ДНК умеренного вируса реплицирует синхронно с размножением лизогенной бактерии, н иногда (примерно в одной из 102-105 подобных бактерий) фаг начинает спонтанно размножаться, а клетка подвергается лизису. Некоторые умеренные фаги (например, участвующие в про цессах трансдукции бактерий) не способны образовывать дочерние популяции, то есть являются дефектными вирусами. Дефектные фаги используют как векторы в генной инженерии. Вирусная ДНК может длительно сохраняться в бактериальном потомстве. Такие латентные бактериофаги известны как провирусы, или профаги.
Сохранение способности к инфицированию у умеренного фага зависит от низкомолекулярного белкового репрессора, кодируемого вирусной ДНК и «выключающего» все вирулентны функции бактериофага.
Переход умеренного фага на литический цикл развития происходит при нарушениях синтез белкового репрессора. При этом встроенный в геном бактерии вирус проявляет все свои вирулентные свойства, репродуцируется и лизирует клетки, а также может инфицировать другие бактерии. Переход умеренного бактериофага в литический invitro можно вызвать воздействиет на бактерии ряда факторов. Например, если лизогенные культуры подвергнуть УФ-облученик действию Н202 или создать в среде избыток некоторых питательных веществ и витаминов, так происходит немедленная стимуляция вирулентных свойств фага индукция фага.
Ассоциация фаговой ДНК с геномом бактерии способна качественно изменять свойства бак термиальной клетки. Например, известны различные бактерии, вирулентные свойства которых (обычно в виде экзотоксинов или адгезинов) кодируются лизогенными фагами. Иными словами лизогенная бактерия будет вирулентной, тогда как её нелизогенный двойник останется безвредным. У других бактерий присутствие профага вызывает изменение морфологии или антигенных свойств. Такое изменение генетических свойств, вызванное вирусной ДНК, обозначают терми нами «инфекционная наследственность» или «лизогенная (фаговая) конверсия».
При лизогении происходит изменение наследственных свойств не только бактериальной клетки, н и фага; размножаясь в клетке, он способен захватывать некоторые гены бактерии и, инфицируя другую клетку, передаёт приобретённые гены новому хозяину. Подобная передача (трансдукция) во многом аналогична генетической рекомбинации у высших растений и животных.
56.Распространение фагов в природе. Применение фагов в микробиологии и медицине( использование для идентификации и типирования бактерий (понятие о фаговаре), в расследовании вспышек внутрибольничных инфекций, в терапии и профилактике инфекционных болезней. Фаги как показатели бактериального загрязнения объектов окружающей среды.)
аги широко распространены в природе.
Выделить их можно из различных субстратов, в которых имеются микробы хозяева фагов. Кишечные фаги можно выделить из сточных вод, почвы, испражнений, стафилококковые фаги из слизи носа, зева, с кожных покровов, из отделяемого ран. В настоящее время известны фаги почти у всех патогенных и многих непатогенных микроорганизмов: у бактерий семейства кишечных, коринебактерий, микобактерий, стрептококков, споровых микроорганизмов, актиномицетов. Фаги и подобные им агенты не обнаружены у простейших, большинства дрожжей, плесневых грибов, спирохет, водорослей.
Выделение бактериофага из исследуемого материала и объектов внешней среды производят обычно в тех случаях, когда не удается выделить культуру микроорганизма. Для выделения фага производят посев фильтрата исследуемого материала на плотные или жидкие питательные среды одновременно с культурой микробов, на которых происходит размножение искомого фага (тест-культура). О наличии фага судят по отсутствию роста тест-культуры. Постановку опыта всегда сопровождают контрольным посевом тест-культуры бактерий на питательные среды. В контрольной пробирке должен наблюдаться рост микробов, т. е. помутнение среды. На плотных питательных средах фаги обнаруживают методами Отто или Грациа, которые можно использовать также для подсчета количества фаговых корпускул в исследуемом материале. После выявления фага в исследуемом материале определяют его количественное содержание, или титр фага. 


57. Организация генетического аппарата у бактерий и вирусов.( Бактериальная хромосома. Гено- и фенотип. Генотипическая изменчивость. )
Бактериальный геном состоит из генетических элементов, способных к самостоятельной репликации, т. е. репликонов. Репликонами являются бактериальная хромосома и плазмиды. Наследственная информация хранится у бактерий в форме последовательности нуклеотидов ДНК, которые определяют последовательность аминокислот в белке. Каждому белку соответствует свой ген, т. е. дискретный участок на ДНК, отличающийся числом и специфичностью последовательности нуклеотидов. Бактериальная хромосома представлена одной двухцепочечной молекулой ДНК кольцевой формы. Размеры бактериальной хромосомы у различных представителей царства Procaryotaeварьируют. Бактериальная хромосома формирует компактныйнуклеоид бактериальной клетки. Бактериальная хромосома имеет гаплоидный набор генов. Она кодирует жизненно важные для бактериальной клетки функции. Плазмиды бактерий представляют собой двухцепочечные молекулы ДНК. Они кодируют не основные для жизнедеятельности бактериальной клетки функции, но придающие бактерии преимущества при попадании в неблагоприятные условия существования. Свойства микроорганизмов, как и любых других организмов, определяются их генотипом, т.е. совокупностью генов данной особи. Термин «геном» в отношении микроорганизмов почти синоним понятия «генотип». Фенотип представляет собой результат взаимодействия между генотипом и окружающей средой, т. е. проявление генотипа в конкретных условиях обитания. Фенотип микроорганизмов хотя и зависит от окружающей среды, но контролируется генотипом, так как характер и степень возможных для данной клетки стенотипических изменений определяются набором генов, каждый из которых представлен определенным участком молекулы ДНК. В основе изменчивости лежит либо изменение реакции генотипа на факторы окружающей среды, либо изменение самого генотипа в результате мутации генов или их рекомбинации. В связи с этим фенотипическую изменчивость подразделяют на наследственную и ненаследственную. Ненаследственная (средовая, модификационная) изменчивость обусловлена влиянием внутри- и внеклеточных факторов на проявление генотипа. При устранении фактора, вызвавшего модификацию, данные изменения исчезают. Наследственная (генотипическая) изменчивость, связанная с мутациями, мутационная изменчивость. Основу мутации составляют изменения последовательности нуклеотидов в ДНК, полная или частичная их утрата, т. е. происходит структурная перестройка генов, проявляющаяся фенотипически в виде измененного признака. Наследственная изменчивость, связанная с рекомбинациями, называется рекомбинационной изменчивостью.

58.Плазмиды бактерий. Определение и общая характеристика.(Конъюгативные и неконъюгативныеплазмиды. Виды плазмид (F, R, Col, Ent, Hly и др.) и их роль в детерминировании патогенных признаков и лекарственной устойчивости у бактерий.)
Упрокариот имеются особые гены, способные перемещаться вдоль ДНК и встраиваться в новые места.  Это «прыгающие» гены – ТРАНСПОЗОНЫ (включают около 2 тыс пар НКт). Они обеспечивают устойчивость к антибиотикам, изменчивость и Мт (встраиваясь в новые места во время транскрипции, нарушают последовательность НКт). По обе стороны от транспозона расположены 2 одинаковые последовательности НКт (>800) – это IS–ЭЛЕМЕНТЫ (“ВСТАВОЧНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ”), к/е содержат гены, не контролирующие признаки бактерий, но встраиваясь в ДНК вместе с транспозонами или без них перестраивают геном > мутации.
В цтпл Б! м.б. доп АВТОНОМНЫЕ уч-ки ДНК, имеющие 2-хцепочечную структуру и пальцевидную форму, но в сотни раз < основной ДНК. Это ПЛАЗМИДЫ, в 1
· их м.б. до 20 штук. Они не обязательны для жизни 
·, но и без них 
· нормально функционировать не может. Плазмиды обладают след св!!:
- Контролируют отдельные пр!! Б
·
- Способны интегрировать с хромосомой 
· и выходить из её состава.
- Способны к транслокации, т.е. к самостоятельному перемещению из 1 
· в др (ТРАНСМИССИВНЫЕ или КОНЪЮГАТИВНЫЕ плазмиды) или в составе хромосомы.
Существует множество ВИДОВ плазмид, например:
R–плазимда – резистивные, состоят из 2 основных генов. Один отвечает за конъюгативныесв!! плазмиды, др – за устойчивость к лек-вам (антибиотикам), чем больше генов, тем к большему числу препаратов устойчив мк
·. 
F–плазимда – фертильность (плодовитость). Она определяет пол Б
·. Если она есть в 
·, то это F+ клетка (>), если нет, то F– (+). Эта плазимда может перемещаться из 
· в 
·, при этом если в F–, то она становится F+. F–плазимда контролирует образование на поверхности бактерии особых СЕКС–ПИЛЕЙ – полый трубочки, через которые при размножении перемещается генетический материал. Часто встраивается в основную хромосому клетки.
Col–плазимда – получила название от E.coli, у к/й они впервые были обнаружены. Контролирует выработку токсических белков – БАКТЕРИОЦИНОВ, применительно к разным видам бактерий имеют свои названия, например, E.coli – колицины. Бактериоцины губительно д-ют на др Б!! особенно в пределах семейства, что даёт селективное преимущество и позволяет расширять своё жизненное пространство.
Плазимды, контролирующие образование адгезинов – спец выростов, с пом к/х Б! крепится к поверхности 
· (особенно важно при колонизации слизистых оболочек), это м.б. ПИЛИ АДГЕЗИИ млмдр структуры.
Ent–плазимда – содержит информацию об ЭНТЕРОТОКСИНАХ, вызывающихдиаррейные состояния, т.к. токсичны для 
·
· слизистой ЖКТ.
Hly–плазимда – информация о синтезе ГЕМОЛИЗИНОВ – это токсины, способные разрушать мембрану эритроцитов и вызывать гемолиз. С их помощью мк
·получаетFe, необходимое для жизнедеятельности.
Vir–плазимда – ВИРУЛЕНТНОСТЬ.
В качестве плазмид рассматривается и геном бактериофага, если он располагается автономно в цитоплазме, а не встроен в хромосому.

59.Модификация бактерий и вирусов.
Генотип – совокупность всех генов, присущих данному организму, т.е. его генетическая конституция.
Фенотип – внешнее, видимое проявление генотипа, обусловленное им и воздействием окружающей среды.
ИЗМЕНЧИВОСТЬ – совокупность различий по признаку м/у 
·
· одного вида или популяции.
Фенотипические изменения – МОДИФИКАЦИЯМИ, при этом изменений ДНК не происходит, и вскоре они утрачиваются. Модификации возникают в ответ на изменение условий окр среды и позволяют мк
· быстро адаптироваться и сохранять свою жизнеспособность. Проявляются в изменении морфологических, БХ и других признаков, после устранения действия фактора, происходит реверсия.
В основе – индукция и репрессия соответствующих генов (например, E.coli только в присутствии лактозы синтезирует необходимые ферменты, стафилококки – в присутствии пенициллина синтезируют разрушающий его фермент).
К модификациям можно отнести включение «МОЛЧАЩИХ» ГЕНОВ, в результате чего происходит смена их антигенов в ходе инфекционного заболевания.
Модификации могут возникать под непосредственным действием антибиотиков, при этом образуются L-формы, лишенные 
· стенки. Они могут сохраняться и даже размножаться внутри 
·
· хозяина, после прекращения действия антибиотика вновь реверсировать к исходной форме.

60.Мутации бактерий ( спонтанные и индуцированные, генные и хромосомные, прямые и обратные. )
МУТАЦИИ – изменения в структуре ДНК, закрепляются и прередаются по наследству. Классифицируют по происхождению, характеру изменений в структуре ДНК, фенотипическим последствиям и др.
По ПРОИСХОЖДЕНИЮ мутации подразделяют на:
спонтанные – составляют естественный фон. Они появляются под влиянием разных причин: ОШИБКИ в репарирации или репликации ДНК, ошибочное включения в дочернюю цепь НЕКОМПЛЕМЕНТАРНОГО АО (А=Т, Г?Ц), ИНСЕРТАЦИОННЫЕ мутации (insertion – вставка, возникают при встраивании в хромосому микробной
· Is-последовательностей, транспозонов и плазмид, при наличии ГЕНОВ-МУТАТОРОВ частота мутаций увеличивается в >100 раз).
индуцированные – получают под влиянием мутагенов.
По КОЛИЧЕСТВУ МУТИРОВАВШИХ ГЕНОВ:
ГЕННЫЕ – затрагивают один ген, чаще всего – точковые,
Точковые – замену или вставку пары АО в ДНК > изменение 1 кодона 
· вместо одной АК кодируется другая или нонсенскодон (нонсенсмутация) – это ПРЯМАЯМт. Впоследствии может возникнуть вторичная (ОБРАТНАЯ) мутация в этом же гене > восстановление дикого генотипа и фенотипа.
Вставка или выпадение одной пары АО > изменение всех последующих кодонов в пределах 1 гена (Мт со сдвигом считывания).
хромосомные – распространяются на несколько генов, возникают в результате выпадения нуклеотидов (ДЕЛЕЦИЯ), поворота участка ДНК на 180° (ИНВЕРСИЯ), повторения фрагмента ДНК (ДУПЛИКАЦИЯ). Один из механизмов связан с перемещением Is-ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ и ТРАНСПОЗОНОВ из одного участка ДНК в другой или из хромосомы в плазмиду и наоборот > нарушается функция гена.
По ФЕНОТИПИЧЕСКИМ ПОСЛЕДСТВИЯМ:
Нейтральные –фенотипически не проявляются.
Условно-летальные – приводят к изменению функциональной активности фермента. В зависимости от условий окр среды мк
· могут сохранять свою жизнеспособность или утрачивать ее. Так, например, ts-мутанты (температурочувствительные) могут синтезировать ферменты, активные при 37°С, но неактивные при 42 °С, у Б!! дикого типа – активны при обеих t°C.
Летальные – характеризуются полной утратой способности синтезировать жизненно важные ферменты (особенно ДНК-полимераз).
Мутации проявляются в фенотипе в виде утраты или изменения морфологических и БХ признаков: жгутиков, пилей, капсулы, 
· стенки; способности ферментировать углеводы, синтезировать опред АК, витамины и другие соединения, устойчивость к лекарствам или дезинфектантам и т. д. 
· ауксотрофы, растут только в среде с готовым продуктом.
Действие мутации на трансляцию:
1. Бессмысленные (missens) мутации
2. Frame-shift мутации – со сдвигом считывания и изменением всех последующих кодонов.
3. Супрессорные – восстан. функции генов, инактив-ых предыдущей мутацией
4. Мутации на клеточном уровне – можно выявить, если вызывает фенотипические изменения
5. Мутации с приобретением (способности синтезировать активный фермент), лаг-фазам между мутацией и синтезом фермента отсутствует.
6. Мутации с утратой – вызывает прекращение синтеза к.-л. фермента, а клетка сохраняет функц. активность. Если рост клетки продолжается, то кол-во фермента умен-ся с каждым делением в 2 раза.
7. Изменения в виде трансдукции, трансформации, коньюгации.

61.Репарации и их значение.
Репарация  особая функция [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], заключающаяся в способности исправлять химические повреждения и разрывы в молекулах [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], повреждённой при нормальном биосинтезе ДНК в клетке или в результате воздействия физических или химических агентов. Осуществляется специальными ферментными системами клетки. Ряд наследственных болезней (напр., [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]) связан с нарушениями систем репарации.

62. Генетический обмен бактерий. Трансформация, трансдукция и коньюгация.
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ РЕКОМБИНАЦИИ уэукариот совершаются в процессе полового размножения путем взаимного обмена фрагментами хромосом, при этом из двух родительских хромосом образуются две рекомбинантные, т.е. возникают две рекомбинантные особи.
У прокариотов нет полового размножения 
· в результате внутригеномных перестроек: изменение локализации генов в пределах хромосомы, или при проникновении в 
· реципиента части ДНК донора > формирование мерозиготы, т.е. образуется только ОДИН РЕКОМБИНАТ.
ГенР происходят при участии ферментов в пределах отдельных генов или групп сцеплений генов. Существуют специальные REC–ГЕНЫ, определяющие способность бактерий к рекомбинациям. Передача генетического материала от Б! к Б! происходит путем трансформации, трансдукции и конъюгации, а плазмидных генов - путем трансдукции и конъюгации.
ТРАНСФОРМАЦИЯ – непосредственная передача генетического материала (фрагмента ДНК) донора Рец
·. (Впервые Гриффитс – опыт с живым авирулентнымбескапсульным штаммом пневмококка, к/й стал вирулентным при обработке экстрактом убитых капсульных пневмококков.)
С донорной ДНК в реципиентную клетку обычно передается только один ген, т.к. фрагмент ДНК, который может проникнуть в Рец
· очень маленький. Трансформации поддаётся только часть клеток Б!! популяции – КОМПЕТЕНТНЫМИ. Состояние компетентности (когда стенка Б! проницаема для высокополимерных (Мг=0,5–1 млн) фрагментов ДНК) возникает обычно в конце LOG–ФАЗЫ.
Фазы процесса трансформации:
адсорбция ДНК-донора на Рец
·;
проникновение ДНК внутрь Рец
· и деспирализация ДНК.
соединение любой из двух нитей ДНК донора с гомологичным участком хромосомы реципиента и последующая рекомбинацией.
Эффективность зависит от СТЕПЕНИ ГОМОЛОГИЧНОСТИ ДНК донора и реципиента, что определяет конечный результат, т. е. количество формирующихся рекомбинантов (трансформантов) 
· межвидовая трансформация происходит гораздо реже, чем внутривидовая.
ТРАНСДУКЦИЯ – передача генетического материала с помощью фагов. Различают три типа трансдукции:
Неспецифическая (общая). В момент сборки фаговых частиц в их головку может проникнуть ЛЮБОЙ фрагмент ДНК Б!–донора. Вместе с фаговой ДНК переносятся любые гены донора и включаются в гомологичную область ДНК Рец
· путем рекомбинации. Фаги только переносят генетического материала
Специфическая – фаг переносит ОПРЕДЕЛЕННЫЕ гены при выщеплениипрофага из Б! хромосомы вместе с рядом расположенными генами, при этом фаг становится дефектным. При взаимодействии фага с Рец
· происходит включение гена донора и дефектного фага в хромосому РецБ!, а Б!! становятся невосприимчивыми к последующему заражению вирулентным фагом.
Абортивная – фрагмент ДНК бактерии-донора не включается в хромосому РецБ!, а располагается в цитоплазме и в таком виде функционирует. Во время деления этот фрагмент ДНК передаётся только одной дочерней 
·, и в конечном итоге утрачиваться в потомстве.
КОНЪЮГАЦИЯ – перенос генетического материала из клетки-донора в клетку реципиента при их СКРЕЩИВАНИИ. Доноры – 
·
· с F-плазмидой (половой фактор). При скрещивании F+ с F– 
· половой фактор передается независимо от хромосомы донора, при этом почти все Рец
· становятся F+.
F-плазмида может интегрировать в Б! хромосому. В некоторых случаях она освобождается, захватывая при этом сцепленные с ней Б! гены (обозначаются с указанием включенного гена: F-lac).
ЭТАПЫ:
прикрепление клетки-донора к Рец
· с помощью SEX-ПИЛЕЙ
образование конъюгационного МОСТИКА, через который передаётся F-фактор и другие плазмиды, находящиеся в цитоплазме донора.
разрыв одной из цепей ДНК (в месте включения F-плазмиды) при участии эндонуклеазы. Один конец ДНК проникает в Рец
· и сразу же достраивается до 2-нитевой  структуры. При переносе захватывается часть ДНК Б!-донора – Hfr-штаммы (HIGH FREQUENCY OF RECOMBINATION). При скрещивании Hfr-штамма с F–
·F-фактор, не передается (т.к. конъюгационный мостик разрывается, а F-фактор расположен в дистальной части хромосомы). Передаются только гены Б! хромосомы, расположенные вблизи начала переноса (О–точка (origin)).
На ОСТАВШЕЙСЯ в 
· нити ДНК синтезируется 2 цепочка.


63.Теоретическое и практическое значение учения о генетике бактерий и вирусов для микробиологии и медицины.


64.Цели и задачи генной инженерии. Практическое использование генной инженерии в микробиологии и биотехнологии. Ценность молекулярно-генетических исследований для прогресса микробиологии и медицины.
Генная инженерия - отрасль молекулярной биологии и генетики, целью которой является получение с помощью лабораторных приемов организмов с новыми, не встречающимися в природе, комбинациями генов.
В основе генной инженерии лежит возможность целенаправленного манипулирования с фрагментами нуклеиновых кислот.
Эти эксперименты стали возможными благодаря:
установлению универсальности генетического кода;
успехам генетической энзимологии, которая предоставила набор ферментов, позволяющих получать в изолированном виде отдельные гены или фрагменты нуклеиновой кислоты, осуществлять invitro синтез фрагментов нуклеиновых кислот и объединять их в единое целое.
Цель генной инженерии - конструирование генетических структур по намеченному плану (создание организмов с новой генетической программой, путем переноса генетической информации из одного организма в другой).


65.Распространение микроорганизмов в окружающей среде. Понятие о микробных биоценозах. (Типы взаимодействия между микробами в биоценозах.).
Благодаря разнообразию механизмов утилизации источников питания и энергии, а также выраженной адаптации к внешним воздействиям, микроорганизмы обитают там, где другие формы жизни не выживают. В зонах обитания микроорганизмы образуют биоценозы (от греч. bios – жизнь +koinos – сообщество) – сложные ассоциации со специфическими и часто необычными взаимоотношениями. Каждое микробное сообщество в конкретном биоценозе образует специфические аутохтонные микроорганизмы (от греч. autos – свой + chthon – страна, местность), т.е. микробы, присущие конкретной области. В состав этих сообществ могут внедряться аллохтонные микробы (от греч. allos – свой + chthon – страна, местность; буквально – чужестранец), обычно в них не встречающиеся. В природных биоценозах складываются определенные типы взаимоотношений микробов: симбиоз, паразитизм, антогинизм.
Симбиоз  это сожительство микроорганизмов разных видов; вместе они развиваются лучше, чем каждый из них в частности. Иногда приспособленность организмов друг к другу так углубляется, что они теряют способность существовать врознь (сожительство грибов и сине-зеленых водорослей, азотфиксуючих и целюлозоруйнивних бактерий, бульбочкових бактерий и бобовых растений, разных грибов и корней растений, дрожжеподобных грибов и лямблий). Самый типичный симбиоз (симбиогенез) обнаружен у лишайников.
Одной из форм симбиоза есть вирогения  сосуществование некоторых бактерий, дрожжей и самых простых с вирусами.
При антагонизме происходит борьба микроорганизмов разных видов за кислород, Питательные вещества и место существования. Бактерии, грибы, высшие растения производят вещества, которые достали названия антибиотик и в, которые пагубно действуют на другие микроорганизмы.их широко применяют в лечении многих инфекционных заболеваний.
66.Санитарно-показательные бактерии, их характеристика.
САНИТАРНАЯ МБ изучает санитарное состояние среды и мкФ, а т/же её опасность. Люди и теплокровные Ж!! – основные источники распространения большинства инфекционных болезней. Наиболее массивное выделение патогенныхмк
· происходит воздушно-капельным или фекально-оральным ПУТЁМ. Сан/МБ исследование необходимо для РЕШЕНИЯ вопроса о наличии или отсутствии мк
·, патогенных для чка, на объектах окр среды. Обнаружить их в окр среде сложно 
· определяют загрязнение ВЫДЕЛЕНИЯМИ чка или Ж!!. Если загрязнение есть, то вполне вероятно, что вместе с выделениями в среду попали и патогенные мк
·. Т.о, определение фекального или воздушно-капельного загрязнения достаточно надёжно при оценки потенциальной опасности для здоровья чка.
Полости тела чка, сообщающиеся с внеш средой, заселены N мкФ. Обнаружение представителей этой мкФ свидетельствует о загрязнении соответствующими выделениями, т/е мк
· называются САНИТАРНО-ПОКАЗАТЕЛЬНЫМИ. Они должны отвечать следующим требованиям, должны:
постоянно и в больших кол-вах содержаться в выделениях чка и большого круга теплокровных Ж!!
не должны иметь прир резервуара или естественных мест обитания
сохранять жизнеспособность в столько же, сколько и патогенные мк
·, выводимые из 
· теми же путями
интенсивно размножаться в окружающей среде
легко обнаруживаться МБ методами и подвергаться кол-венному определению
достаточно типичными, чтобы их дифференциальная диагностика осуществлялась без особого труда.
САН-ПОКАЗАТЕЛЬНЫЕ мк
· В РАЗЛ ОБЛАСТЯХ СРЕДЫ
ВОДА – кишечные палочки и энтерококки.
ПОЧВА – кишечные палочки, энтерококки, Clostridium perfringens, термофилы.
ВОЗДУХ–стрепто- (зеленящие и гемолитические), патогенные стафилококки.
ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ – кишечные палочки, энтерококки, патогенные стафилококки, протей.
ПРЕДМЕТЫ обихода – киш палочки, энтерококки, патогенные стафилококки.

67.Микрофлора организма человека и ее роль в нормальных физиологических процессах и патологии. (Облигатные (резидентные) и факультативные (транзиторные) микроорганизмы. Формирование микробных биоценозов в различных возрастных периодах. Микрофлора кожи, ротовой полости, желудочно-кишечного тракта, дыхательных путей, конъюнктивы глаза, мочеполовых путей.)
Нормальная микрофлора человека – это совокупность множества микробиоценозов, характеризующихся определенными взаимосвязями и местом обитания.
Виды нормальной микрофлоры:
1) резидентная – постоянная, характерная для данного вида;
2) транзиторная – временно попавшая, нехарактерная для данного биотопа; она активно не размножается.
Факторы, влияющие на состояние нормальной микрофлоры.
1. Эндогенные:
1) секреторная функция организма;
2) гормональный фон;
3) кислотно-основное состояние.
2. Экзогенные условия жизни (климатические, бытовые, экологические).
В организме человека стерильными являются кровь, ликвор, суставная жидкость, плевральная жидкость, лимфа грудного протока, внутренние органы: сердце, мозг, паренхима печени, почек, селезенки, матка, мочевой пузырь, альвеолы легких.
Нормальная микрофлора выстилает слизистые оболочки в виде биопленки. Этот каркас состоит из полисахаридов микробных клеток и муцина. Толщина биопленки – 0,1–0,5 мм. В ней содержится от нескольких сотен до нескольких тысяч микроколоний.
Этапы формирования нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта (ЖКТ):
1) случайное обсеменение слизистой. В ЖКТ попадают лактобациллы, клостридии, бифидобактерии, микрококки, стафилококки, энтерококки, кишечная палочка и др.;
2) формирование сети из ленточных бактерий на поверхности ворсинок. На ней фиксируются в основном палочковидные бактерии, постоянно идет процесс формирования биопленки.
Нормальная микрофлора рассматривается как самостоятельный экстракорпоральный орган с определенной анатомической структурой и функциями.
Функции нормальной микрофлоры:
1) участвие во всех видах обмена;
2) детоксикация в отношении экзо– и эндопродуктов, трансформация и выделение лекарственных веществ;
3) участие в синтезе витаминов (группы В, Е, Н, К);
4) защита:
а) антагонистическая (связана с продукцией бактериоцинов);
б) колонизационная резистентность слизистых оболочек;
5) иммуногенная функция.
Наибольшей обсемененностью характеризуются:
1) толстый кишечник;
2) ротовая полость;
3) мочевыделительная система;
4) верхние дыхательные пути;
5) кожа.

68.Дисбактериоз. Факторы, влияющие на его формирование.
Дисбактериоз (дисбиоз) – это любые количественные или качественные изменения типичной для данного биотопа нормальной микрофлоры человека, возникающие в результате воздействия на макро– или микроорганизм различных неблагоприятных факторов.
Микробиологическими показателями дисбиоза служат:
1) снижение численности одного или нескольких постоянных видов;
2) потеря бактериями тех или иных признаков или приобретение новых;
3) повышение численности транзиторных видов;
4) появление новых, несвойственных данному биотопу видов;
5) ослабление антагонистической активности нормальной микрофлоры.
Причинами развития дисбактериоза могут быть:
1) антибиотико– и химиотерапия;
2) тяжелые инфекции;
3) тяжелые соматические заболевания;
4) гормонотерапия;
5) лучевые воздействия;
6) токсические факторы;
7) дефицит витаминов.
Фазы дисбактериоза:
1) компенсированная, когда дисбактериоз не сопровождается какими-либо клиническими проявлениями;
2) субкомпенсированная, когда в результате дисбаланса нормальной микрофлоры возникают локальные воспалительные изменения;
3) декомпенсированная, при которой происходит генерализация процесса с возникновением метастатических воспалительных очагов.
Лабораторная диагностика дисбактериоза
Основной метод – бактериологическое исследование. При этом в оценке его результатов превалируют количественные показатели.
Дополнительный метод – хроматография спектра жирных кислот в исследуемом материале. Каждому роду соответствует свой спектр жирных кислот.
Коррекция дисбактериоза:
1) устранение причины;
2) использование эубиотиков и пробиотиков.
Эубиотики – это препараты, содержащие живые бактерициногенные штаммы нормальной микрофлоры (колибактерин, бифидумбактерин, бификол и др.).
Пробиотики – это вещества немикробного происхождения и продукты питания, содержащие добавки, стимулирующие собственную нормальную микрофлору. Стимулирующие вещества – олигосахариды, гидролизат казеина, муцин, молочная сыворотка, лактоферин, пищевые волокна.

69.Гнотобиология и ее значение в медицинской микробиологии и иммунологии.
Бактериальная мкФ способствует организации и созреванию иммунной системы. В опытах на стерильных животных (ГНОТОБИОНТАХ) показано, что масса и количество центров размножения в лимфоузлах безмикробных Ж!! v в несколько раз. Гнотобионты не способны сохранить свое здоровье при контакте с мк
·, и погибают от инфекционных процессов, вызываемых у них такими видами, к которым Ж!!, выросшие в обычных условиях, не восприимчивы вовсе.
При переохлаждении, перегревании, нарушении сна, психических стрессовых воздействиях, ИО и др. нарушаются взаимоотношения МК
· и населяющей его тело микрофлоры > микробы-симбионты распространяются, проникают во внутр среду и вызывают патологические процессы.
Нарушение кач и кол-венного состава мкФ тела чка, перемещение ее в другие биотопы –дисбактериоз (дисбиоз, дисмикробиоз).

70.Влияние на микроорганизмы физических, химических, биологических факторов.(Влияние температуры, реакции среды (рН), окислительно-восстано-вительного потенциала (Еh) и высушивания на микроорганизмы. Использование лиофильного высушивания в микробиологической практике. Действие на микробов радиации, атмосферного и осмотического давления, ультразвука.)
ВЛИЯНИЕ ФИЗИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА МИКРООРГАНИЗМЫ
Температура. В зависимости от температурных параметров выделяют три группы микроорганизмов термофилы, психрофилы и мезофилы.
Для термофилов (теплолюбивых) зона оптимального роста равна 5060 °С, верхняя зона задержки pocfa  75 °С, нижняя 45 °С. Термофилы не способны размножаться в организме теплокровных животных, поэтому медицинского значения не имеют.
Психрофилы (холодолюбивые) имеют зону оптимального роста в пределах 1015 °С, максимальную зону задержки роста 2530 °С, минимальную 05 °С. Психрофилы являются свободно живущими организмами или паразитами холоднокровных животных, но некоторые виды, например иерсинии, психрофильные варианты клебсиелл, псевдомонад, вызывают заболевания у человека. Размножаясь в пищевых продуктах при температуре бытового холодильника, эти бактерии более вирулентны при низких температурах.
Мезофилы обитают главным образом в организме теплокровных животных. Оптимальная температура их роста колеблется в пределах 3037 °С, максимальная 4345 °С, минимальная 1520 °С. В окружающей среде могут переживать, но обычно не размножаются.
Температурные зоны гибели микроорганизмов широко вариируют. Вегетативные формы погибают при температуре 60 80 °С в течение часа, при 100 °С мгновенно. Споры и цисты устойчивы к температуре 100 °С, гибнут при 130 °С и более длительной экспозиции (до 2 ч). Нижняя температурная граница гибели микроорганизмов варьирует от 20 °С (возбудители кори, коклюша, сифилиса, менингококковой и гонококковой инфекции) до абсолютного нуля. Повреждающее действие высокой температуры связано с необратимой денатурацией ферментов микроорганизмов, низкой с разрывом клеточной мембраны кристаллами льда и приостановкой метаболических процессов.
Реакция среды. Большинство симбионтов и возбудителей заболеваний человека хорошо растут при слабощелочной, нейтральной или слабокислой реакции. Для вибрионов, в том числе возбудителя холеры, оптимальная величина рН 910, для большинства грибов 56. При культивировании микроорганизмов на питательных средах устанавливается оптимальная величина рН. В процессе размножения происходит сдвиг рН, обычно в сторону кислой среды, реже щелочной, рост приостанавливается, затем наступает гибель микроорганизмов. Механизм повреждающего действия рН состоит в денатурации ферментов гидроксильными ионами, нарушении осмотического барьера клеточной мембраны.
Влажность (высушивание). Рост и размножение микроорганизмов происходят в средах с большим количеством воды, которая необходима для пассивного и активного транспорта питательных веществ в цитоплазму клетки. Снижение влажности среды приводит к переходу клетки в стадию покоя, а затем к гибели. Чувствительность микроорганизмов к высушиванию и сроки переживания на объектах внешней среды в этих условиях зависят от вида и формы возбудителя с одной стороны, и свойств объекта с другой. Покоящиеся формы микроорганизмов, особенно споры и цисты, сохраняются длительное время, иногда многие годы. Микобактерии туберкулеза, вирус натуральной оспы, сальмонеллы, актиномицеты, грибы устойчивы к высушиванию; менингококки, гонококки, трепонемы, бактерии коклюша, ортомиксовирусы, парамиксовирусы, герпесвирусы чувствительны к нему.
Ионизирующая радиация. Повреждающая сила радиации зависит прежде всего от ее вида, в меньшей степени от вида микроорганизма. Ионизирующая радиация обладает мощным проникающим и повреждающим клеточный геном действием. Однако летальные для микробных клеток дозы на несколько порядков выше, чем для животных и растений.
Повреждающее действие УФ-излучения, наоборот, в большей мере выражено в отношении микроорганизмов, чем животных и растений. УФ-лучи в относительно небольших дозах вызывают повреждения ДНК микробных клеток, которые приводят к мутациям или их гибели. Световое и инфракрасное излучение при интенсивном и длительном воздействии способно оказать повреждающее   влияние  лишь   на   некоторые   микроорганизмы.
Ультразвук. Определенные частоты ультразвука при искусственном воздействии способны вызывать деполимеризацию орга-нелл микробных клеток, а также денатурацию входящих в их состав молекул в результате локального нагревания или повышения давления.
Давление. Атмосферное давление даже в сотни атмосфер не оказывает существенного влияния на бактерии. Однако к осмотическому давлению, как повышенному, так и сниженному они высокочувствительны. В том и другом случае происходит разрыв клеточной мембраны и гибель микробных клеток (осмотический шок).
Хим.: В зависимости от физико-химического состава среды, концентрации, длительности контакта, температуры химические вещества по-разному влияют на микроорганизмы. В малых дозах они действуют как раздражители, а в бактерицидных концентрациях парализуют жизнедеятельность бактерий.
 
Поверхностно активные вещества, или детергенты, могут накапливаться на поверхности раздела фаз и влечь резкое снижение поверхностного натяжения, который приводит к нарушению нормального функционирования клеточной стенки и цитоплазматическоймембраны. К бактерицидным веществам с поверхностно активным действием принадлежат жирные кислоты, в том числе и мыла, которые вызывают повреждение только клеточной стенки и не проникают в клетку. Широко используются синтетические детергенты, которые лучше растворяются в воде.
Фенол, крезол и их производные сначала повреждают клеточную стенку, а затем и белки клетки. Некоторые вещества этой группы подавляют функцию коферменту(дифосфопиридиннуклеотиду), который принимает участие у дегидрировании глюкозы и молочной кислоты.
Красители должны свойство задерживать рост бактерий. В основе их действия лежит выраженное родство с фосфорнокислыми группами нуклеопротеидов. К красителям с бактерицидными свойствами принадлежат брильянтовий зеленый, риванол, трипафлавин,акрифлавин и др.
Соли тяжелых металлов (свинец, медь, цинк, серебро, ртуть) вызывают коагуляцию белков клетки. При взаимодействии соли тяжелого металла с белком образуются альбуминат металла и свободная кислота (RСООН + AgNO3-> COOAg + HNO3).
Некоторые металлы (серебро, золото, медь, цинк, олово, свинец и др.) имеютолигодинамичну действую (бактерицидное свойство). Да, например, посуда из серебра, посеребрены предметы, посеребрен песок при контакте с водой предоставляют ей бактерицидных свойств относительно многих видов бактерий. Механизм олигодинамическогодействия заключается в том, что позитивные заряженные ионы металлов адсорбируются негативно заряженной поверхностью бактерий и изменяют проницаемость ихцитоплазматической мембраны. Возможно, что при этом нарушается питание и размножение бактерий. Вирусы также очень чувствительны к солям тяжелых металлов, под воздействием которых они необратимо инактивуются.
Окислители действуют на сульфгидрильные группы активных белков; более сильныеокислители вредно влияют и на другие группы (феноловые, тио-этиловые, индольные иаминные). К окислителям принадлежат хлор, который действует на дегидразу, гидролазу, амилазу, протеазу бактерий, в результате чего его широко используют для обеззараживания воды, а также, хлорная известь и хлорамин, что применяются для дезинфекции. Как антибактериальное средство в медицине с успехом применяют йод в виде спиртного раствора, который не только окисляет активные группы белков цитоплазмы бактерий, но и вызывает их денатурацию.
В связи с возможным косвенным действием йода рекомендуется применять в хирургической практике хлоргексидин, который имеет высокую антибактериальную активность относительно как граммположительных, так и грамнегативних микроорганизмов. Его используют для обработки рук персонала, кожи, операционного поля больных, которых оперируют, для дезинфекции инструментов, катетеров, аппаратов ингаляционного наркоза. Хлоргексидин применяют для лечения гнойных ран, промывания операционных ран и полостей.
Окислительные свойства, кроме названных веществ, имеют калию перманганат, перекис водороду и др.
Много видов вирусов стойкие против действия эфира, хлороформа, этилового и метилового спирта, эфирных масел. Почти все вирусы долго сохраняются в растворах глицерина Рингера, Тироде. Вирусы разрушаются под воздействием NAOH, KOH, а также хлорамина, хлорнойизвестки, хлору, других окислителей.
Формальдегид применяют в виде 3740 % раствору, который достал название формалина. Его бактерицидное действие, как считают, объясняется тем, что он присоединяется к аминогруппам белков и вызывает их денатурацию. Формальдегид убивает как вегетативные формы, так и споры микроорганизмов. Его применяют для обезвреживания дифтерийного, столбнякового и других экзотоксинов, в результате чего они превращаются в анатоксины. Кроме формальдегида, алкилюючу действие имеет етиленоксид (газ), который применяют для дезинфекции разных  поверхностей.

71.Стерилизация. Микробиологический контроль стерилизации.
Стерилизация (от лат. sterilis – бесплодный, свободный от бактерий) – полное уничтожение вегетативных и споровых форм всех микроорганизмов на предметах, материалах, в питательных средах.
В медицинской практике стерилизуют инструменты, перевязочный и шовный материал, операционное белье, лекарственные препараты. В микробиологических лабораториях – питательные среды, пробирки, пипетки, колбы, чашки Петри и тому подобное. Потому перед стерилизацией необходимо уметь подготовить инструменты, посуду, пробирки, пипетки, перевязочный материал и другое.
Инструменты обрабатывают в такой последовательности. Сначала их прополаскивают в проточной воде, потом замачивают в моющем растворе 15 мин, моют в том же растворе 0,5-1мин, прополаскивают проточной и дистиллированной водой, высушивают в сухожаровий шкафу при 80-85 °С до полного исчезновения влаги.
Пробирки, флаконы, колбы закрывают ватными пробками. Пробирки заворачивают в бумагу по 25-30 штук, а чашки Петри – по 4-5 штук или вмещают в стерилизацийни коробки (биксы). Пастеровские и градуированные пипетки из широкого конца затыкают ватой, обвертывают бумагой или вмещают в картонные или металлические пеналы по 10-15 штук. Питательные среды в колбах, флаконах, пробирках также закрывают пробками.
В лабораторной практике используют такие виды стерилизации: а) высокой температурой; бы) механическая (холодная); в) химическими веществами и газами.
Существуют много способов стерилизации с помощью высокой температуры. Эффективность такой стерилизации при нагревании характеризуется показателем D – временами, который необходим при данной температуре, чтобы получить десятикратнеуменьшение популяции бактерий (на 90 %). Его величина измеряется, как правило, в минутах.
Прожаривание в пламени горелки – быстрый и абсолютно надежный способ. Им стерилизуют бактериальные петли, пинцеты, предметные и покровные скельця.
Кипячения в течение 40 мин в специальных стерилизаторах используют для обработки хирургических инструментов, шприцев, игл, резиновых трубок. Для повышения температуры кипения и устранения жесткости воды добавляют 1 % бикарбонатунатрию. Этот метод не обеспечивает полной стерилизации, поскольку споры некоторых видов бацилл и клостридий выдерживают кипячение в течение нескольких часов.
Стерилизацию сухим жаром в сухожаровий шкафу проводят при 160 °С в течение 120-150мин, или при 180 °С – 45-60 мин после достижения заданной температуры.
терилизуют преимущественно стеклянную посуду. Преимущество этого метода над другими заключается в том, что не повреждается стекло, не происходит коррозии металлических инструментов. Его можно использовать для стерилизации термостойких порошков и других веществ. Одним из недостатков данного метода есть достаточно длительный срок стерилизации. Кроме того, при высоких температурах может состояться обугливание и загорание ватных пробок, бумаги, в какую завернутую посуду.
Стерилизация паром под давлением – самый надежный метод полного уничтожения бактерий и их спор. Он достигается действием пара, температура которой под давлением более высока, чем при кипячении. Такую стерилизацию проводят в автоклаве. Стерилизация парой под давлением более эффективна, чем действие сухого жара.
Существуют разнообразные электрические автоклавы, которые отличаются между собой за размерами, формой, расположением (вертикальные и горизонтальные), они могут быть с ручным управлением, полуавтоматические и автоматические.
Конструктивно все типы автоклавов представляют собой двустенный крепкий металлический котел цилиндрической формы с крышкой, которая герметически закрывается, что позволяет выдержать высокое давление.
Внутренняя часть автоклава являются стерилизацийной камерой, в которую помещают материал, который стерилизуется. Она имеет специальный кран для выхода воздуха и манометр с предохранительным клапаном. Манометр определяет рабочее давление пара в камере, а предохранительный клапан способствует выходу избытка пара с целью предотвращения разрыва автоклава. Дистиллированную воду в водопаровую камеру заливают через специальную лейку, следя за ее уровнем в специальной водомерной трубке. Пар из водопаровой камеры поступает встерилизационную камеру через специальные отверстия в ее верхней части. Современные автоклавы имеют манометры и автоматические регуляторы включения и отключения тока, держа заданное давление, а следовательно и заданную температуру внутри автоклава. Работа с ним требует сурового соблюдения правил безопасности, какие изложены в инструкции к каждому автоклаву.
Стерилизация текучим паром (100 °С) проводится в автоклаве с некрученной крышкой. При нагревании пар проникает между вложенными объектами и стерилизует их. Таким способом обрабатывают среды с углеводами. Поскольку одноразовое действие пары не убивает споры, применяют дробну стерилизацию – 3 дня кряду по 30 мин. Те споры, которые не погибли при первом нагревании, прорастают до следующего дня в вегетативные клетки и погибают при второй и третьей обработке.
Для тех веществ, которые не выдерживают 100 °С (белковые жидкости, витамины, некоторые лекарства), применяют тиндализацию – стерилизацию на водяной бане при температуре 58-60 °С в течение часа 5-6 дней подряд. Однако этот метод в настоящий момент широко не применяется, поскольку требует значительных затрат времени на его проведение.
Пастеризацией считают одноразовое прогревание материала к температуре ниже 100 °С, при которой уничтожаются, в первую очередь, вегетативные формы микроорганизмов. Этот способ впервые предложил Л.  Пастер для уничтожения безспорових форм микробов, преимущественно патогенных и условно патогенных видов. Споры при этом остаются живыми, а микроорганизмы, что остались, становятся заметно ослабленными. Метод широко используют в пищевой промышленности, когда при кипячении могут потеряться органолептические свойства продуктов. Так проводят термическую обработку молока, пива, вина, разных соков при 70  °С в течение 30 мин или при 80 °С – 5-10 мин. Пастеризованные продукты сохраняются на холоде.
Свертывания (уплотнение) сыворотки и яичных сред с одновременной их стерилизацией проводят в специальных згортувачах Коха с электрическим подогревом.

72.Микробиологические основы асептики, антисептики и дезинфекции. Микробиологический контроль.
Асептика – комплекс мер, направленных на предупреждение попадания возбудителя инфекции в рану, органы больного при операциях, лечебных и диагностических процедурах. Методы асептики применяют для борьбы с экзогенной инфекцией, источниками которой являются больные и бактерионосители.
Антисептика – совокупность мер, направленных на уничтожение микробов в ране, патологическом очаге или организме в целом, на предупреждение или ликвидацию воспалительного процесса.
Дезинфекция  процедура, предусматривающая обработку загрязненного микробами предмета с целью их уничтожения до такой степени, чтобы они не смогли вызвать инфекцию при использовании данного предмета. Как правило, при дезинфекции погибает большая часть микробов (в том числе все патогенные), однако споры и некоторые резистентные вирусы могут остаться в жизнеспособном состоянии.
Методы дезинфекции. Различают три основных методы: тепловой, химический и УФ-облучение. Выбора того или иного метода также зависит от дезинфецирующего материала.
Тепловая дезинфекция. Очень эффективным является действие горячей воды и насыщенного пара. Температура в 100
·С в течение 5 минут убивает все вегетативные формы бактерий и все вирусы.
погибают все вегетативные формы бактерий и большинство вирусов. Температура 100 °С в течение 5 мин убивает все вегетативные формы бактерий и все вирусы.
Добавление соды в воду имеет дополнительные преимущества: сода растворяет белки и жиры, которые могут находиться на поверхности предмета, предупреждает коррозию инструментов и оседание на них кальция. Подобным образом можно обрабатывать инструменты, иглы, шприцы и т. д.
Для дезинфекции применяют также сухое тепло, например, прокаливание.
Тепловая дезинфекция это единственный метод, который не вызывает загрязнения окружающей среды; кроме того, он является наиболее эффективным и дешевым.
Разновидностью тепловой дезинфекции является пастеризация  метод, созданный Л. Пастером и применяемый для обработки в основном молока, а также соков, вина и пива. При используемом обычно режиме 60-;70 °С в течение 2030 мин погибает большинство вегетативных форм бактерий (особенно важно уничтожение бруцелл и Mycobacterium bovis, которые могут находиться в молоке), но сохраняется часть энтерококков, молочнокислых бактерий и споры. Поэтому пастеризованное молоко помещают на холод для предотвращения и прорастания спор и размножения бактерий.
Химическая дезинфекция проводится с помощью различных дезинфицирующих веществ. Дезинфектанты действуют, например, растворяя липиды клеточных оболочек (детергенты) или разрушая белки и нуклеиновые кислоты (денатураты, оксиданты). Активность каждого из дезинфектантов неодинакова для различных микроорганизмов и зависит от температуры, рН и прочих условий.
В качестве контрольных микроорганизмов для изучения действия дезинфектантов используют S. typhi и S. aureus.
Обеззараживанию с помощью данного метода подлежат, например, поверхность операционного стола, стены процедурного кабинета, кожа, некоторые инструменты все то, что невозможно обработать теплом. Еще одним примером химической дезинфекции является хлорирование воды.
Использование большинства дезинфицирующих веществ опасно для медперсонала, они загрязняют окружающую среду, многие из них дорогостоящи.
Ультрафиолетовое облучение производится с помощью специальных бактерицидных ламп (настенных, потолочных, передвижных и др.) для обеззараживания воздуха, различных поверхностей в операционных, перевязочных, микробиологических лабораториях, предприятиях пищевой промышленности и т. д. Действие ультрафиолетовых лучей приводит к разрушению ДНК микробов в результате образования тиминовых димеров.

73.Определение, характеристика основных групп химиотерапевтических препаратов. Требования, предъявляемые к химиопрепаратам, химиотерапевтический индекс.

Химиотерапия является одним из основных методов печения злокачественных новообразований. Наибольшее распространение получила полихимиотерапия, состоящая из рациональной комбинации нескольких химиотерапевтических препаратов. В медицине применяются 7 групп химиотерапевтических препаратов.
Механизм действия химиотерапевтических препаратов
Механизм действия у разных химиотерапевтических препаратов направлен нз разные этапы (фазы) жизненного цикла и разные процессы в клетке. Практически все химиотерапевтические препараты действуют нз «работающую» клетку и не действуют на неактивную фазу или фазу покоя клетки, именуемую GO. Следоватепьно. устойчивость опухоли к химиотерапии в первую очередь определяется числом клеток, находящихся в фазе GO. Чем интенсивнее клетки рзстут и делятся, тем чувствительнее они к химиотерапии. Следует подчеркнуть, что при этом не важно.раковая это клетка или абсолютно нормальная - эффект воздействия будет примерно одинаковым.
Нзиболее интенсивно химиотерапия применяется в случае гемобластозов (лейкозов). Клетки красного костного мозга постоянно делятся и созревают.следовательно. лечение лейкозов будет подавлять также и нормальную работу (пролиферацию) стволовых клеток красного
костного мозга. Аналогичный отрицательный эффект наблюдается по отношению к гонадам и эпителию кишечника. Именно по этой причине токсический эффект химиотерапии существенно ограничивает ее переносимость.
Группы химиотерапевтических препаратов
Среди химиотерапевтических препаратов выделяют следующие группы:
действующие на все фазы клеточного цикла
действующие на определенные фазы клеточного цикла
цитостатики с иным механизмом действия
По механизмам действия также выделяют несколько групп препаратов. Их классификация не имеет жесткой структуры и связзнз с особенностями воздействия препарата нз клетку:
алкилирующие агенты
антибиотики
антибиотики
антиметаболиты
антрацикпины
винкалкалоиды
препараты платины
апиподофиллотоксины
Алкилирующие агенты
Механизм действия алкилирующих агентов объясняется образованием прочных ковалентных связей с цепочкой ДНК. Точные молекулярные механизмы гибели клетки после воздействия алкилирующих агентов еще не установлены.однако известно, что они способствуют ошибкам считывания информации и. как следствие, подавлению синтеза соответствующих данному коду белков. Существует естественная защита от алкилирующих агентов в виде глутатионовой системы.поэтому высокое содержание глутатионз в опухоли будет указывать на слабую эффективность лечения данной группой химиотерапевтических препаратов. примерами лекарственных веществ из данной группы являются циклофосфан. эмбихин. препараты нитрозомочевины.
Антибиотики
часть антибиотиков обладает противоопухолевой активностью.воздействуя на разные фазы клеточного цикла (G1, S. G2), з потому все они имеют разные механизмы воздействия нз работу клетки.
Антиметаболиты
механизм действия антиметзболитов связан с блокированием (конкурентным или неконкурентным) естественных метаболических (обменных) процессов в клетке.например. метотрексат по структуре похож нз фолиевую кислоту, необходимую для нормальной жизнедеятельности клетки. Поэтому метотрексат будет блокировать ее использование, конкурентно угнетая работу обслуживающего ее фермента дигидрофолатредуктазы. клетка при этом погибает за счет избыточного накопления окисленной формы фолата. Примеры других препаратов: цитарабин. 5-флюороурзцил.
Антрациклины
Антрзциклины имеют в своем состзве знтрзциклиновое кольцо, которое способно вззимодействовзть с ДНК. Считзется тзкже, что они способны ингибировать топоизомерззу-И и обрззовывзть большое количество свободных рздикзлов. которые, в свою очередь, тзкже могут повреждзть структуру ДНК. Примерзми препзрзтов являются рубомицин, здриблзстин.
Винкалкалоиды
Винкалкалоиды названы так в честь растения Vinesroses, из которого они получены.механизм их действия объясняется возможностью связывания белка тубулина, формирующего цитоскелет. Цитоскелет необходим клетке и в фэзе покоя и при митозе. Отсутствие цитоскелета нарушает правильную миграцию хромосом в процессе деления, что в итоге приводит клетку к гибели. Более того, злокачественные клетки более чувствительны к винзклклоидзм. чем здоровые клетки, т.к. комплекс «винка- тубулин» в опухолевой ткани более стабилен. Примеры препаратов: винблзстин. винкристин. виндезин.
Химиотерапевтический индекс
показатель широты терапевтического действия химиотерапевтического средства, представляющий собой отношение его минимальной эффективной дозы к максимальной переносимой.

74.Антибиотики. (Определение и история открытия. Классификация антибиотиков по источникам получения, химической структуре, спектру и механизму действия. )

Антибиотик  вещество микробного, животного или растительного происхождения, способное подавлять рост микроорганизмов или вызывать их гибель.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] год  Б. Гозио из жидкости, содержащей культуру грибка из рода [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]), выделил кристаллическое соединение  микофеноловую кислоту, подавляющую рост бактерий [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] год  Р. Эммерих и О. Лоу сообщили об антибиотическом соединении, образуемом бактериями [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], и назвали его пиоцианазой; препарат использовался как местный антисептик.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] год  [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] открыл [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], однако ему не удалось выделить достаточно стабильный экстракт.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] год  [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] опубликовал статью о терапевтическом действии пронтозила в Deutsche Medizinische Wochenschrift.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] год  М. Вельш описал первый антибиотик [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] происхождения  [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
Антибиотики природного происхождения чаще всего продуцируются [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], реже  немицелиальными [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
Некоторые антибиотики оказывают сильное подавляющее действие на рост и размножение бактерий и при этом относительно мало повреждают или вовсе не повреждают [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], и поэтому применяются в качестве [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
Антибиотики не воздействуют на [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], и поэтому бесполезны при лечении заболеваний, вызываемых вирусами (например, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] А, В, С, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]).
Огромное разнообразие антибиотиков и видов их воздействия на организм человека явилось причиной классифицирования и разделения антибиотиков на группы. По характеру воздействия на бактериальную клетку антибиотики можно разделить на две группы:
бактериостатические (бактерии живы, но не в состоянии размножаться),
бактерицидные (бактерии погибают, а затем выводятся из организма).
Классификация по химической структуре, которую широко используют в медицинской среде, состоит из следующих групп:
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] антибиотики, делящиеся на две подгруппы:
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]  вырабатываются колониями плесневого грибка Penicillinum;
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]  обладают схожей структурой с пенициллинами. Используются по отношению к пенициллинустойчивым бактериям.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] антибиотики со сложной циклической структурой. Действие  бактериостатическое.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]  используются для лечения инфекций дыхательных и мочевыводящих путей, лечения тяжелых инфекций типа [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. Действие  бактериостатическое.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]  обладают высокой токсичностью. Используются для лечения тяжелых инфекций типа [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] или [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. Действие бактерицидное.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]  Использование ограничено по причине повышенной опасности серьезных осложнений  поражении костного мозга, вырабатывающего клетки крови. Действие  бактериостатическое.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] нарушают синтез клеточной стенки бактерий. Оказывают бактерицидное действие, однако в отношении [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], некоторых стрептококков и стафилококков действуют бактериостатически.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] оказывают бактериостатическое действие, которое обусловлено ингибированием синтеза белка рибосомами. В высоких концентрациях в отношении высокочувствительных микроорганизмов могут проявлять бактерицидный эффект.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]  [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
Антибиотики разных групп  [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
Противогрибковые препараты  разрушают мембрану клеток грибков и вызывают их гибель. Действие литическое. Постепенно вытесняются высокоэффективными синтетическими противогрибковыми препаратами.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] препараты  [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].


75.Механизмы антимикробного действия антибиотиков.( Ингибиторы синтеза пептидогликана клеточной стенки, синтеза белка и нуклеиновых кислот, проницаемости цитоплазмической мембраны. )
Антибиотики в отличие от [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] обладают антибактериальной активностью не только при наружном применении, но и в биологических средах организма при их системном (перорально, внутримышечно, внутривенно, ректально, вагинально и др.) применении.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] биологического действия
Нарушение синтеза [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] посредством ингибирования синтеза [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ],[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]), образования димеров и их переноса к растущим цепям пептидогликана ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]) или синтеза [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]). Антибиотики, действующие по подобному механизму обладают бактерицидным действием, не убивают покоящиеся клетки и клетки, лишенные клеточной стенки (L-формы бактерий).
Нарушение функционирования [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]: нарушение целостности мембраны, образование ионных каналов, связывание ионов в комплексы, растворимые в [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], и их транспортировка. Подобным образом действуют [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ],[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
Подавление синтеза нуклеиновых кислот: связывание с [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и препятствование продвижению [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]), сшивание цепей ДНК, что вызывает невозможность её расплетания ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]), ингибирование ферментов.
Нарушение синтеза [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]).
Нарушение синтеза белка: ингибирование активации и переноса аминокислот, функций [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ],[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]).
Ингибирование работы [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]).

76.Единицы антимикробной активности антибиотиков. Методы определения антибиотиков в крови и моче.
За единицу активности антибиотика принимают наименьшее количество препарата, которое оказывает антимикробное действие на чувствительные к нему тест бактерии (например, для пенициллина золотистый стафилококк, стрептомицина кишечная палочка и т/п.).
В настоящее время единицы активности антибиотиков выражают вмикро граммах чистого препарата. Так, за единицу активности пенициллина принимают 0,6 мкг, а для большей части антибиотиков 1 ЕД соответствует 1 мкг (стрептомицин и ДР) В нашей стране создана мощная промышленность по производству антибиотиков. Природные антибиотики получают биосинтетическим путем: штаммы продуценты грибов, актиномицетов, бактерий выращивают в жидкой питательной среде соответствующего состава, при определенном значении pH, оптимальной температуре и аэрации. Антибиотические вещества являются конечными продуктами метаболизма микроорганизмов и продуцируются клетками в питательную среду, откуда их извлекают химическими методами. Изучение химической структуры антибиотиков позволило получать синтетические препараты методом химического синтеза (левомицетин). Большим достижением является разработка методов получения полусинтетических антибиотиков, основанных на изменении химической структуры природного препарата.
Определение антибиотика в крови, моче и других жидкостях организма человека. В штатив устанавливают два ряда пробирок. В одном из них готовят разведения эталонного антибиотика, в другом исследуемой жидкости.  Затем  в  каждую  пробирку вносят   взвесь   тест-бактерий,   приготовленную   в   среде   Гисса с глюкозой. При определении в исследуемой жидкости пенициллина,   тетрациклинов,   эритромицина   в   качестве  тест-бактерий используют  стандартный  штамм   S. aureus,  а  при  определении стрептомицина Е. coli. После инкубирования посевов при 37 °С в течение 1820 ч отмечают результаты опыта по помутнению среды и ее окрашиванию индикатором вследствие расщепления глюкозы   тест-бактериями.   Концентрация   антибиотика   определяется умножением наибольшего разведения исследуемой жидкости,   задерживающей   рост   тест-бактерий,   на   минимальную концентрацию   эталонного   антибиотика,   задерживающего   рост тех же тест-бактерий. Например, если максимальное разведение исследуемой жидкости, задерживающее рост тест-бактерий, равно  1:1024,  а   минимальная  концентрация  эталонного  антибиотика, задерживающего рост тех же тест-бактерий, 0,313 мкг/мл, то произведение   1024х0,313=320 мкг/мл  составляет  концентрацию антибиотика в 1 мл.

77.Количественное и качественное определение чувствительности бактерий к антибиотикам. Оценка результатов и значение.
Для определения чувствительности бактерий к антибиотикам (антибиотикограммы) обычно применяют:   Метод диффузии в агар. На агаризованную питательную среду засевают исследуемый микроб, а затем вносят антибиотики. Обычно препараты вносят или в специальные лунки в агаре, или на поверхности посева раскладывают диски с антибиотиками («метод дисков»). Учет результатов проводят через сутки по наличию или отсутствию роста микробов вокруг лунок (дисков). Метод дисков качественныйи позволяет оценить, чувствителен или устойчив микроб к препарату.  Методы определения минимальных ингибирующих и бактерицидных концентраций, т. е. минимального уровня антибиотика, который позволяет invitroпредотвратить видимый рост микробов в питательной среде или полностью ее стерилизует. Это количественные методы, которые позволяют рассчитать дозу препарата, так как концентрация антибиотика в крови должна быть значительно выше минимальной ингибирующей концентрации для возбудителя инфекции. Введение адекватных дозпрепарата необходимо для эффективного лечения и профилактики формирования устойчивых микробов. Есть ускоренные способы, с применением автоматических анализаторов.
Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков. Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар или среду АГВ в чашке Петри. Среда АГВ: сухой питательный рыбный бульон, агар-агар, натрий фосфат двузамещенный. Среду готовят из сухого порошка в соответствии с инструкцией. На засеянную поверхность пинцетом помещают на одинаковом расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посевы инкубируют при 37 °С до следующего дня. По диаметру зон задержки роста исследуемой культуры бактерий судят о ее чувствительности к антибиотикам. Для получения достоверных результатов необходимо применять стандартные диски и питательные среды, для контроля которых используются эталонные штаммы соответствующих микроорганизмов. Метод дисков не дает надежных данных при определении чувствительности микроорганизмов к плохо диффундирующим в агар полипептидным антибиотикам (например, полимиксин, ристомицин). Если эти антибиотики предполагается использовать для лечения, рекомендуется определять чувствительность микроорганизмов методом серийных разведений. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом серийных разведений. Данным методом определяют минимальную концентрацию антибиотика, ингибирующую рост исследуемой культуры бактерий. Вначале готовят основной раствор, содержащий определенную концентрацию антибиотика (мкг/мл или ЕД/мл) в специальном растворителе или буферном растворе. Из него готовят все последующие разведения в бульоне (в объеме 1 мл), после чего к каждому разведению добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 106107 бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии бактерий (контроль культуры). Посевы инкубируют при 37 °С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем культуры. Последняя пробирка с прозрачной питательной средой указывает на задержку роста исследуемой культуры бактерий, под влиянием содержащейся в ней минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибиотика. Оценку результатов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проводят по специальной готовой таблице, которая содержит пограничные значения диаметров зон задержки роста для устойчивых, умеренно устойчивых и чувствительных штаммов, а также значения МИК антибиотиков для устойчивых и чувствительных штаммов.

78.Противовирусные химиотерапевтические препараты. Основные противовирусные препараты: ремантадин, йоддезоксиуридин, производные тиосемикарбозона и др. Механизм их действия.
Большинство известных химиотерапевтических препаратов не обладает противовирусной активностью, так как механизм действия большинства из них основан на подавлении микробного метаболизма, а у вирусов собственные метаболические системы отсутствуют.
Антибиотики и сульфаниламиды при вирусных инфекциях используют только с целью профилактики бактериальных осложнений. Тем не менее, в настоящее время разрабатываются и применяются химиотерапевтические средства, обладающие противовирусной активностью. Прежде всего - это аномальные нуклеозиды. По строению они близки к нуклеотидам вирусных нуклеиновых кислот, но включенные в состав нуклеиновой кислоты, они не обеспечивают ее нормальное функционирование. К таким препарат относятся азидотимидин - препарат активный в отношении вируса иммунодефицита человека (ВИЧ-инфекция). Недостаток этих препаратов в высокой токсичности для клеток макроорганизма.
Вторая группа препаратов нарушает процессы абсорбции вирусов на клетках. Они менее токсичны, обладают высокой избирательностью и весьма перспективны. Это тиосемикарбозон и его производные, ацикловир (зовиракс) -- герпетическая инфекция, ремантадин и его производные -- грипп А, и другие.
Универсальным средством терапии, так же как и профилактики вирусных инфекций является интерферон.
Ремантадин
Являясь слабым основанием, повышает [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], имеющих мембрану [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и окружающих вирусные частицы после их проникновения в клетку. Предотвращение ацидификации в этих вакуолях блокирует слияние вирусной оболочки с мембраной эндосомы, предотвращая таким образом передачу вирусного генетического материала в [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] клетки. Римантадин угнетает также выход вирусных частиц из клетки, то есть прерывает транскрипцию вирусного [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
Йоддезоксиуридин
Синтез клеточной ДНК нарушается за счет трех механизмов и каждый из них или все они вместе могут также играть определяющую роль в блокировании размножения вирусов: а) идоксуридин или его фосфорилированные производные конкурируют с тимидином за определенные ферменты, прямо или косвенно участвующие в синтезе ДНК (тимидинкиназа, тимидилатсинтетаза, ДНК-полимераза), б) препарат подавляет активность некоторых ферментов по механизму обратной связи и в) после фосфорилирования идоксуридин включается в ДНК на место тимидина, что приводит к нарушению функций молекулы при транскрипции и(или) репликации (Прузоф, 1972).

79.Возникновение и распространение лекарственной устойчивости бактерий как биологическая и медицинская проблема. (Первичная и приобретенная Резистентность микроорганизмов к химиотерапевтическим препаратам. Их биохимические и генетические механизмы. Роль плазмид. Пути преодоления лекарственной резистентности бактерий.)
Резистентность микроорганизмов к антибиотикам может быть природной и приобретённой.
Истинная природная устойчивость характеризуется отсутствием у микроорганизмов мишени действия антибиотика или недоступности мишени вследствие первично низкой проницаемости или ферментативной инактивации. При наличии у бактерий природной устойчивости антибиотики клинически неэффективны. Природная резистентность является постоянным видовым признаком микроорганизмов и легко прогнозируется.
Под приобретённой устойчивостью понимают свойство отдельных штаммов бактерий сохранять жизнеспособность при тех концентрациях антибиотиков, которые подавляют основную часть микробной популяции. Возможны ситуации, когда большая часть микробной популяции проявляет приобретённую устойчивость. Появление у бактерий приобретённой резистентности не обязательно сопровождается снижением клинической эффективности антибиотика. Формирование резистентности во всех случаях обусловлено генетически: приобретением новой генетической информации или изменением уровня экспрессии собственных генов.
Известны следующие биохимические механизмы устойчивости бактерий к антибиотикам:
Модификация мишени действия.
Инактивация антибиотика.
Активное выведение антибиотика из микробной клетки.
Нарушение проницаемости внешних структур микробной клетки.
Формирование метаболического «шунта».
Осложнения: дисбиоз, аллергические реакции, токсическое действие( ототоксичность – стрептомицин, нефротоксичность – гликозиды, гепатотоксичность – тетрациклин) угнетение иммунитета, резистентность, гиповитаминоз.

80.Понятие об «инфекции», «инфекционном процессе», «инфекционной болезни». Условия возникновения инфекционных заболеваний.
Инфе
·кция  заражение живых [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]), а также [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека (в медицине), животных (в зоотехнике, ветеринарии), растений (в агрономии).
инфекционный процесс
комплекс реакций, возникающих в макроорганизме в результате внедрения и размножения в нем патогенных микроорганизмов и направленных на обеспечение гомеостаза и равновесия с окружающей средой; проявления И. п. варьируют от носительства возбудителей до клинически выраженного заболевания.
Инфекцио
·нные заболева
·ния  это группа заболеваний, вызываемых проникновением в организм патогенных (болезнетворных) [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. Для того чтобы патогенный микроб вызвал инфекционное заболевание, он должен обладать вирулентностью (ядовитостью; [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] virus  яд), то есть способностью преодолевать сопротивляемость организма и проявлять [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] действие. Одни патогенные агенты вызывают отравление организма выделяемыми ими в процессе жизнедеятельности [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] (столбняк, дифтерия), другие  освобождают токсины (эндотоксины) при разрушении своих тел (холера, брюшной тиф).
Одной из особенностей инфекционных заболеваний является наличие инкубационного периода, то есть периода от времени заражения до появления первых признаков. Длительность этого периода зависит от способа заражения и вида возбудителя и может длиться от нескольких часов до нескольких лет (последнее бывает редко). Место проникновения микроорганизмов в организм называют входными воротами инфекции. Для каждого вида заболевания имеются свои входные ворота, так, например, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]проникает в организм через [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и не способен проникать через кожу.
81.Роль микроорганизма – возбудителя в инфекции.( Факультативный и облигатный, внеклеточный и внутриклеточный паразитизм бактерий, риккетсий, хламидий, микоплазм, грибов и простейших. Облигатный внутриклеточный паразитизм вирусов.)
82.Патогенность и вирулентность бактерий.( Факторы патогенности и персистенции: адгезивность, колонизация, пенетрация, инвазия.
83.Ферменты патогенности. Вещества, подавляющие фагоцитоз (капсульные полисахариды и пептиды, протеины и липополисахариды клеточных стенок).
84.Единицы измерения вирулентности.Dlm, Dcl, Dl50, ID
85.Токсигенность и токсичность бактерий.( Белковые токсины. Основные свойства и механизм действия. Единицы измерения силы токсинов. Эндотоксины бактерий. Химический состав и основные свойства. Отличие от белковых токсинов.)
86.Токсические вещества риккетсий, хламидий, вирусов.
87.Генетический контроль факторов патогенности и токсигенности у бактерий.
88.Источники и пути передачи возбудителей инфекционных заболеваний.
98.Входные ворота инфекции. Распространение бактерий, вирусов и токсинов в организме( бактериемия, сепсис (септикопиемия, септицемия), вирусемия, фунгемия, паразитемия, токсинемия.)
89. Динамика развития инфекционной болезни.
90.Формы инфекции. Микробоносительство.
Формы инфекции, или инфекционного процесса, чрезвычайно разнообразны и носят различные наименования в зависимости от природы возбудителя, его локализации в макроорганизме, путей распространения и других условий. Экзогенная инфекция возникает в результате заражения человека патогенными микроорганизмами, поступающими из окружающей среды с пищей, водой, воздухом, почвой, выделениями больного человека, реконвалесцента и микробоносителя.

Эндогенная инфекция вызывается представителями нормальной микрофлоры - условно-патогенными микроорганизмами самого индивидуума. Она часто возникает при иммунодефицитных состояниях организма.

Аутоинфекция - разновидность эндогенной инфекции, которая возникает в результате самозаражения путем переноса возбудителя (обычно руками самого больного) из одного биотопа в другой. Например, из полости рта или носа на раневую поверхность. В зависимости от локализации возбудителя различают очаговую инфекцию, при которой микроорганизмы локализуются в местном очаге и не распространяются по организму. Например, при фурункулезе стафилококки находятся в волосяных фолликулах, при ангине стрептококки обнаруживаются в миндалинах, при конъюнктивитах возбудитель локализуется на конъюнктиве глаза и т.д.

Однако очаговая инфекция при малейшем нарушении равновесия между макро- и микроорганизмами может перейти в генерализованную форму, при которой возбудитель распространяется по организму лимфогенным или гематогенным путем. В последнем случае развивается бактериемия или вирусемия. Кровь в таких случаях является механическим переносчиком возбудителя, поскольку последний в ней не размножается.

Наиболее тяжелой генерализованной формой инфекции является сепсис. Это состояние характеризуется размножением возбудителя в крови при резком угнетении основных механизмов иммунитета.

При сепсисе или септицемии главным местом размножения микроорганизмов является кровь. Близким к сепсису является циклическое размножение в крови некоторых простейших (малярийный плазмодий, трипаносомы) при соответствующих протозойных инвазиях. При возникновении гнойных очагов во внутренних органах начинается септикопиемия, а при массовом поступлении в кровь бактерий и их токсинов развивается бактериальный или токсико-септический шок.

Моноинфекция вызывается одним видом микроорганизмов, в то время как смешанная инфекция - двумя или несколькими видами. Наиболее тяжело протекают смешанные инфекции. Они могут быть вызваны разными бактериями: стафилококком, протеем, синегнойной палочкой, как это часто наблюдается при внутрибольничной хирургической инфекции. К смешанным (микст) инфекциям относятся многие респираторные заболевания, вызванные бактериями, вирусами, микоплазмами в разнообразных сочетаниях .
Микробоносительство
(носительство возбудителей инфекций, инвазий, заразоносительство) - одна из форм инфекции (см.), при к-рой паразит-возбудитель обитает на коже или слизистой оболочке организма хозяина, но не вызывает патологических изменений структуры и функции органа и поведения хозяина. За М. принимают только такие случаи бессимптомного присутствия возбудителя в организме, при к-рых он выделяется в окружающую среду, может перейти (заразить) к новому хозяину и явиться причиной новых (вторичных) случаев заболевания. В биол. плане М. - это состояние временного подвижного равновесия между паразитом и хозяином, к-рое при изменении условий способно перейти в болезнь или «выздоровление» (освобождение от возбудителя). Состояние М. создается и поддерживается малой «базой» возбудителя, патологическими изменениями в органе, снижающими местный иммунитет и затрудняющими доступ в орган Ат и фагоцитов, врожденной или приобретенной недостаточностью организма к формированию приобретенного иммунитета, переходом возбудителя в менее чувствительные к иммунным факторам хозяина формы существования (напр., L-форму). В зависимости от группы, к к-рой принадлежит возбудитель, различают бактерионосителъство, паразитоносителъство, мшоносителъство, вирусоносителъство. Эта классификация может быть продолжена по виду возбудителя, напр., брюшнотифозное М. Кроме брюшного тифа М. встречается при паратифах, дизентерии, холере, сальмонеллезах, вирусных гепатитах А и В, дифтерии, менингококковой инфекции, скарлатине, полиомиелите, амебиазе, лямблиозе, трихомониазе, малярии, трипаносомозе. Выделяют также М. стафилококков, некоторых факультативных для органа условно-патогенных микробов. В зависимости от происхождения рассматривают М. здоровых (не болевших этой болезнью людей) и М. реконвалесцентов, т. е. лиц, продолжающих выделять возбудителя после клин, выздоровления. Оправдана и третья форма М. по происхождению - инкубационное М.По длительности выделения возбудителя различают острое и хроническое М. В качестве границы между этими формами предлагают временный период в 1-3 - 6 ме


91.Инфекционные свойства вирусов и особенности вирусных инфекций. Тропизм вирусов. Острая и персистирующая вирусная инфекция.
Вирусы человека и животных являются облигатными внутриклеточными паразитами, которые в чувствительных к ним клетках организма хозяина вызывают продуктивную инфекцию, заканчивающуюся образованием многочисленного потомства. Отсутствие среди вирусов непатогенных особей позволяет опустить применительно к ним такой термин, как патогенность. Вирусы не могут обладать вирулентными свойствами, поскольку вирулентность присуща только живым активно метаболизирующим клеткам патогенных микроорганизмов, поэтому вместо понятий «патогенность» и «вирулентность» в случае вирусов более правомочен термин «инфекционность» или «инфекциозность». В основе вирусных инфекций лежит взаимодействие вирусного и клеточного геномов. Это находит свое выражение в освобождении и переключении рибосом клетки хозяина на синтез вирусспецифических белков, прежде всего ферментов, или в интеграции вирусной нуклеиновой кислоты в хромосому зараженный клетки.

Вирусные болезни, так же как и другие инфекционные заболевания, возникают при проникновении возбудителя в макроорганизм через определенные входные ворота инфекции. Например, вирусы гриппа, кори и многие другие проникают в организм человека только аэрозольным путем, а вирусы герпеса - множественными путями. Следующий этап вирусной инфекции состоит в адсорбции вируса на рецепторах чувствительных клеток организма хозяина. Однако в отличие от бактериальных, грибковых и протозойных инфекций все последующие события определяются вирусной нуклеиновой кислотой. Это выражается в характерных особенностях, присущих только вирусным инфекциям.

Первая особенность состоит в способности многих РНК- и ДНК-содержащих вирусов вызывать интегративную инфекцию (вирогению), которая происходит при встраивании вирусной нуклеиновой кислоты в хромосому клетки хозяина. Это имеет место при гепатите В, аденовирусной и герпетической инфекции, СПИДе и др. При вирогении отсутствуют стадии репродукции, сборки и выхода вируса из клетки. Клетки с интегрированным вирусным геномом (провирусом) могут сохранить свои функции. Однако в определенных условиях интеграция вирусного генома может привести к мутациям и неконтролируемому делению клетки. Встроенная вирусная ДНК синхронно реплицируется с клеточной ДНК и при делении материнской клетки передается дочерним. При интегративной инфекции вирусный геном может не транскрибироваться или транскрибироваться частично. В случае выщепления из клеточной ДНК происходит его транскрипция и автономная репликация, которая заканчивается выходом вирусного потомства так же, как при продуктивной инфекции.

Вторая особенность обусловлена наличием стадии вирусемии, во время которой вирус циркулирует в крови. В кровь вирус может поступать из лимфатической системы, переноситься лейкоцитами, проникать в кровеносные капилляры из первично инфицированных клеток. Исключение составляют вирусы, распространяющиеся нейрогенным путем (вирусы бешенства, простого герпеса и др.).

Третья особенность заключается в поражении вирусами лимфоцитов - клеток иммунной системы организма человека. Вирусы гриппа, кори, герпеса, полиомиелита, ротавирусы и др. угнетают иммунные реакции Т-лимфоцитов. Вирусы герпеса, вызывающие ветряную оспу и опоясывающий лишай, вирус цитомегалии индуцируют увеличение абсолютного количества Т-лимфоцитов, а вирус клещевого энцефалита вызывает их активацию.

Лимфотропность подавляющего большинства вирусов человека и вотных существенно отражается на патогенезе и исходе вирусных заболеваний, что проявляется в возникновении иммунодефицитных и других иммунопатологических состояний. Наиболее специализированными облигатно-лимфотропными вирусами являются три вируса, поражающие Т-лимфоциты человека, и один - В-лимфоциты. Два первых вируса (HTLV-I и HTLV-II от англ. human T-cell limphotropic virus) вызывают лейкоз вследствие пролиферации Т-лимфоцитов. Третий вирус HTLV-III, или ВИЧ, является возбудителем СПИДа, который в отличие от первых двух вызывает деструкцию Т-лимфоцитов. Вирус герпеса Эпштейна-Баррвоз будитель инфекционного мононуклеоза - вызывает пролиферацию 3-лимфоцитов.
О
·страя респирато
·рная ви
·русная инфе
·кция (ОРВИ)  группа острозаразных вирусных заболеваний верхних дыхательных путей, передающихся воздушно-капельным путём и характеризующихся симптомами инфекционного токсикоза. ОРВИ самая распространённая в мире группа заболеваний, объединяющая [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] инфекции и другие катаральные воспаления верхних дыхательных путей[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ][ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. В процессе развития вирусное заболевание может осложняться бактериальной инфекцией.
В быту слово «простуда» иногда относится к проявлениям [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] на губах, а не к заболеванию дыхательных путей[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].



92.Роль макроорганизмов и окружающей среды в инфекционном процессе. Значение социальных факторов. Внутрибольничные инфекции.
Роль макроорганизма. Если микроорганизм в основном определяет специфичность инфекционного процесса, то форма его проявления, длительность, тяжесть и исход зависят также от состояния защитных механизмов макроорганизма. Восприимчивость макроорганизма определяется фено- и генотипическими особенностями, изменениями реактивности, обусловленными действием факторов окружающей среды.

К защитным механизмам относятся: наружные барьеры (кожа, слизистые оболочки глаз, дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и половых органов), внутренние (гистиогемоцитарные) барьеры, клеточные и гуморальные (неспецифические и специфические) механизмы.

Кожа является непреодолимым механическим барьером для большинства микроорганизмов; кроме того, секрет потовых желез содержит лизоцим, бактерицидный в отношении ряда микроорганизмов. Слизистые оболочки также являются механическим барьером на пути распространения микроорганизмов; их секрет содержит секреторные иммуноглобулины, лизоцим, фагоцитирующие клетки. Сильным бактерицидным действием обладает слизистая оболочка желудка, выделяющая соляную кислоту. Поэтому кишечные инфекции чаще наблюдаются у лиц с пониженной кислотностью желудочного сока или при попадании возбудителей в межсекреторный период, когда содержание соляной кислоты минимальное. Нормальная микрофлора кожи и слизистых оболочек также обладает выраженным антагонистическим действием в отношении многих патогенных микробов. Из гистиогемоцитарных барьеров наиболее сильным защитным действием обладает гематоэнцефалический барьер, поэтому в вещество мозга микроорганизмы проникают относительно редко.

Важную защитную функцию выполняют фагоцитирующие клетки макро- и микрофаги, которые являются следующим этапом после внешних барьеров на пути распространения патогенных микроорганизмов. Защитную функцию выполняют нормальные антитела, комплемент, интерфероны. Ведущая защитная функция при инфекционном процессе принадлежит клеточному и гуморальному иммунитету как специфическому фактору защиты (см. Иммунитет).

К защитным механизмам следует отнести и ферментные системы, метаболизирующие токсические субстанции микроорганизмов, а также процесс выделения токсинов и микроорганизмов через мочевыводящую систему и желудочно-кишечный тракт.

Факторы окружающей среды, нарушающие гомеостаз, могут способствовать возникновению инфекционного процесса и влиять на характер его течения. Важное значение имеет повреждение барьеров, неполноценное питание, физические воздействия (чрезмерная инсоляция, визирующее излучение, действие высоких и низких температур), экзогенные и эндогенные интоксикации, ятрогенные воздействия.

Внутрибольничная инфекция (нозокомиальная, больничная, госпитальная) - любое клинически выраженное заболевание микробного происхождения, которое поражает больного в результате его поступления в больницу или обращения за медицинской помощью, а также заболевание сотрудника больницы вследствие его работы в данном учреждении, вне зависимости от появления симптомов заболевания во время пребывания или после выписки из больницы (Европейское региональное бюро ВОЗ, 1979 г.).
Несмотря на достижения в здравоохранении проблема внутрибольничных инфекций остается одной из острых в современных условиях, приобретая все большую медицинскую и социальную значимость. По данным ряда исследований, уровень смертности в группе госпитализированных и приобретших внутрибольничные инфекции в 8-10 раз превышает таковой среди госпитализированных без внутрибольничных инфекций.
Ущерб, связанный с внутрибольничной заболеваемостью, складывается из удлинения времени пребывания больных в стационаре, роста летальности, а также сугубо материальных потерь. Однако существует еще и социальный ущерб, не подающийся стоимостной оценке (отключением больного от семьи, трудовой деятельности, инвалидизация, летальные исходы и пр.). В США экономический ущерб, связанный с внутрибольничными инфекциями, оценивается в 4,5-5 млрд. долларов ежегодно.
Этиологическая природа ВБИ определяется широким кругом микроорганизмов (более 300), которые включают в себя как патогенную, так и условно-патогенную флору, граница между которыми часто достаточно размыта.
Внутрибольничная инфекция обусловлена активностью тех классов микрофлоры, которая, во-первых, встречается повсеместно и, во-вторых, характерна выраженная тенденция к распространению. Среди причин, объясняющих эту агрессивность - значительная природная и приобретенная устойчивость такой микрофлоры к повреждающим физическим и химическим факторам окружающей среды, непритязательность в процессе роста и размножения, тесное родство с нормальной микрофлорой, высокая контагионость, способность к формированию устойчивости к антимикробным средствам.


93.Биологический метод исследования, его применение для моделирования инфекционных процессов и диагностики инфекционных заболеваний.
2) инвазией это способность внедряться во внутреннюю среду организма хозяина и распространяться по его органам и тканям. Микроорганизмы способны вырабатывать различные ферменты агрессии, для преодоления защитных барьеров макроорганизма. К ним относятся: нейраминидаза фермент, который расщепляет биополимеры, которые входят в состав поверхностных рецепторов клеток слизистых оболочек. Это делает оболочки доступными для воздействия на них микроорганизмов; гиалуронидаза действует на межклеточное и межтканевое пространство. Это способствует проникновению микробов в ткани организма; дезоксирибо-нуклеаза (ДНКаза) фермент, который деполимеризирует ДНК, и др. Ферменты микроорганизмов могут действовать местно и генерализованно. Большую роль в преодолении межклеточных барьеров играют жгутики бактерий;

3) капсулообразованием это способность микроорганизмов образовывать на поверхности капсулу, которая защищает бактерии от клеток фагоцитов организма хозяина (пневмококки, чума, стрептококки). Если капсул нет, то образуются другие структуры: например, у стафилококка белок А, с помощью этого белка стафилококк взаимодействует с иммуноглобулинами. Такие комплексы препятствуют фагоцитозу. Или же микроорганизмы вырабатывают определенные ферменты: например, плазмокоагулаза приводит к свертыванию белка, который окружает микроорганизм и защищает его от фагоцитоза;

4) токсинообразованием способность микроорганизмов вырабатывать яды. По своим свойствам токсины делятся на эндотоксины и экзотоксины.

Экзотоксины это вещества белковой природы, обладают выраженными иммуногенными и антигенными свойствами. Они состоят из двух фрагментов А и В. В-фрагмент способствует адгезии и инвазии; А-фрагмент обладает выраженной активностью по отношению к внутренним системам клетки.

По типу действия экзотоксины делятся на:

А. Цитотоксины блокируют синтез белка в клетке (дифтерия, шигеллы);

Б. Мембранотоксины действуют на мембраны клеток (лейкоцидин стафилококка действует на мембраны клеток фагоцитов или стрептококковый гемолизин действует на мембрану эритроцитов). Наиболее сильные эзотоксины вырабатывают возбудители столбняка дифтерии, ботулизма. Характерной особенностью экзотоксинов является их способность избирательно поражать определенные органы и ткани организма. Например, экзотоксин столбняка поражает двигательные нейроны спинного мозга, а дифтерийный экзотоксин поражает сердечную мышцу и надпочечники.

Для профилактики и лечения токсинемических инфекций применяются анатоксины (обезвреженные экзотоксины микроорганизмов) и антитоксические сыворотки.

Эндотоксины тесно связаны с телом микробной клетки и освобождаются при ее разрушении. Эндотоксины не обладают таким выраженным специфическим действием, как экзотоксины, а также менее ядовиты. Не переходят в анатоксины. Эндотоксины являются суперантигенами, они могут активизировать фагоцитоз, аллергические реакции. Эти токсины вызывают общее недомогание организма, их действие не отличается специфичностью. Независимо от того, от какого микроба получен эндотоксин, клиническая картина однотипна: это, как правило, лихорадка и тяжелое общее состояние. Выброс эндотоксинов в организм может привести к развитию инфекцион-но-токсического шока.

§ 2. Методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний

Существует 5 основных методов диагностики:

1) микроскопический позволяет обнаружить возбудителя непосредственно в материале, взятом от больного. Для этого мазок окрашивают различными способами. Этот метод играет решающую роль при диагностике многих инфекционных заболеваний: туберкулеза, малярии, гонореи и др.;

2) бактериологический заключается в посеве исследуемого материала на питательные среды. Этот метод позволяет выделить возбудителя в чистом виде и изучить его морфологические признаки, ферментативную активность и идентифицировать его;

3) биологический метод осуществляют путем выделения возбудителя при заражении лабораторных животных, которые восприимчивы к данному заболеванию. Этот метод дорогостоящий, поэтому применяется ограниченно;

4) серологические методы исследования основаны на выявлении специфических иммунных антител в сыворотке крови больного. Для этого используют различные иммунологические реакции: реакция Видаля (используется для выявления брюшного тифа);

5) аллергический метод ставятся кожно-аллергические пробы, введение аллергена накожно или внутрикожно; используются для диагностики туберкулеза, туляремии, лепры и т. д.



94.Понятие об иммунитете.
Виды иммунитета.
Иммунитет – это способ защиты организма от генетически чужеродных веществ – антигенов экзогенного и эндогенного происхождения, направленный на поддержание и сохранение гомеостаза, структурной и функциональной целостности организма, биологической (антигенной)индивидуальности каждого организма и вида в целом.
Различают несколько основных видов иммунитета.
Врожденный, иди видовой, иммунитет, он же наследственный, генетический, консти­туциональный это выработанная в про­цессе филогенеза генетически закреплен­ная, передающаяся по наследству невоспри­имчивость данного вида и его индивидов к какому-либо антигену (или микроорганиз­му), обусловленная биологическими осо­бенностями самого организма, свойствами данного антигена, а также особенностями их взаимодействия.
Примером может служить невосприимчи­вость человека к некоторым возбудителям, в том числе к особо опасным для сельскохо­зяйственных животных (чума крупного рога­того скота, болезнь Ньюкасла, поражающая птиц, оспа лошадей и др.), нечувствитель­ность человека к бактериофагам, поражаю­щим клетки бактерий. К генетическому им­мунитету можно также отнести отсутствие взаимных иммунных реакций на тканевые антигены у однояйцовых близнецов; различают чувствительность к одним и тем же антигенам у различных линий животных, т. е. животных с различным генотипом.
Видовой иммунитет может быть абсолют­ным и относительным. Например, нечувс­твительные к столбнячному токсину лягушки могут реагировать на его введение, если по­высить температуру их тела. Белые мыши, не чувствительные к какому-либо антигену, при­обретают способность реагировать на него, если воздействовать на них иммунодепрессантами или удалить у них центральный орган иммунитета тимус.
Приобретенный иммунитет это невос­приимчивость к антигену чувствительного к нему организма человека, животных и пр., приобретаемая в процессе онтогенеза в результате естественной встречи с этим антигеном организма, например, при вак­цинации.
Примером естественного приобретенного иммунитета у человека может служить не­восприимчивость к инфекции, возникающая после перенесенного заболевания, так назы­ваемый постинфекционный иммунитет (на­пример, после брюшного тифа, дифтерии и других инфекций), а также «проиммуниция», т. е. приобретение невосприимчивости к ряду микроорганизмов, обитающих в окружающей среде и в организме человека и постепен­но воздействующих на иммунную систему своими антигенами.
В отличие от приобретенного иммунитета в результате перенесенного инфекционного за­болевания или «скрытной» иммунизации, на практике широко используют преднамерен­ную иммунизацию антигенами для создания к ним невосприимчивости организма. С этой целью применяют вакцинацию, а также вве­дение специфических иммуноглобулинов, сывороточных препаратов или иммунокомпетентных клеток. Приобретаемый при этом иммунитет называют поствакци­нальным, и служит он для защиты от возбу­дителей инфекционных болезней, а также других чужеродных антигенов.
Приобретенный иммунитет может быть ак­тивным и пассивным. Активный иммунитет обусловлен активной реакцией, активным вовлечением в процесс иммунной системы при встрече с данным антигеном (например, поствакцинальный, постинфекционный им­мунитет), а пассивный иммунитет формируется за счет введения в организм уже готовых иммунореагентов, способных обеспечить защиту от антигена. К таким иммунореагентам отно­сятся антитела, т. е. специфические иммуног­лобулины и иммунные сыворотки, а также иммунные лимфоциты. Иммуноглобулины широко используют для пассивной иммуни­зации, а также для специфического лечения при многих инфекциях (дифтерия, ботулизм, бешенство, корь и др.). Пассивный иммуни­тет у новорожденных детей создается имму­ноглобулинами при плацентарной внутриут­робной передаче антител от матери ребенку играет существенную роль в защите от многих детских инфекций в первые месяцы жизни ребенка.
Поскольку в формировании иммунитета принимают участие клетки иммунной сис­темы и гуморальные факторы, принято ак­тивный иммунитет дифференцировать в за­висимости от того, какой из компонентов иммунных реакций играет ведущую роль в формировании защиты от антигена. В связи с этим различают клеточный, гуморальный, клеточно-гуморальный и гуморально-клеточный иммунитет.
Примером клеточного иммунитета может служить противоопухолевый, а также транс­плантационный иммунитет, когда ведущую роль в иммунитете играют цитотоксические Т-лимфоциты-киллеры; иммунитет при токсинемических инфекциях (столбняк, боту­лизм, дифтерия) обусловлен в основном ан­тителами (антитоксинами); при туберкулезе ведущую роль играют иммунокомпетентные клетки (лимфоциты, фагоциты) с участием специфических антител; при некоторых ви­русных инфекциях (натуральная оспа, корь и др.) роль в защите играют специфические антитела, а также клетки иммунной системы.
В инфекционной и неинфекционной пато­логии и иммунологии для уточнения харак­тера иммунитета в зависимости от природы и свойств антигена пользуются также такой терминологией: антитоксический, противо­вирусный, противогрибковый, противобактериальный, противопротозойный, трансплан­тационный, противоопухолевый и другие ви­ды иммунитета.
Наконец, иммунное состояние, т. е. актив­ный иммунитет, может поддерживаться, со­храняться либо в отсутствие, либо только в присутствии антигена в организме. В первом случае антиген играет роль пускового фак­тора, а иммунитет называют стерильным. Во втором случае иммунитет трактуют как не­стерильный. Примером стерильного иммуни­тета является поствакцинальный иммунитет при введении убитых вакцин, а нестерильно­го иммунитет при туберкулезе, который со­храняется только в присутствии в организме микобактерий туберкулеза.
Иммунитет (резистентность к антигену) может быть системным, т. е. генерализован­ным, и местным, при котором наблюдается более выраженная резистентность отдельных органов и тканей, например слизистых верх­них дыхательных путей (поэтому иногда его называют мукозальным).
Видовой (наследственный) иммунитет.
Врожденный, иди видовой, иммунитет, он же наследственный, генетический, консти­туциональный это выработанная в про­цессе филогенеза генетически закреплен­ная, передающаяся по наследству невоспри­имчивость данного вида и его индивидов к какому-либо антигену (или микроорганиз­му), обусловленная биологическими осо­бенностями самого организма, свойствами данного антигена, а также особенностями их взаимодействия.
Примером может служить невосприимчи­вость человека к некоторым возбудителям, в том числе к особо опасным для сельскохо­зяйственных животных (чума крупного рога­того скота, болезнь Ньюкасла, поражающая птиц, оспа лошадей и др.), нечувствитель­ность человека к бактериофагам, поражаю­щим клетки бактерий. К генетическому им­мунитету можно также отнести отсутствие взаимных иммунных реакций на тканевые антигены у однояйцовых близнецов; различают чувствительность к одним и тем же антигенам у различных линий животных, т. е. животных с различным генотипом.
Объяснить видовой иммунитет можно с разных позиций, прежде всего отсутствием у того или иного вида рецепторного аппарата, обеспечивающего пер­вый этап взаимодействия данного антигена с клетками или молекулами-мишенями, опре­деляющими запуск патологического процесса или активацию иммунной системы. Не исклю­чены также возможность быстрой деструкции антигена, например, ферментами организма или же отсутствие условий для приживления и размножения микроба (бактерий, вирусов) в организме. В конечном итоге это обусловле­но генетическими особенностями вида, в час­тности отсутствием генов иммунного ответа к данному антигену.
Видовой иммунитет может быть абсолют­ным и относительным. Например, нечувс­твительные к столбнячному токсину лягушки могут реагировать на его введение, если по­высить температуру их тела. Белые мыши, не чувствительные к какому-либо антигену, при­обретают способность реагировать на него, если воздействовать на них иммунодепрессантами или удалить у них центральный орган иммунитета тимус.

95.Неспецифические и специфические факторы защиты организма.
§ 3. Специфические факторы защиты

Специфическая защита организма направлена на уничтожение какого-либо конкретного антигена. Она осуществляется комплексом специальных форм реагирования иммунной системы. К этим формам относятся: антителообразова-ние, иммунный фагоцитоз, киллерная функция лимфоцитов, аллергические реакции, протекающие в виде гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ) и гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), иммунологическая память и иммунологическая толерантность.

Основными клетками, которые обеспечивают неспецифическую и специфическую защиту организма от чужеродных веществ, являются фагоцитирующие клетки, Т- и В-лимфоциты, антитела, комплемент, интерфероны, ферменты. Эти все клетки участвуют в иммунных реакциях макроорганизма. В зависимости от природы антигена на каждом из этапов защиты включаются наиболее эффективные формы реагирования и иммунореагенты. Например, для обезвреживания столбнячного и дифтерийного токсинов основную роль играют антитела (антитоксины), для предохранения от живых бактерий фагоцитоз. Для противодействия клеткам злокачественных опухолей цито-токсические Т-лимфоциты.
Результатом взаимодействия антигена с организмом человека является формирование специфической невосприимчивости организма (иммунитет), иммунологическая память к данному антигену, толерантность (терпимость) к антигену. Неблагоприятным последствием является приобретение повышенной чувствительности к антигену (аллергия).
Иммунитет антибактериальный, антивирусный, антитоксический и т. д. обеспечивает иммунная система в целом.

Как видно из схемы, иммунная система подразделена на центральные и периферические органы. В периферических органах происходит адекватный иммунный ответ на присутствие антигенов. Селезенка орган, через который фильтруется кровь. Селезенка находится в левой подвздошной области и имеет дольчатое строение. Лимфоидные скопления заселены Т-, В-лимфоцитами и плазматическими клетками. Лимфоциты распознают генетически чужеродные молекулы и клетки, участвуют в регуляции иммунного ответа, формировании гуморального и клеточного иммунитета.

Компоненты иммунной системы

Органы и ткани иммунной системы

1) центральные: костный мозг; тимус

2) периферические: селезенка; лимфатические узлы; скопление лимфоидной ткани в слизистых

Клетки иммунной системы иммунокомпетентные обеспечивают специфичность иммунологических реакций;

1) Т- и В-лимфоциты;

2) макрофаги;

3) дентритные клетки

Гуморальные факторы иммунологической активности осуществляют неспецифическую функцию уничтожения:

1) третья популяция лимфоцитов К-клетки (киллеры) NK (нормальные киллеры)

2) макрофаги;3) нейтрофилы;4) эозинофилы1) иммуноглобулины;2) цитокины (регулирующие факторы);3) комплемент


96.Классификация различных видов иммунитета.

Иммунитет бывает наследственный (видовой) и приобретенный (индивидуальный). Приобретенный делится на естественный и искусственный, а каждый из них на активный и пассивный и, в свою очередь, активный делится на стерильный и нестерильный (схема 1).

Наследственный (видовой) иммунитет это такая невосприимчивость, которая обусловлена всей совокупностью биологических особенностей, присущих тому или другому виду живых существ и приобретенных ими в процессе эволюции, т.е. характерен для определенного вида живых существ в целом (людей, животных, птиц).
Например:
существуют болезни, которыми болеет человек, но не болеют животные и птицы (корь, натуральная оспа, вирусный гепатит, холера, дизентерия и др.); есть болезни, которыми болеют животные, но не болеют человек и птицы (чума крупного рогатого скота, чума свиней);
есть болезни, которыми болеют птицы, но не болеют человек и животны (куриная холера);
есть болезни, которыми болеют животные и человек, но не болеют птицы (сибирская язва, бешенство и др.).
Приобретенный иммунитет это специфический индивидуальный иммунитет, т.е. это иммунитет, который имеется конкретно у определенных индивидуумов и к определенным возбудителям или агентам.
Механизмы его те же:
клеточные специфический фагоцитоз,
гуморальные: антитела,
клеточная ареактивность при иммунизации или после болезни (БЦЖ, очаги Гона и др.).
Иммунитет бывает стерильным и нестерильным (инфекционным, депрессивным).
Приобретенный иммунитет для большинства инфекций бывает временным, кратковременным, а для некоторых из них может быть пожизненным (корь, эпидемический паротит, краснуха и др.). Он приобретается естественным путем после перенесенного заболевания или в результате иммунопрофилактики конкретного человека и обусловлен специфическими клеточными и гуморальными факторами (фагоцитоз, антитела) или клеточной ареактивностью только к определенному возбудителю и токсину.
Если иммунитет приобретается естественным путем в процессе жизни, его называют естественным, если искусственным путем, в результате медицинских манипуляций, то его называют искусственным иммунитетом. В свою очередь каждый из них делится на активный и пассивный. Активным иммунитет называется потому, что вырабатывается самим организмом в результате попадания антигенов, возбудителей и т.п. Естественный активный иммунитет еще называют постинфекционным и он вырабатывается в организме человека после попадания возбудителей, т.е. в результате заболевания, заразоносительства или инфицирования
Искусственный активный иммунитет еще называют поствакциналъным и он вырабатывается после введения вакцин или анатоксинов.
Наконец, активный иммунитет естественный и искусственный делятся на стерильный и не стерильный. Если после перенесенной болезни организм избавился от возбудителя, то иммунитет называют стерильным (корь, краснуха, эпидемический паротит, натуральная оспа, дифтерия и др.). Если гибели возбудителя не происходит и он остается в организме иммунитет называется не стерильным. Чаще такой вариант формируется при хронических инфекциях (туберкулез, бруцеллез, сифилис и некоторые другие). Так, при туберкулезе часто после инфицирования в организме образуется очаг Гона и микобактерии в организме могут сохраняться пожизненно, создавая нестерильный иммунитет. Пока в организме сохраняется возбудитель, до тех пор сохраняется иммунитет, предохраняя его от повторного заражения. С исчезновением возбудителя из организма через некоторый срок исчезает и иммунитет. Нередко нестерильный иммунитет наблюдается при риккетсиозных и вирусных инфекциях (сыпной тиф* герпес, аденовирусная инфекция и др.). Активный иммунитет вырабатывается медленно в пределах 2-8 недель. По скорости выработки необходимой
напряженности иммунитета к одному и тому же антигену люди гетерогенны и эта гетерогенность выражается по формулам и кривым нормального распределения Гаусса. Всех людей по скорости выработки достаточного высокого иммунитета можно разделить на несколько групп: от очень быстрой выработки в сроки в пределах 2 недель до очень медленной до 8 недель и более.
Активный иммунитет, хотя он вырабатывается медленно, в организме сохраняется длительно. В зависимости от вида инфекции этот иммунитет может сохраняться несколько месяцев, в пределах 1 года (холера, чума, бруцеллез, сибирская язва и др.), несколько лет (туляремия, натуральная оспа, туберкулез, дифтерия, столбняк и др.) и даже пожизненно (корь, паротит, краснуха, скарлатина и др.). Поэтому к активной искусственной иммунизации прибегают при плановой специфической иммунопрофилактике вне зависимости от наличия заболеваний согласно директивным документам Минздрава и местных органов здравоохранения (приказов, методических указаний, инструкций).
Пассивным иммунитет называют потому, что антитела в организме сами не вырабатываются, а они приобретаются организмом из вне. При естественном пассивном иммунитете антитела ребенку передаются от матери трансплацентарно или с молоком, а при искусственном антитела вводятся людям парентерально в виде иммунных сывороток, плазмы или иммуноглобулинов. Пассивный иммунитет в организме возникает очень быстро: от 2-3 до 24 часов, но сохраняется не долго до 28 недель. Скорость возникновения пассивного иммунитета зависит от способа введения антител в организм. Если иммунную сыворотку или иммуноглобулин вводят в кровь, то организм перестроится через 2-4 часа. Если антитела вводят внутримышечно, то для рассасывания и попадания их в кровь необходимо до 6-8 часов, а если вводить подкожно, то иммунитет возникнет в течение 2024 часов. Однако каким бы способом (внутривенно, внутримышечно или подкожно) ни попали антитела в организм, пассивный иммунитет возникнет в организме значительно быстрее активного. Поэтому к искусственной пассивной иммунизации обязательно прибегают для лечения дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, сибирской язвы и некоторых других инфекций, при укусах змей и других ядовитых живых существ, а также для профилактики по эпидемическим показаниям:приугрозе возникновения
инфекции (грипп), контактным в очагах сибирской язвы, ботулизма, кори, гриппа и других, при укусе животных для профилактики бешенства, для экстренной профилактики столбняка, газовой гангрены и при некоторых других инфекциях.


97.Защитные функции кожи, слизистых, соединительной ткани, лимфатических узлов. Защитная роль нормальной микрофлоры человека.
Если микроб преодолевает защитные барьеры кожи и слизистых оболочек, он проникает по лимфатическим путям в лимфатические узлы или оседает в тканях, вызывая ответную реакцию организма воспаление.

Воспаление. Это реакция организма высших животных на внедрившиеся в ткани чужеродные частицы, в том числе и микроорганизмы. Полагают, что защитная функция воспаления состоит в том, что микроб фиксируется на месте проникновения в тканях, не распространяясь дальше по организму, и уничтожается в очаге воспаления клетками-фагоцитами. Начало воспаления характеризуется быстрой сосудистой реакцией и местным нарушением циркуляции жидкости. В очаге воспаления фагоциты формируют воспалительный вал, поглощая и переваривая микробы. После уничтожения микроорганизмов в очаге воспаления начинается период восстановления. При значительных структурных изменениях тканей на месте воспаления образуется рубец.

Фагоцитоз. Процесс активного поглощения клетками организма проникших в него чужеродных частиц, в том числе микробов, называют фагоцитозом (от греч. phagos пожирающий, kytos клетка), а клетки организма, участвующие в этом процессе, фагоцитами. Впервые И. И. Мечников показал, что фагоцитоз широко распространен природе. У низших организмов, например амеб, он является способом питания. У высших организмов, имеющих специальные пищеварительные системы, процесс фагоцитоза является, по словам Бойда, «великим очищающим механизмом». Фагоциты освобождают организм от чужеродных агентов, в том числе микробов, проникших извне, уничтожают старые клетки собственного организма, переваривают старые эритроциты, обломки клеток, а также мутировавшие клетки. Следовательно, фагоцитоз можно определить как общебиологическую реакцию, действующую как при патологических, так и физиологических состояниях организма.

Фагоцитарной активностью обладают различные клетки. Они широко рассеяны по организму, но функционируют как единая система со специальной функцией. Ее называют ретикулоэндотелиальной системой (РЭС), Фагоциты могут быть подвижными и неподвижными (фиксированные). Фиксированные фагоциты макрофаги или гистиоциты находятся в особых участках сосудистого либо лимфатического эндотелия капилляров печени (купферовы клетки), в синусах селезенки и различных лимфатических узлах. Подвижные фагоциты макрофаги, блуждающие в различных тканевых пространствах и крови, и микрофаги лейкоциты, фагоцитирующие клетки крови. Наиболее активны нейтрофилы, менее базофилы; роль эозинофилов изучена мало.

Механизм фагоцитоза. Фагоциты обладают способностью активно двигаться по направлению к микробам или другим частицам. Это явление называют хемотаксисом: положительным, если фагоцит двигается к микробу, и отрицательным при движении от микроба. Фагоцитоз в организме осуществляется в несколько стадий, или фаз:
1) движение фагоцита к объекту положительный хемотаксис;
2) прилипание объекта к фагоциту адсорбция;
3) поглощение объекта;
4) переваривание и уничтожение его ферментами фагоцита.

Различают фагоцитоз завершенный и незавершенный. В результате завершенного фагоцитоза происходит лизис бактерий в фагоцитах. При незавершенном фагоцитозе бактерии сохраняют жизнеспособность внутри фагоцита и могут даже размножаться в нем, вызывая его гибель. Незавершенный фагоцитоз наблюдается, например, при гонорее.

Факторы, влияющие на фагоцитарный процесс. Активность фагоцитов изменяется в зависимости от физиологического состояния организма. Она угнетается при авитаминозах. Гистамин, освобождающийся при воспалении из. клеток, стимулирует фагоцитоз. Биологические особенности микроорганизма оказывают существенное влияние на процесс фагоцитоза. Микробы вырабатывают различные вещества, которые препятствуют фагоцитозу: агрессины, антифагины, лейкоцидины. Не фагоцитируются также микробы, имеющие капсулу. Явления усиления фагоцитоза под влиянием антител описали Райт и И. Г. Савченко. Райт назвал их опсонинами (от греч. opsono приготовлять пищу), а И. Г. Савченко бактериотропинами. Помимо антител, в подготовке фагоцитоза участвуют комплемент и другие компоненты сыворотки.

Значение фагоцитоза огромно. Особенно велика его защитная роль в устойчивости организма к разным заболеваниям. В процессе развития инфекции фагоцитарная активность клеток повышается, а выздоровление обычно сопровождается увеличением числа лейкоцитов. Снижение или отсутствие защитной функции клеток может привести к смертельному исходу.

Защитные функции лимфоидной ткани. В случае проникновения через кожу или слизистые оболочки микроорганизмы продвигаются по лимфатическим сосудам и попадают в лимфатические узлы. Эти узлы представляют скопление клеток: одни из них выполняют функцию фагоцитов, другие вырабатывают антитела (плазматические клетки). Лимфоидная ткань составляет около 1% массы тела человека. Лимфатические узлы располагаются в разных органах и тканях: селезенке, печени, зобной железе, слизистых оболочках. В лимфоидной ткани микробы задерживаются, фагоцитируются и перевариваются. Однако в зависимости от вирулентности микроба эта функция не всегда может быть выполнена. В этом случае микробы прорываются в кровь и вызывают поражение других органов и тканей. Иногда микробы могут даже сохраняться и размножаться в лимфоидной ткани, вызывая хроническое течение заболевания, например при туберкулезе, бруцеллезе, риккетсиозах, тонзиллитах.

Реактивность клеток организма. В проявлении защитных функций организма и патогенезе инфекции большое значение имеет первичная чувствительность, или реактивность, клеток и тканей организма к микробу.

Механизмы его пока малоизвестны. Полагают, что первичная пониженная реактивность клеток тканей различных органов зависит прежде всего от процессов обмена, которые создают условия, непригодные для роста и размножения микробов. Классический пример такой пониженной реактивности клеток организма к определенным возбудителям видовой, врожденный, иммунитет. Реактивность клеток и тканей организма может изменяться с возрастом и зависит от действия различных физических и химических факторов.



98.Клеточные и гуморальные неспецифические факторы защиты.
Неспецифические факторы защиты
Неспецифические факторы защиты - механические, физические и гуморальные факторы неспецифической резистентности организма.

Главными механическими барьерами зашиты являются кожа и слизистые оболочки. Здоровая кожа наряду с механической барьерной функцией обладает выраженными бактерицидными свойствами, обусловленными наличием нормальной микрофлоры на её поверхности. Определение степени бактерицидности кожи широко применяется в гигиенических и клинических исследованиях.

Неспецифические факторы защиты слизистых оболочек те же, что и у кожи, например кислая реакция (рН) желудочного сока (ниже 3), влагалища (44,5). Кроме того, клетки слизистых оболочек содержат лизоцим и секреторный иммуноглобулин класса А (SIgA), играющие важную роль в устойчивости кишечника, респираторных и мочеполовых путей к повреждающим агентам.

К механическим факторам относятся физиологические и патологические процессы, обеспечивающие удаление патогенных микроорганизмов, кашель, повышенное слизеотделение, чихание, рвота, потоотделение и др. Физическими фактором саногенеза, мобилизующим защитные реакции организма, является повышение температуры тела, наблюдаемое при многих заболеваниях.

Особое место среди неспецифических факторов защиты принадлежит фагоцитозу. К гуморальным неспецифическим факторам защиты относятся естественные антитела, комплемент, лизоцим, пропердин, бета-лизины, лейкины, интерферон, ингибиторы вирусов и другие вещества, постоянно присутствующие в сыворотке крови, секретах слизистых оболочек и тканях организма.

Значительную роль в обеспечении неспецифической резистентности организма играют также гормоны коры надпочечников (глюко- и минералокортикоиды).

99.Органы иммунной системы: центральной и периферической.
Лимфоидные клетки, с которыми связаны все иммунные механизмы, появляются, созревают и функционируют в определенных органах. Органы иммунной системы разделяют на два типа: первичные (центральные) и вторичные (периферические). В центральных органах созревание лимфоцитов происходит без влияния антигенов. К ним относится вилочковая железа (тимус, зобная железа) и сумка Фабрициуса - у животных; у человека роль сумки Фабрициуса выполняет костный мозг, который поставляет стволовые клетки - предшественники лимфоцитов. Оба центральных органа иммунной системы являются местами дифференцировки определенных популяций лимфоцитов.

Периферическими лимфоидными органами следует считать: селезенку, лимфатические узлы, миндалины. Периферические органы иммунной системы заселяются Т- и В-лимфоцитами из центральных органов, при этом каждая популяция лимфоцитов мигрирует в определенную область периферических органов, которые называются тимусзависимыми и тимуснезависимыми зонами.

Вилочковая железа (тимус, зобная железа) развивается из третьего и четвертого глоточных карманов. У человека органопоэз вилочковой железы заканчивается уже в период внутриутробного развития, после 20-й недели внутриутробного развития она окончательно формируется как орган. Вилочковая железа состоит из множества мелких долек, в каждой из которых можно различить корковый и мозговой слои. Практически все лимфоциты находятся в корковом слое, густо заполняя его. Оба слоя пронизаны кровеносными сосудами. Лимфоциты в корковом слое имеют разные размеры. Большие лимфоциты находятся во внешней зоне коры, куда приходят и стволовые клетки, здесь происходит процесс пролиферации, о чем свидетельствует высокая митотическая активность клеток в этой зоне.

В мозговом слое содержится небольшое количество лимфоцитов, преимущественно это зрелые тимусзависимые лимфоциты, они должны покинуть вилочковую железу и включиться в циркуляцию. В вилочковой железе существует барьер между циркулирующей кровью и корковым слоем, вследствие этого в контакт с антигеном вступают только клетки мозгового слоя.
Возрастная инволюция железы начинается в период полового созревания. Атрофия этого органа начинается с корковой зоны с зарастания паренхимы жировой тканью, хотя активность в паренхимальных островках сохраняется до глубокой старости.

Костный мозг не является непосредственным лимфоидным органом иммунной системы, но его следует рассматривать как орган иммунной системы. В костном мозге протекают специфические иммунные реакции, например, реакции, связанные с синтезом антител (иммуноглобулинов). Гемопоэз у человека начинается на 10-й неделе внутриутробного развития, примерно через 4,5 месяца достигается его максимальная активность; гемопоэз в костном мозге охватывает все типы клеток, циркулирующие в крови. Наряду с уже сформировавшимися клетками в костном мозге можно встретить клетки-предшественники эритроцитов, гранулоцитов, моноцитов, лимфоцитов.

Селезенка играет важную роль и как фильтрующий орган, она улавливает циркулирующие в крови частицы и обломки клеток. Заселение ее лимфоцитами происходит в позднем эмбриональном периоде и после рождения ребенка. Лимфоциты являются предшественниками белой пульпы селезенки с характерным расположением лимфоидных клеток и артериальных сосудов. Красная пульпа селезенки состоит из венозных сосудов и синусов, здесь находится большое количество клеточных элементов - макрофагов, лимфоцитов, эритроцитов, гранулоцитов, состав которых зависит от функционального состояния селезенки.
Иммунные реакции, происходящие в организме, приводят к существенным морфологическим изменениям в селезенке. Изменения происходят как в тимусзависимой зоне (образование лимфобластов), так и в тимуснезависимой зоне (образование плазматических клеток, пролиферация лимфоцитов).

Лимфатические узлы расположены вдоль лимфатических протоков шарообразной и/или почковидной формы. Состоят из паренхимы, содержащей лимфоциты. Лимфатические узлы связаны как с лимфатическими протоками, так и системой кровообращения. Паренхима лимфатических узлов состоит из большого количества клеток: лимфоцитов, плазматических клеток, макрофагов. Также в лимфатическом узле различают корковый и мозговой слои. В паренхиме мозгового слоя находятся различные типы клеток (макрофаги, лимфоциты, плазматические клетки), мигрирующие в лимфатические сосуды.
Тимусзависимой зоной лимфатического узла является паракортикальная зона. Пролиферация Т-клеток продолжается несколько дней, при этом объем паракортикальной зоны увеличивается, мозговой слой сжимается, антиген быстро накапливается на ретикулярных клетках лимфоидного фолликула и индуцирует пролиферацию в зародышевых центрах. Через несколько дней начинается миграция плазматических клеток из корковой зоны в мозговую

100. Иммуноком-петентные клетки и их основные функции.
Иммунокомпетентные клетки - клетки, способные специфически распознавать антиген и отвечать на него иммунной реакцией. Такими клетками являются Т- и В-лимфоциты (тимусзависимые и костномозговые лимфоциты), которые под влиянием чужеродных агентов дифференцируются в сенсибилизированный лимфоцит и плазматическую клетку.Т-лимфоциты – это сложная по составу группа клеток, которая происходит от полипотентной стволовой клетки костного мозга, а созревает и дифференцируется в тимусе из предшественников. Т-лимфоциты разделяются на две субпопуляции: иммунорегуляторы и эффекторы. Задачу регуляции иммунного ответа выполняют Т-хелперы. Эффекторную функцияю осуществляют Т-киллеры и естественные киллеры. В орагнизме Т-лимфоциты обеспечивают клеточные формы иммунного ответа, определяют силу и продолжительность иммунной реакции.B-лимфоциты – преимущественно эффекторные иммунокомпетентные клетки. Зрелые В-лимфоциты и их потомки – плазматические клетки являются антителопродуцентами. Их основными продуктами являются иммуноглобулины. В-лимфоциты участвуют в формировании гуморального иммунитета, В-клеточной иммунологической памяти и гиперчувствительности немедленного типа.

Макрофаги - клетки соединительной ткани, способные к активному захвату и перевариванию бактерий, остатков клеток и других чужеродных для организма частиц. Основная функция макрофагов сводится к борьбе с теми бактериями, вирусами и простейшими, которые могут существовать внутри клетки-хозяина, при помощи мощных бактерицидных механизмов. Роль макрофагов в иммунитете исключительно важна - они обеспечивают фагоцитоз, переработку и представление антигена T-клеткам.

Кооперация иммунокомпетентных клеток. Иммунная реакция организма может иметь различный характер, но всегда начинается с захвата антигена макрофагами крови и тканей или же со связывания со стромой лимфоидных органов. Нередко антиген адсорбируется также на клетках паренхиматозных органов. В макрофагах он может полностью разрушаться, но чаше подвергается лишь частичной деградации. В частности, большинство антигенов в лизосомах фагоцитов в печение часа подвергается ограниченной денатурации и протеолизу. Оставшиеся от них пептиды (как правило, два-три остатка аминокислот) комплексируются с экспрессированными на внешней мембране макрофагов молекулами МНС. Макрофаги и все другие вспомогательные клетки, несущие на внешней мембране антигены, называются антигенпрезентирующими, именно благодаря им Т- и В-лимфоциты, выполняя функцию презентации, позволяют быстро распознавать антиген.


101.Понятие о межклеточных кооперациях в иммуногенезе между макрофагами, Т- и В-лимфоцитами. Медиаторы иммунного ответа.
Клеточная кооперация заключается в распозновании "своих и чужих" клеток. Итак, в осуществлении иммунной защиты участвует три вида клеток: фагоциты, Т - и B-лимфоциты. Деятельность этих клеток направлена на распознавание и уничтожение генетически чужеродных веществ, регуляцию функционирования компонентов иммунной системы и поддержание гомеостаза. Такая работа осуществляется в постоянном взаимодействии всех типов иммунокомпетентных клеток, т. е. в условиях межклеточной кооперации. Связующим звеном между клетками иммунной системы служат рецепторы, иммуноцитокины и другие медиаторы.
При появлении в организме антигена в молекулярной форме антиген захватывается фагоцитом, переваривается; его фрагмент в составе антигена гистосовместимости, представляется Т-хелперу для определения «свойчужой». При контакте с чужеродным веществом фагоцит активируется и начинает вырабатывать иммуноцитокины. Т-хелпер, привлеченный реакцией фагоцита, прикрепляется к нему, распознает при помощи особого рецептора чужеродное вещество в составе антигена гистосовместимости. Оказавшийся рядом B-лимфоцит, специфичный к данному антигену, связывается с ним при помощи соответствующего рецептора.

Сигнал, полученный от антигенсвязывающего рецептора, и стимуляция интерлейкинами «включают» в B-лимфоцитах пролиферативные и дифференцировочные процессы. Клетка созревает, размножается и дифференцируется, в результате чего образуется клон высокоактивных лимфоцитов, синтезирующих антитела, специфичные к данному антигену.
102.Антигены. Понятие об антигене, гаптене.(Антигенность, иммуногенность, специфичность.
Антиген (англ. antigen от antibody - generating  «производитель антител»)  это любая молекула, которая специфично связывается с антителом. По отношению к организму антигены могут быть как внешнего, так и внутреннего происхождения. Хотя все антигены могут связываться с антителами, не все они могут вызвать массовую продукцию этих антител организмом, то есть иммунный ответ. Антиген, способный вызывать иммунный ответ организма, называют иммуногеном.
Простые вещества, даже металлы, также могут вызывать продукцию специфичных антител, если они находятся в комплексе с белком-носителем. Такие вещества называют гаптенами.
СВОЙСИТВА АНТИГЕНОВ
Специфичность. Антигенная специфичность представляет собой уникальное биологическое явление, которое лежит в основе иммунологических взаимодействий в организме, а также лабораторных методов определения разных антигенов, серодиагностики, методов специфической профилактики и терапии инфекционных заболеваний. Структура, обладающая индивидуальной антигенной специфичностью, называется антигенным детерминантом, или эпитопом. Последнее название отражает то, что антигенной активностью обладают только структуры лежащие на поверхности молекулы, а глубокие проявляют антигенность лишь при изменении конформации или разрушении молекулы. Разнообразие белковых эпитопов достигается за счет мозаики аминокислотных остатков, расположенных на глобулярной поверхности молекулы белка. Эпитопы, определяющие антигенность белковой молекулы, состоят из 625 аминокислот и располагаются в разных частях молекулы, разделяясь неантигенными структурами.
Иммуногенность и толерогенность - альтернативные свойства каждого антигенного субстрата. Для индукции иммунного ответа и толерантности необходимо воздействие антигена на лимфоцит, обладающий рецепторами для данного антигена - антигенреактивную клетку (АРК). Отличия состоят в том, что при индукции позитивной иммунной реакции АРК получают стимулы от цитокинов, обеспечивающие их пролиферацию и формирование клона эффекторных клеток. При индукции иммунологической толерантности АРК не подвергается дальнейшей стимуляции и либо погибает, либо лишается рецепторов к антигену. Формирование иммунологической толерантности Т и В-лимфоцитов к собственным антигенам, как уже отмечалось, происходит в организме постоянно и созревающие лимфоциты, обладающие рецепторами к аутоантигенам, гибнут в результате контакта с ними в тимусе или в костном мозге. Чужеродные антигены в иммунологически полноценном организме встречают преимущественные условия для иммуногенного действия и лишь в особых ситуациях проявляют толерогенные свойства.
Антигенность молекулы определяется ее способностью вызывать иммунный ответ в конкретном организме. Иммуногенность это способность антигена сформировать иммунитет (иммунологическую память). Эти определения сложно разграничить, однако антигенность подразумевает способность молекул быть распознанными рецепторами иммунокомпетентных клеток индивидуально, т.е. это свойство определяет специфичность иммунного ответа.



103.Химическая природа антигенов и их детерминантных групп. Видовая, групповая, типовая, органоспецифичность, гетерогенные антигены. Антигены гистосовместимости. Аутоантигены.)
Антигены, как правило, являются белками или полисахаридами и представляют собой части бактериальных клеток, вирусов и других микроорганизмов. Липиды и нуклеиновые кислоты, как правило, проявляют иммуногенные свойства только в комплексе с белками. Простые вещества, даже металлы, также могут вызывать продукцию специфичных антител, если они находятся в комплексе к белком-носителем. Такие вещества называют гаптенами. К антигенам немикробного происхождения относятся пыльца, яичный белок и белки трансплантатов тканей и органов, а также поверхностные белки клеток крови при гемотрансфузии.
Молекула гистосовместимости 1-го класса является гликопротеином. Она состоит из трех частей: а) трансмембранного белка (тяжелой цепи), который пронизывает плазмолемму клетки и имеет внутриклеточную, цитоплазматическую и внеклеточную части (домены); б) белка малой молекулярной массы (эпитопа), расположенного между петлями внеклеточной части трансмембранного белка; в) периферического белка. Гены, кодирующие молекулярную организацию трансмембранного белка, расположены на 6-й хромосоме в области, которая получила название главный комплекс гистосовместимости (англ. МНС Major Histocompatibility Complex).
Основная биологическая роль молекулы гистосовместимости 1-го класса дать возможность Т-лимфоцитам с помощью своих Т-клеточных рецепторов распознать "свои и чужие" клетки. Информацию об этом несет разнообразный по составу и последовательности расположения аминокислот низкомолекулярный белок эпитоп. Это фрагмент, возникший из белков, присутствующих внутри клетки. Среди них могут быть: а) фрагменты собственных белков, тогда они не вызывают ответной реакции со стороны специализированных Т-лимфоцитов; б) молекулы белка, кодируемые вирусом; в) молекулы белка, кодируемые мутантным геномом раковой клетки организма. В случае появления двух последних происходит реакция клетки, несущей чужеродный эпитоп, с Т-лимфоцитом, который называется цитотоксическим.
С молекулой II-го класса могут взаимодействовать только те лимфоциты, которые имеют на своей поверхности другой специальный рецептор класса CD4. К ним относятся СD+4Т-лимфоциты, или Т-хелперы. Последние вместе с антигенп-редставляющими клетками и В-лимфоцитами отвечают за формирования иммунной реакции, которая проявляется в синтезе иммуноглобулинов, или антител, циркулирующих в крови и тканевой жидкости (гуморальный иммунитет).
АНТИГЕНЫ ГЕТЕРОГЕННЫЕ (греч. heteros другой + gennao создавать, производить; син.: гетерофильные, перекрестно реагирующие) антигены, сходные по своей специфичности для различных видов организмов.
{Аутоантиге
·ны  молекулы веществ в составе клеток, органов и тканей высших животных, которые распознаются при определённых условиях как чужеродные.
К ним относят белки, синтез которых начинается после созревания [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] (к примеру входящих в состав спермы, материнского молока)[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], макромолекулы органов, отделённых от иммунной системы гистогематическим барьером. К ним относят [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], гемато-ликворный, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].




104.Антигенная структура бактериальной клетки: О-, Vi-, К-, Н-антигены. Протективные антигены.

Антигены бактерий. По расположению в бактериальной клетке выделяют антигены:
Капсульный антиген - К Ag
Жгутиковый антиген - H Ag
Соматический антиген - O Ag
О-Аг большинства бактерий представлены термостабильным липополисахаридно-полипептидным комплексом; у грамотрицательных бактерий О-Аг представляет эндотоксин. Н-Аг представлен термолабильным белком флагеллином. К-Аг большинства бактерий имеют полисахаридную природу. По чувствительности к температуре К-Аг подразделяются на А-, В- и L-антигены. Наиболее термостабильными являются А-Аг, выдерживающие кипячение более 2 часов. В-Аг  выдерживают нагревание при температуре 60°С в течение часа, а L-Аг разрушаются при нагревании до 60°С. Для идентификации выделенных микроорганизмов в лаборатории применяют внутривидовую или внутриродовую дифференциацию микроорганизмов, основанную на различиях в антигенной структуре. При этом символически отображают антигенную структуру бактерий в виде антигенной формулы. Например, антигенную формулу одного из сероваров E. coli, вызывающую колиэнтериты у детей раннего возраста обозначают как О55:К5:Н21 (серовар, относящийся к серогруппе О55).
Антигены вирусов. В каждом вирионе любого вируса содержатся различные антигены. Одни из них являются вирусоспецифическими. В состав других антигенов входят компоненты клетки хозяина (липиды, углеводы), которые включаются в его внешнюю оболочку. По своему химическому составу они принадлежат к рибонуклеопротеидам или дезоксирибонуклеопротеидам, которые являются растворимыми соединениями и поэтому обозначаются как S-антигены    (solutio - раствор). У сложноорганизованных вирионов одни антигенные компоненты связаны с нуклеокапсидами, другие - с гликопротеидами внешней оболочки. Многие простые и сложные вирионы содержат особые поверхностные V-антигены - гемагглютинин и фермент нейраминидазу.
Протективные антигены
(защитные) - Аг микробов, индуцирующие при введении в организм развитие эффективного приобретенного иммунитета к микробу, к-рому принадлежит этот Аг. П.а. обычно располагаются на поверхности микробной клетки. Такими св-вами также обладают экзотоксины и О-Аг грам-бактерий. Изготовляемые из П.а. вакцины носят название химических или молекулярных.

105. Антигенные свойства токсинов, анатоксинов, бактериальных ферментов. Антигены вирусов. Антигенная мимикрия.
Токсины (от греческого toxikоn - яд), вещества бактериального происхождения, способные угнетать физиологические функции, что приводит кзаболеванию или гибели животных ичеловека. По химической природе все токсины - белки или полипептиды. Вотличие от других органических инеорганических ядовитых веществ, токсины при попадании ворганизм вызывают образование антител.

Анатоксины - фильтраты бульонных культур токсигенных микроорганизмов, утратившие благодаря специальной обработке токсичность, но сохранившие взначительной степени антигенные ииммуногенные свойства исходных токсинов. При введении ворганизм человека или животных анатоксины вызывают образование антитоксического иммунитета, это свойство ипозволяет применять их для профилактики тех инфекционных заболеваний, воснове которых лежит действие экзотоксинов, выделяемых возбудителями, атакже для гипериммунизации животных - продуцентов антитоксических сывороток.
Антигенная мимикрия (от англ. mimicry подобный), т.е. сходство антигенных детерминант у микроба и организма хозяина, в результате чего микроб не распознается иммунной системой как чужеродный, что способствует его сохранению (пер-систенции) в организме.
106.Антитела (иммуноглобулины). Химическая структура и функции.Свойства.
Антитела (иммуноглобулины, ИГ, Ig)  это особый класс [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], присутствующих на поверхности [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] в виде [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и в [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и тканевой жидкости в виде растворимых молекул. Они являются важнейшим фактором специфического [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. Антитела используются иммунной системой для идентификации и нейтрализации чужеродных объектов  например, бактерий и вирусов. Антитела выполняют две функции: [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]-связывающую и эффекторную (вызывают тот или иной [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], например, запускают классическую схему активации [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]).
Антитела синтезируются [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], которыми становятся [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] в ответ на присутствие антигенов. Для каждого антигена формируются соответствующие ему специализировавшиеся плазматические клетки, вырабатывающие специфичные для этого антигена антитела. Антитела распознают антигены, связываясь с определённым [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] характерным фрагментом поверхности или линейной аминокислотной цепи антигена.
Антитела состоят из двух лёгких цепей и двух тяжелых цепей. У млекопитающих выделяют пять классов антител (иммуноглобулинов)  IgG, IgA, IgM, IgD, IgE, различающихся между собой по строению и аминокислотному составу тяжёлых цепей и по выполняемым эффекторным функциям.
Антитела являются относительно крупными (~150 к[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]  IgG) [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], имеющими сложное строение. Состоят из двух идентичных [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] (H-цепи, в свою очередь состоящие из VH, CH1, шарнира, CH2 и CH3 доменов) и из двух идентичных [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] (L-цепей, состоящих из VL и CL доменов). К тяжелым цепям ковалентно присоединены олигосахариды. При помощи протеазы [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] антитела можно расщепить на два [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] fragment antigen binding  антиген-связывающий фрагмент) и один [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] fragment crystallizable  фрагмент, способный к кристаллизации).
Иммуноглобулины всех изотипов бифункциональны. Это означает, что иммуноглобулин любого типа
распознает и связывает антиген, а затем
усиливает киллинг и/или удаление иммунных комплексов, сформированных в результате активации эффекторных механизмов.
Одна область молекулы антител (Fab) определяет ее антигенную специфичность, а другая (Fc) осуществляет эффекторные функции: связывание с рецепторами, которые экспрессированы на клетках организма (например, фагоцитах); связывание с первым компонентом (C1q) системы комплемента для инициации классического пути каскада комплемента.


107.Классы иммуноглобулинов, их основные характеристики.
IgG является основным иммуноглобулином [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] здорового человека (составляет 70-75 % всей фракции иммуноглобулинов), наиболее активен во вторичном [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и антитоксическом иммунитете. Благодаря малым размерам ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] 7S, молекулярная масса 146 кДа) является единственной фракцией иммуноглобулинов, способной к транспорту через плацентарный барьер и тем самым обеспечивающей иммунитет плода и новорожденного. В составе IgG 2-3 % [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]; два антигенсвязывающих Fab-фрагмента и один FC-фрагмент. Fab-фрагмент (50-52 кДа) состоит из целой L-цепи и N-концевой половины H-цепи, соединённых между собой [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], тогда как FC-фрагмент (48 кДа) образован C-концевыми половинами H-цепей. Всего в молекуле IgG 12 доменов (участки, сформированные из [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] полипептидных цепей Ig в виде неупорядоченных образований, связанных между собой дисульфидными мостиками аминокислотных остатков внутри каждой цепи): по 4 на тяжёлых и по 2 на лёгких цепях.
IgM представляют собой пентамер основной четырехцепочечной единицы, содержащей две
·-цепи. При этом каждый пентамер содержит одну копию полипептида с J-цепью (20 кДа), который синтезируется антителообразующей клеткой и ковалентно связывается между двумя соседними FC-фрагментами иммуноглобулина. Появляются при первичном иммунном ответе B-лимфоцитами на неизвестный антиген, составляют до 10 % фракции иммуноглобулинов. Являются наиболее крупными иммуноглобулинами (970 кДа). Содержат 10-12 % углеводов. Образование IgM происходит ещё в пре-B-лимфоцитах, в которых первично синтезируются из
·-цепи; синтез лёгких цепей в пре-B-клетках обеспечивает их связывание с
·-цепями, в результате образуются функционально активные IgM, которые встраиваются в поверхностные структуры плазматической мембраны, выполняя роль антиген распознающего рецептора; с этого момента клетки пре-B-лимфоцитов становятся зрелыми и способны участвовать в иммунном ответе.
IgA сывороточный IgA составляет 15-20 % всей фракции иммуноглобулинов, при этом 80 % молекул IgA представлено в мономерной форме у человека. Секреторный IgA представлен в димерной форме в комплексе [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], содержится в серозно-слизистых секретах (например в [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], слезах, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], отделяемом слизистой оболочки мочеполовой и респираторной системы). Содержит 10-12 % углеводов, молекулярная масса 500 кДа.
IgD составляет менее одного процента фракции иммуноглобулинов плазмы, содержится в основном на мембране некоторых В-лимфоцитов. Функции до конца не выяснены, предположительно является антигенным рецептором с высоким содержанием связанных с белком углеводов для В-лимфоцитов, еще не [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. Молекулярная масса 175 кДа.
IgE в свободном виде в плазме почти отсутствует. Способен осуществлять защитную функцию в организме от действия паразитарных инфекций, обуславливает многие [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] реакции. Механизм действия IgE проявляется через связывание с высоким сродством (10
·10М) с поверхностными структурами базофилов и тучных клеток, с последующим присоединением к ним антигена, вызывая дегрануляцию и выброс в кровь высоко активных аминов ([ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]  медиаторов воспаления). 200 кДа.

108.Динамика антителообразования. Первичный и вторичный иммунный ответ. Иммунологическая память.
Способность к образованию антител появляется во внутриутробном периоде у 20-недельного эмбриона; после рождения начинается собственная продукция иммуноглобулинов, которая увеличивается до наступления зрелого возраста и несколько снижается к старости. Динамика образования антител имеет различный характер в зависимости от силы антигенного воздействия (дозы антигена), частоты воздействия антигена, состояния организма и его иммунной системы. При первичном и повторном введении антигена динамика антителообразования также различна и протекает в несколько стадий. Выделяют латентную, логарифмическую, стационарную фазу и фазу снижения.
В латентной фазе происходят переработка и представление антигена иммунокомпетентным клеткам, размножение клона клеток, специализированного на выработку антител к данному антигену, начинается синтез антител. В этот период антитела в крови не обнаруживаются.
Во время логарифмической фазы синтезированные антитела высвобождаются из плазмоцитов и поступают в лимфу и кровь.
В стационарной фазе количество антител достигает максимума и стабилизируется, затем наступает фаза снижения уровня антител. При первичном введении антигена (первичный иммунный ответ) латентная фаза составляет 35 сут, логарифмическая 7 15 сут, стационарная 1530 сут и фаза снижения 16 мес и более.
В отличие от первичного иммунного ответа при вторичном введении антигена (вторичный  иммунный ответ) латентный период укорочен до нескольких часов или 12 сут, логарифмическая фаза характеризуется быстрым нарастанием и значительно более высоким уровнем антител, который в последующих фазах длительно удерживается и медленно, иногда в течение нескольких лет, снижается.
Такое различие динамики антителообразования при первичном и вторичном иммунном ответе объясняется тем, что после первичного введения антигена в иммунной системе формируется клон лимфоцитов, несущих иммунологическую память о данном антигене. После повторной встречи с этим же антигеном клон лимфоцитов с иммунологической памятью быстро размножается и интенсивно включает процесс антителогенеза.
Очень быстрое и энергичное антителообразование при повторной встрече с антигеном используется в практических целях при необходимости получения высоких титров антител при производстве диагностических и лечебных сывороток от иммунизированных животных, а также для экстренного создания иммунитета при вакцинации.
ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ПАМЯТЬ
способность иммунной системы организма после первого взаимодействия с антигеном специфически отвечать на его повторное введение. Наряду со специфичностью, И. п. важнейшее свойство иммунного ответа. Позитивная И. п. проявляется как ускоренный и усиленный специфич. ответ на повторное введение антигена.
Негативная И. п. это естеств. и приобретённая иммунологич. толерантность, проявляющаяся ослабленным ответом или его полным отсутствием как на первое, так и на повторное введение антигена. Нарушение негативной И. п. к собств. антигенам организма является патогенетич. механизмом нек-рых аутоиммунных заболеваний.


109.Роль секреторных иммуноглобулинов и других факторов в формировании местного иммунитета.
секреторный IgA является продуктом кооперации двух типов клеток плазматических и эпителиальных.


Секреторный IgA образуется не только в димерной, но и в тетрамерной форме, что усиливает его вируснейтрализующую способность. Секреторный компонент предохраняет IgA от расщепления протеолитическими ферментами, что обусловливает его значительные преимущества перед антителами других классов. Секреторный IgA нейтрализует вирус не только в просвете кишечника, но и при транспортировке его внутрь клетки. Димер IgA может нейтрализовать вирус в подслизистой оболочке кишечника, а затем, связавшись с рецептором, транспортировать его в просвет кишечника.

110.Иммунологическая толерантность. Формы иммунологической толерантности, иммунологический паралич. Понятие о трансплантационном иммунитете.
Иммунологической толерантностью (Burnet, 1959; Meda-war, 1961, и др.) в настоящее время называют состояние неспособности организма животного к иммунологическому ответу. Это понятие охватывает большой круг явлений, различных как по внешним признакам, так и по условиям воспроизведения. Различны и вероятные механизмы их возникновения.
Классическим примером специфической приобретенной иммунологической толерантности является потеря способности тканей взрослой мыши одной какой-либо чистой линии (например, А) отторгать трансплантат кожи мыши другой чистой линии (например, Т6), если мышь-реципиент (линия А) в эмбриональным или неонатальный период жизни получала клетки селезенки взрослой мыши-донора (линии Т6). Это состояние называют еще трансплантационным иммунитетом и объясняют как следствие введения в организм плода или новорожденного животного с клетками селезенки так называемых трансплантационных аптигенов. Последние блокируют клеточную реакцию, вызывающую отторжение трансплантата. Организм теряет способность распознавать трансплантат как чужеродный; наступает приживление гомотрансплантата. В основе данного вида иммунологической толерантности лежит процесс изменения клеточной реактивности (клеточная форма иммунологической толерантности).
Паралич иммунологический  форма иммунологической недостаточности, характеризующаяся полным отсутствием иммунного ответа.
111.Понятие об аллергенах. Гиперчувствительность немедленного типа (ГНТ) ( Сенсибилизация, разрешение, десенсибилизация. Лекарственная анафилаксия. Цитотоксический и иммуннокомплексный типы ГНТ. Механизм развития.)
Аллергены это [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], вызывающие у чувствительных к ним людей [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ].
В зависимости от происхождения аллергены можно разделить на несколько групп:
бытовые домашняя и бытовая [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и его раствор в воде, продукты [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ];
эпидермальные шерсть, пух, перо, перхоть, экскременты, слюна домашних животных (кошек, собак, морских свинок, хомяков, птиц, кроликов, лошадей, овец и др.), [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] человека;
инсектные синантропные микроклещи, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], жалящие и кровососущие насекомые, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ];
пыльцевые [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] различных растений, чаще злаковых, сорных трав, деревьев;
пищевые потенциально любой пищевой продукт может быть аллергеном. Высокая степень аллергизирующей активности у [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и морепродуктов, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ];
лекарственные аллергенами могут быть любые лекарственные препараты, включая и [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ];
грибковые основной компонент домашней пыли, чаще речь идет о плесневых и дрожжевых грибках;
гельминтные антигены аскарид, остриц власоглава и других гельминтов.
Кроме того, аллергенами в переносном смысле называют причины возникновения аллергии:
термические ветер, мороз, незначительный холод и любые его проявления;
морально-биологические нервный срыв, переживание, страх, волнение.
Гиперчувствительность немедленного типа  (ГНТ) повышенная чувствительность организма к аллергенам, обусловленная антителами и медиаторами. Характеризуется быстрым развитием после разрешающего введения аллергена и способностью передаваться пассивно, с сывороткой. Иммунный ответ на аллергены, которыми при ГНТ могут быть пыльца, эпидермальные, пищевые, лекарственные, микробные вещества, приводит к образованию антител классов иммуноглобулина Е или иммуноглобулина С и связанному с этим переходу от нормальной реактивности организма к повышенной (сенсибилизация).
Стадия сенсибилизации (рис. 2).
Аллергены поступают в организм через респираторный, желудочно-кишечный тракт и кожу. Антигенпрезентирующие клетки захватывают, перерабатывают и представляют доминантные эпитопы наивным Т-клет-кам (Th0). У лиц с атопией при этом происходит их дифференцировка.
Стадия разрешения развивается вследствие повторного поступления аллергена в организм и активации клеток-эффекторов ГНТ и подразделяется на три фазы (рис. 4):
1. Во время иммунологической фазы циркулирующий аллерген связывается локально или системно со специфическими IgE-антителами, фиксированными на мембране базофилов, тучных клеток. Важным моментом является одновременное связывание молекулой поливалентного аллергена нескольких IgE-антител, фиксированных на рецепторах. Это приводит к сближению нескольких рецепторов и формированию
Lyn, Syk тирозиновые киназы, ассоциированные с бета- и гамма-цепями рецептора для IgE; PKC протеинкиназа С; PLA, C фосфолипаза А, С; МАР митогенассоциированная киназа; NFkB, NFAT, AP-1 транскрипционные факторы, необходимые для активации генов цитокинов
2. Патохимическая фаза. В течение нескольких минут происходит дегрануляция эффекторных клеток (тучные клетки, базофилы и др.), в результате чего содержимое цитоплазматических гранул (серотонин, гистамин, гепарин, хондроитинсульфат, триптаза, химаза, пероксидаза и др.) высвобождается в межклеточное пространство и кровь (в цитоплазме эффекторных клеток содержится 100–300 специфических гранул).





3. Патофизиологическая фаза:
Ранняя фаза. Высвобождающиеся из клеток биологически активные медиаторы немедленной фазы связываются с рецепторами клеток-мише-ней: эндотелия, гладких мышц сосудов, бронхов, кишечника, лейкоцитов, тромбоцитов, клеток НС и активируют их. При этом происходит развитие сосудистой (расширение сосудов, замедление кровотока, выход плазмы и крупномолекулярных белков в ткани с формированием отека) и клеточной (инфильтрация тканей лейкоцитами (нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы)) фаз воспаления. Кроме этого, в зависимости от локализации процесса, может развиваться бронхоспазм, диарея, ринорея, и др. специфические симптомы.
Поздняя фаза. Активированные резидентные клетки (тучные клетки, тканевые макрофаги, фибробласты, гистиоциты) и клетки инфильтрата (эозинофилы, лимфоциты) синтезируют и секретируют медиаторы поздней фазы иммунного воспаления ГНТ (лейкотриены, простагландины, цитокины, ферменты), что приводит к развитию персистирующего отека, инфильтрации, повреждению и ремоделированию тканей. Клинически это проявляется длительным нарушением дыхания (нарушением проходимости бронхов и ВДП), склерозированием, фиброзом.
Стадия десенсибилизации. Несмотря на теоретические и практические сложности с «возвратом к нормальной реактивности», существуют весьма полезные подходы к практическому применению методов, формирующих псевдонормальную реактивность. В частности, кажущееся восстановление нормальной реактивности возможно как истощение запаса медиаторов в тучных клетках и базофилах шокового органа.
112.Гиперчувствительность замедленного типа. Механизм развития. Инфекционная аллергия при туберкулезе, лепре, бруцеллезе и других инфекциях. Контактная аллергия.
Гиперчувствительность замедленного типа (ГЧЗТ). Аллергические реакции замедленного или туберкулинового типа характеризуются тем, что в отличие от реакций немедленного типа ответ сенсибилизированного животного на антиген возникает не сразу, а спустя не менее 24ч после контакта с аллергеном.
Признаки ГЧЗТ описал Кох (Koch) в начале XIX столетия. Он обнаружил, что кожа больных туберкулезом животных и людей очень чувствительна к туберкулину продукту микобактерий. Этот тип реакции протекает с преимущественным участием сенсибилизированных лимфоцитов, поэтому его рассматривают как патологию клеточного иммунитета. Замедление реакции на антиген объясняется необходимостью более продолжительного времени для скопления лимфоцитарных клеток (Т- и В-лимфоциты разных популяций, макрофаги, базофилы, тучные клетки) в зоне действия чужеродного вещества по сравнению с гуморальной реакцией антиген + антитело при гиперчувствительности немедленного типа.
Иммунологическая стадия характерна тем, что с чужеродными антигенами взаимодействуют Т-лимфоциты. Антигенами могут быть различного рода паразиты, бактерии (стрептококки, туберкулезная палочка, пневмококки), грибы, чужеродные белки (вакцины), лекарственные препараты, особенно антибиотики, гаптены, соединяющиеся в организме с белками. Первичный контакт аллергена с Т-лимфоцитом сопровождается его сенсибилизацией. Повторное попадание того же аллергена приводит к взаимодействию специфических рецепторов, расположенных на поверхности сенсибилизированной Т-клетки с чужеродными белками. Таким рецептором является встроенный в мембрану Т-лимфоцита IgM. Специфическое узнавание антигена активирует эти клетки и они начинают синтезировать антигенспецифические и неспецифические факторы и лимфокины.
В патохимической стадии стимулированные Т-лимфоциты синтезируют большое количество лимфокинов медиаторов ГЧЗТ. Они, в свою очередь, вовлекают в ответную реакцию на чужеродный антиген клетки других типов, таких, как моноциты/макрофаги, нейтрофилы.
В патофизиологическую стадию биологически активные вещества, выделенные поврежденными или стимулированными клетками, определяют дальнейшее развитие аллергических реакций замедленного типа.
Местные тканевые изменения при реакциях замедленного типа могут быть выявлены уже спустя 23 ч после воздействия разрешающей дозы антигена. Они проявляются начальным развитием гранулоцитарной реакции на раздражение, затем сюда мигрируют лимфоциты, моноциты и макрофаги, скапливающиеся вокруг сосудов. Наряду с миграцией имеет место и пролиферация клеток в очаге аллергической реакции. Однако наиболее выраженные изменения наблюдают спустя 2448 ч. Эти изменения характеризуются гиперергическим воспалением с ярко выраженными признаками.
Замедленные аллергические реакции индуцируются в основном тимусзависимыми антигенами очищенными и неочищенными белками, компонентами микробной клетки и экзотоксинами, антигенами вирусов, низкомолекулярными гаптенами, конъюгированными с протеинами.
туберкулиновая реакция классического типа, возникающая при воздействии антигенов паразитарного, бактериального или вирусного происхождения на сенсибилизированный организм. Реакция широко используется для аллергологической диагностики туберкулеза у людей и животных, сапа, бруцеллеза, сибирской язвы, токсоплазмоза, многих паразитарных (гастрофилезы) и других болезней. Так, для выявления сапа у лошадей прибегают к аллергической пробе маллеинизации. Аппликация полученного из возбудителей болезни очищенного препарата маллеина на слизистую оболочку глаза зараженных животных спустя 24 ч сопровождается развитием острого гиперергического конъюнктивита. При этом наблюдают обильное истечение из угла глаза серовато-гнойного экссудата, артериальную гиперемию, отечность век. Аналогичную реакцию наблюдают при глазной туберкулинизации аппликации туберкулина на конъюнктиву коровам, носителям возбудителя туберкулеза;
контактная аллергическая реакция возникает в местах непосредственного взаимодействия аллергена с поверхностью кожи, слизистых и серозных оболочек. Клеточный инфильтрат локализуется в эпидермисе в основном за счет мононуклеарных клеток. Реакция проявляется контактным аллергическим дерматитом, фотодерматозами. Для развития фотоаллергических реакций необходимы два условия: попадание в организм любым путем (орально, перорально, ингаляционно, через кожу) фотосенсибилизатора, образование фоточувствительных субстанций в самом организме животного и его последующее облучение ультрафиолетовыми лучами. Сенсибилизацию кожи могут вызывать некоторые антисептики, диуретики, антибиотики, эозин, хлорофилл, флюоресцин и др. Антигенами могут быть и эндогенные тканевые субстанции, образующиеся при солнечном облучении.


113.Аллергодиагностика инфекционных болезней.
В зависимости от ведущего механизма развития,  выделяют 4 основные типа аллергических (иммунопатологических) реакций: -1 тип– немедленные реакции (атопические), опосредованные специфическими IgE-антителами, образующимися при иммунном ответе на соответствующие аллергены -2 тип– цитотоксический, опосредованный антителами классов М и G  -3 тип– иммуннокомплексный -4 тип– клеточно-опосредованный с участием сенсибилизированных Т-лимфоцитов
Основными преимуществами методов специфической лабораторной  диагностики  являются: -безопасность для пациента -одномоментное исследование широкого спектра аллергенов -проведение исследования в период обострения заболевания и на фоне противоаллергической терапии
Лабораторная  аллергодиагностика является предпочтительной в следующих случаях: -ранний детский возраст -непрерывно рецидивирующее течение заболевания без периодов ремиссии или период обострения болезни -невозможность отмены антигистаминных препаратов, кетотифена и пр. (исключение составляют системные глюкокортикостероиды, при лечении которыми возможны ложноотрицательные результаты лабораторного обследования) -резко измененная реактивность кожи  -уртикарный дермографизм
Определение уровня общего IgE  IgE участвует в аллергических реакциях немедленного типа и противогельминтом иммунитете. Преимущественно находится в связанном с рецепторами виде в тканях. В сыворотке присутствует в минимальных количествах. Высокие значения общего IgE в сыворотке крови выявляются при различных аллергических заболеваниях, глистных инвазиях, аутоиммунной патологии, гипер- IgE-синдроме, ряде вирусных инфекций. У 20% больных с аллергическими заболеваниями уровень общего IgE может быть в норме.  -Материал для исследования – сыворотка крови. -Метод определения – ИФА.
Определение специфических IgE Выявление в крови пациентов  специфических IgE является основным методом определения спектра причинно-значимых аллергенов при аллергии немедленного типа. От качества определения  специфических IgE во многом зависит эффективность профилактики и лечения аллергии.
Скрининговое тестирование направленно на подтверждение  аллергического характера заболевания. Положительный результат теста при наличии характерных клинических и анамнестических данных указывает на аллергическую природу воспаления. Отрицательный результат не исключает аллергии. 



114. Понятие об аутоиммунных заболеваниях.
Иммунный ответ, направленный против антигенов нормальной человеческой ткани и органов называют «аутоиммунным». Аутоиммунный ответ является основой патогенеза большого числа аутоиммунных заболеваний (АИЗ) и аутоиммунных реакций.
аутоиммунные заболевания (АИЗ) обладают рядом четких клинических характеристик, к которым, прежде всего, относятся следующие определения:
- процессы неизвестной этиологии с хроническим системным/тканевым воспалением,
- возникают у лиц с особым набором генов иммунного ответа (генов системы HLA),
- большинство заболеваний поддаются терапии иммуносупрессивными препаратами,
- в крови и биологических жидкостях обнаруживаются аутореактивные клетки и аутоантитела.

115.Современные теории иммуногенеза. Генетический контроль иммунного ответа.
Современные теории образования антител можно разделить на две группы. Сторонники первой группы считают, что антиген, введенный в организм, непосредственно участвует в образовании антител. Это инструктивные теории. Классическим примером их является теория прямой матрицы Гауровитца Полинга. Согласно этой теории, антиген проникает в клетку и служит там своеобразной матрицей, на поверхности которой, как на штампе, происходит пространственное конфигурирование гаммаглобулинов. Под влиянием антигена происходит изменение синтеза глобулинов, касающееся не формирования полипептидной цепи, а лишь второй фазы стадии формирования молекулы, конфигурация которой меняется: концевые части образовавшейся молекулы точно соответствуют конфигурации детерминантной группы антигена. Данная теория не может правильно объяснить многие иммунологические феномены, в том числе и выработку иммуноглобулинов. Она не объясняет несоответствие между продолжительностью образования иммуноглобулинов и временем сохранения антигена в организме (антитела сохраняются годами после введения антигена, а он ограниченный срок). С позиций данной теории невозможно объяснить феномены иммунологической памяти, иммунологической толерантности, эффективность вторичного иммунного ответа.
Вторая группа селективные теории антителообразования. Теория «боковых цепей» П. Эрлих а, созданная в 1896 г. и имеющая лишь историческое значение, заслуживает внимания, так как в ней П. Эрлих впрвые высказал идею селекционирующей роли антигена. Клетка, синтезирующая антитела, не создает новых специфических структур под влиянием антигена, они в ней предсуществуют. П. Эрлих предполагал, что на поверхности клеток имеются разнообразные химические группировки рецепторы, с которыми антиген вследствие химического сродства соединяется, блокирует их функции. В ответ на это клетки вырабатывают большое количество рецепторов, избыток которых обрывается и начинает циркулировать в крови в виде специфических антител.
Клональноселекционная теория Ф. Бернета (1959) является дальнейшим этапом развития теории Иерне. Согласно этой теории, в организме предсуществуют мезенхимные клетки, которые имеют на своей поверхности реактивные участки, соответствующие одному или определенному числу детерминант антигена (имеются клетки с рецепторами ко всем существующим антигенам). Антиген, попав во внутреннюю среду, селекционирует, вступает в контакт с клетками, имеющими соответствующий рецептор. Как следствие контакта происходят размножение селекционированной клетки (образуется клон) и стимуляция синтеза иммуноглобулинов, специфических для данного антигена.
Советский иммунолог П. Ф. Здродовский в 1966 г. предложил матричногенетическую теорию образования антител и регуляции этого процесса в целостном организме исходя из следующих известных положений: 1) продуцентами антител являются клетки ретикулолимфоидной ткани; 2) биосинтез иммуноглобулиновчастный случай биосинтеза белка, регулируемого соответствующими участками ДНК в хромосомах клеток; 3) антиген, введенный в организм, вызывает растормаживание генетических детерминант, ответственных за синтез активных центров антител и контролирующих размножение клеток продуцентов иммуноглобулинов. В результате индуцируется выработка адренокортикотропного гормона (АКТГ) и других гормонов, принимающих участие в регуляции иммуногенеза.
Из современных представлений об иммунологическом процессе заслуживает внимания гипотеза, поддерживаемая видным советским иммунологом Р. В. Петровым. Установлено, что в развитии иммунного ответа организма на антиген участвуют три типа клеток: Т, Влимфоциты и макрофаги, между которыми устанавливается кооперированное взаимодействие. Антиген, попадая в организм, ассимилируется макрофагом, который его разрушает и формирует более активную, чем исходный антиген, детерминанту, выходящую на поверхность клетки. Макрофаг, имеющий такой комплекс .на поверхности, вступает в контакт (кооперирует) с Т и Влимфоцитами и передает им информацию осуществления иммуногенеза. Из Влимфоцитов возникает клон клеток, продуцирующих антитела заданной специфичности. Механизм кооперированного взаимодействия клеток иммунной системы окончательно не выяснен. Установлено, что не только контактные связи, но и выделяющиеся клетками гуморальные факторы имеют значение в иммуногенезе, что важно регулирующее влияние костного мозга, гипофизарноадреналовой системы организма.
Таким образом, поддержание иммунного гомеостаза, регуляция специфической защиты организма от чужеродных антигенов осуществляется сложно организованной иммунной системой, механизмы функционирования которой до конца еще не познаны.


116.Антибактериальный, антитоксический, противовирусный и др. формы иммунитета.
Противобактериальный иммунитет направлен как против бактерий, так и против их токсинов (антитоксический иммунитет). Бактерии и их токсины нейтрализуются антибактериальными и антитоксическими антителами Комплексы бактерия (антигены)-антитела активируют комплемент, компоненты которого присоединяются к Fc-фрагменту антитела, а затем образуют мембраноатакующий комплекс, разрушающий наружную мембрану клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Пептидогликан клеточных стенок бактерий разрушается лизоцимом.
Антитела (Fc-фрагмент) и комплемент (С3b), обволакивают бактерии и "приклеивают" их к Fc- и С3b-рецепторам фагоцитов, выполняя роль опсонинов вместе с другими белками, усиливающими фагоцитоз (С-реактивным белком, фибриногеном, маннансвязывающим лектином, сывороточным амилоидом).
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] является основным механизмом антибактериального иммунитета. Фагоциты направленно перемещаются к объекту фагоцитоза, реагируя на хемоаттрактанты вещества микробов, активированные компоненты комплемента (С5а, СЗа) и цитокины.
Противобактериальная защита слизистых оболочек обусловлена секреторными IgA, которые, взаимодействуя с бактериями, препятствуют их адгезии на эпителиоцитах.
Иммунитет антитоксический – невосприимчивость организма к инфекционным болезням, возбудители которых продуцируют экзотоксины. Иммунитет антитоксический достигается активной иммунизацией, введением в организм анатоксина, вызывающего синтез антитоксинов, антитоксических сывороток или пассивной иммунизацией.
Иммунитет противовирусный – невосприимчивость организма к определенным вирусным инфекциям, достигнутая переболеванием, активной или пассивной иммунизацией. Кроме защитных факторов, участвующих в возникновении антибактериального и противовирусного иммунитетов, важную роль  играют интерфероны.


117.Общая характеристика серологических реакций( специфичность и чувствительность, обратимость, оптимальные соотношения ингредиентов. Механизм реакции, диагностическое значение.)
Серологические реакции
Реакции между антигенами и антителами in vitro или серологические реакции широко используются в микробиологических и серологических (иммунологических) лабораториях с самыми разнообразными целями:
серодиагностики бактериальных, вирусных, реже других инфекционных заболеваний,
сероидентификации выделенных бактериальных, вирусных и других культур различных микроорганизмов
Серодиагностику проводят с помощью набора специфических антигенов, выпускаемых коммерческими фирмами. По результатам серодиагностических реакций судят о динамике накопления антител в процессе заболевания, о напряженности постинфекционного либо поствакцинального иммунитета.
Сероидентификацию микробных культур проводят для определения их вида, серовара с помощью наборов специфических антисывороток, также выпускаемых коммерческими фирмами.
Каждая серологическая реакция характеризуется специфичностью и чувствительностью. Под специфичностью понимают способность антигенов или антител реагировать только с гомологичными антителами, содержащимися в сыворотке крови, либо с гомологичными антигенами соответственно. Чем выше специфичность, тем меньше ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
В серологических реакциях участвуют антитела, принадлежащие главным образом к иммуноглобулинам классов IgG и IgM.
Реакции, протекающие с укрупнением антигена
Реакция агглютинации и ее варианты. Реакция агглютинации (agglutinacio - склеивание) внешне проявляется в склеивании и выпадении в осадок корпускулярных антигенов: бактерий, эритроцитов, а также частиц с адсорбированными на них антигенами под влиянием антител в среде с электролитом. Реакция протекает в две фазы. В первой фазе происходит специфическая адсорбция антител на поверхности клетки или частицы, несущей соответствующие антигены, во второй - образование агрегата (агглютината) и выпадение его в осадок, причем этот процесс происходит только в присутствии электролита (раствор хлорида натрия). Механизм реакции агглютинации описывается теоpией «решетки», согласно которой агглютинат образуется при соединении одного активного центра двухвалентного антитела с детерминантной группой одного антигена, а второго активного центра - с детерминантной группой другого антигена. Избыток или недостаток антител препятствует проявлению агглютинации. Для постановки реакции агглютинации используют корпускулярные антигены (суспензии бактерий, эритроцитов). Характер и скорость реакции зависят от антигенного строения. бактериальной клетки. Мелкозернистую О-агглютинацию дают бактерии, лишенные жгутиков. О-агглютинация протекает медленно. При наличии Н-антигена реакция проявляется в образовании крупно-хлопьевидного осадка и протекает значительно быстрее.
еакция непрямой, или пассивной, агглютинации (РПА). Под непрямой, или пассивной, агглютинацией понимают реакцию, в которой антитела взаимодействуют с антигенами, предварительно адсорбированными на клетках или частицах. В качестве сорбентов чаще всего применяют эритроциты различных животных, частицы целлюлозы, бентонита или латекса. В некоторых случаях пользуются обратным вариантом, т.е. адсорбируют на эритроцитах или иных частицах не антигены, а антитела.
Реакция преципитации и ее варианты. Сущность данной реакции состоит в осаждении (преципитации) антигена, находящегося в дисперсном коллоидном состоянии, воздействием специфических антител в растворе электролита. Механизмы реакций агглютинации и преципитации аналогичны и описываются теорией «решетки».
Реакция преципитации является высокочувствительным тестом, так как позволяет обнаружить малые количества антигена или гапте-на. Высокая чувствительность реакции преципитации позволяет использовать ее для выявления антигенов с помощью известных антисывороток.
Иммунодиффузия. Методы иммунодиффузии представляют собой вариант реакции преципитации, в которой взаимодействие антигена с антителами происходит не в жидкости, а в геле, что позволяет лучше выявлять и фиксировать результаты взаимодействия. В качестве геля чаще всего используется агаровый или полиакриламидный гель.
118. Иммунные диагностические сыворотки. Диагностикумы.
Сыворотки иммунные диагностические
(диагностические антисыворотки) - иммунные с-ки, содержащие Ат против одного (моновалентные, моноспецифические) или нескольких (поливалентные, полиспецифические) Аг. Получают путем иммунизации животных (кроликов и др.) известными полноценными Аг.
Диагностикум
(греч. diagn
·stikos способный распознавать, diagn
·stikon относящееся к распознаванию)
стандартный препарат, используемый в качестве антигена при серологических исследованиях.
O-диагно
·стикум бактериальный Д., содержащий O-антиген; используется для серодиагностики инфекционных заболеваний, например вызываемых сальмонеллами.
Диагно
·стикум бактериа
·льный Д., представляющий собой взвесь убитых бактерий.
Диагно
·стикум ви
·русный Д., изготовленный из культуры соответствующего вируса.
Диагно
·стикум эритроцита
·рный Д., представляющий собой взвесь формалинизированных эритроцитов, сенсибилизированных каким-либо микробным антигеном.



119.Реакция агглютинации.Цель,механизм,техника,практическое применение
В вопросе 117
120.Реакция преципитации.Цель,механизм,техника,применение
В вопросе 117
121.Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Кожные пробы для выявления антитоксического иммунитета (реакция Шика и Дика).
В основе этой реакции лежит способность специфической антитоксической сыворотки нейтрализовать экзотоксин. Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или их токсинов на чувствительные клетки и ткани, что связано с блокадой микробных антигенов антителами, т. е. их нейтрализацией. Реакцию нейтрализации (РН) проводят путем введения смеси антигенантитело животным или в чувствительные тест-объекты (культуру клеток, эмбрионы). При отсутствии у животных и тест-объектов повреждающего действия микроорганизмов или их антигенов, токсинов говорят о нейтрализующем действии иммунной сыворотки и, следовательно, о специфичности взаимодействия комплекса антигенантитело.  Для проведения реакции исследуемый материал, в котором предполагается наличие экзотоксина, смешивают с антитоксической сывороткой, выдерживают в термостате и вводят животным (морским свинкам, мышам). Контрольным животным вводят фильтрат исследуемого материала, не обработанный сывороткой. В том случае, если произойдет нейтрализация экзотоксина антитоксической сывороткой, животные опытной группы останутся живыми. Контрольные животные погибнут в результате действия экзотоксина.
Шика реакция
внутрикожная проба с дифтерийным токсином, применяемая для установления противодифтерийного иммунитета. Для постановки Ш.р. внутрь кожи ладонной поверхности предплечья туберкулиновым шприцем вводят 0,2 мл стандартного дифтерийного токсина, содержащего 1/64 ДЛМ для морской свинки. Результат учитывают через 72 - 96 ч. У людей, не имеющих Ат против токсина или имеющих их мало, на месте введения образуются краснота и инфильтрат (положительная реакция); у людей, в с-ке к-рых содержатся антитоксические Ат в концентрации 1 /30 АЕ и больше, инфильтрат не развивается или он меньше 1 см (отрицательная реакция). Результаты Ш.р. используют для оценки коллективного иммунитета и проведения профилактических прививок. В настоящее время с этой целью применяют РПГА с эритроцитарным диагностикумом.

122. Реакция иммунного лизиса: гемолиз, бактериолиз.
Гемо
·лиз (от [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]
·
·
·
· кровь +
·
·
·
·
· распад, разрушение) разрушение [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] крови с выделением в окружающую среду [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. В норме гемолиз завершает жизненный цикл эритроцитов (ок. 125 суток) и происходит в организме человека и животных непрерывно. Патологический гемолиз происходит под влиянием гемолитических [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], холода, некоторых лекарственных веществ (у чувствительных к ним людей) и других факторов; характерен для гемолитических [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. Разрушение происходит двумя путями:
Внутриклеточный
Внутрисосудистый
БАКТЕРИОЛИЗ (от [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] и ...лиз) - разрушение оболочки бактерий и выход их цитоплазмы в окружающую среду. Может быть вызван физическими и химическими агентами, бактериофагами, антителами (бактериолизинами), некоторыми ферментами, напр., лизоцимом.

123.Реакция связывания комплемента (РСК). Цель,механизм,техника,применение
РЕАКЦИЯ СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА (РСК)
высокочувствительная и специфич. серологич. реакция, применяемая для диагностики мн. инфекц. и инвазионных болезней ж-ных. Состоит из двух последоват. фаз. В первой фазе антиген смешивают с испытуемой сывороткой и комплементом (комплекс белков сыворотки крови ж-ного), рассчитанным только на одну реакцию. После выдерживания к смеси добавляют эритроциты барана и гемолизин. При наличии антител образующийся иммунный комплекс фиксирует комплемент и эритроциты не лизируются (положит, реакция). При отсутствии антител происходит их гемолиз (отрицат. реакция). Существуют разл. варианты РСК классич. метод в виде макро- и микровариантов, реакция длит, связывания комплемента (РДСК).

124.Опсоно-фагоцитарная проба. Цель,механизм,применение
Опсонофагоцитарная Реакция
метод оценки активности опсонинов сыворотки по степени эффективности фагоцитоза корпускулярного антигена, обработанного этой сывороткой.
125.Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).Цель,применение, механизм
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)  это метод, с помощью которого можно выявить антитела к известным антигенам. Метод основан на микроскопии окрашенных специальным образом мазков и других образцов тканей. Применяется в основном для обнаружения возбудителей инфекций мочеполовых путей, таких как [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ], вирус герпеса и пр.
Существует два типа реакции иммунофлюоресценции  прямая и непрямая.
Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ)  в этом случае непосредственно специфическое антитело мечено флюорохромом и реакция проходит в один этап, что значительно сокращает сроки исследования.
Непрямая иммунофлюоресценция (РНИФ)  в этом случае специфическое антитело не имеет метки, а для выявления комплекса антиген-антитело, образовавшегося на первом этапе, используют вторые меченые антитела, специфичные к конкретным антителам.
126.Иммуноферментные реакции ELISA.Цель,применение
Иммуноферментный анализ (сокращённо ИФА, [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)  лабораторный иммунологический метод качественного или количественного определения различных соединений, макромолекул, вирусов и пр., в основе которого лежит специфическая реакция [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]-[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. Выявление образовавшегося комплекса проводят с использованием фермента в качестве метки для регистрации сигнала.
Сущность и классификация
Из-за разнообразия объектов исследования  от низкомолекулярных соединений до вирусов и бактерий, и многообразия условий проведения ИФА существует большое количество вариантов этого метода.
Возможна классификация по типу иммунохимического взаимодействия на первой стадии анализа (в которой происходит связывание определяемого вещества). Если в системе присутствуют только анализируемое соединение и соответствующие ему центры связывания (антиген и специфические [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]), то метод является неконкурентным. Если же на первой стадии в системе одновременно присутствует анализируемое соединение и его аналог (меченное ферментом анализируемое соединение или анализируемое соединение, иммобилизованное на твердой фазе), конкурирующие за ограниченное количество центров специфического связывания, то метод является конкурентным.
Примером неконкурентного формата ИФА является «сэндвич»-метод. К носителю с иммобилизованными антителами добавляют раствор, содержащий анализируемый антиген. В процессе инкубации на первой стадии на твердой фазе образуется комплекс антиген-антитело. Затем носитель отмывают от несвязавшихся компонентов и добавляют меченные ферментом специфические антитела. После вторичной инкубации и удаления избытка конъюгата антител с ферментом определяют ферментативную активность носителя, которая пропорциональна начальной концентрации исследуемого антигена. На стадии выявления специфического иммунокомплекса антиген оказывается как бы зажатым между молекулами иммобилизованных и меченных антител, что послужило поводом для широкого распространения названия «сэндвич»-метод. [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] реакция (цветная реакция) проходит в присутствии перекиси водорода и субстрата, представленного неокрашенным соединением, которое в процессе пероксидазной реакции окисляется до окрашенного продукта реакции на заключительном этапе проведения исследования. Интенсивность окрашивания зависит от количества выявленных специфических антител. Результат оценивается [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ] или визуально.
127.Реакция иммобилизации подвижных бактерий (РИП). Цель,применение,механизм
Иммобилизация бактерий (immobilization of bacteria) [лат. immobilis неподвижный; греч. bacterion палочка] обездвиживание подвижных бактерий с помощью специфических иммунных сывороток или фагов. Используют, напр., в тесте ускоренного обнаружения возбудителя холеры, при серологической диагностике сифилиса.
128.Иммунный статус и методы оценки.
Иммунный статус - это совокупность количественных и функциональных показателей, отражающих состояние иммунной системы человека в данный момент времени. На сегодняшний день известно большое количество методов оценки отдельных звеньев иммунной системы. Это позволяет практикующему врачу-иммунологу выбрать наиболее адекватные из методов для конкретных диагностических и прогностических целей, для проведения иммунологического мониторинга и т.д. В этом отношении очень полезной была и остается до сих пор двухэтапная система оценки иммунного статуса человека. С помощью тестов первого уровня можно выявить грубые дефекты в клеточном и гуморальном иммунитете, а также в системе фагоцитов.
Тесты 1-ого уровня - это ориентирующие тесты. К ним относятся: - определение относительного и абсолютного числа лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови; - тесты иммунофенотипирования, а также Е- и ЕАС-розеткообразования для определения относительного и абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов; - определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов основных классов (Ig A, Ig M, Ig G); - определение фагоцитарной активности лейкоцитов.
Тесты 2-ого уровня - аналитические.
1. определение субпопуляций регуляторных Т-лимфоцитов с помощью моноклональных антител (Т-хелперы, Т-супрессоры); 2. тест торможения миграции лейкоцитов с использованием в качестве стимулятора ФГА (фитогемагглютинина); 3. оценка пролиферативной активности Т- и В-лимфоцитов на митогены, антигены, аллогенные клетки; 4. оценка активности киллерных лимфоцитов (К- и ЕК-клетки); 5. выявление циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК); 6. определение различных компонентов комплемента; 7. оценка различных этапов фагоцитоза и рецепторного аппарата фагоцитов; 8. тесты по определению медиаторов иммунной системы, в том числе продукции и рецепции интерлейкинов; 9. анализ генов, ответственных за экспрессию иммунологически значимых молекул.
129.Принципы иммунопрофилактики и иммунотерапии. Характеристика современных иммунобиологических препаратов.

130.Вакцинопрофилактика и вакцинотерапия. Аутовакцины.
ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКА
метод специфич. профилактики инфекционных болезней с помощью вакцин. В основе В. лежит создание в организме активного [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. В. не подлежат животные с низкой упитанностью, в последний период беременности, сразу после родов, с повышенной темп-рой тела, подозреваемые в заражении данным видом возбудителя. В. подразделяется на плановую и вынужденную. Плановую В. проводят с предохранительной целью, когда стадо находится под угрозой заражения. Она осуществляется в определённые сроки, с учётом неблагополучия х-в и в соответствии с планом противоэпизоотич. мероприятии, разработанных вет. органами. Вынужденную В. применяют при возникновении болезни в целях ликвидации её вспышки. В. эффективна в комплексе с др. вет. мероприятиями.
Вакцинотерапия
(от Вакцина и Терапия)
        метод лечения некоторых инфекционных болезней введением вакцин. В. основана на учении И. И. Мечникова о [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]е. Под влиянием повторных введений вакцины (через определённые промежутки времени, в определённых дозах, определённое число раз) снижается чувствительность организма к специфическому антигену (возбудителю), происходит так называемая десенсибилизация, увеличивается фагоцитоз специфического возбудителя, активизируются обменные процессы; в первичном очаге усиливается гиперемия и повышается проницаемость кровеносных сосудов. При стрептококковых, стафилококковых и некоторых др. заболеваниях для В. применяют аутовакцины. Для В. человека применяют обычно убитые вакцины, которые вводят подкожно, внутримышечно, внутрикожно или внутривенно (иногда методы введения комбинируют). Введение вакцины часто сопровождается общей тяжёлой реакцией организма озноб, повышение температуры, усиление потоотделения, обострение болей (лечебный эффект наступает позднее). Противопоказана В. во второй половине беременности, при активных формах туберкулёза, болезнях сердца в стадии декомпенсации, болезнях почек, выраженном атеросклерозе, гипертонической болезни и некоторых др. (см. также [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]).
         В. в ветеринарии применяют сравнительно редко, преимущественно при длительно протекающих хронических локализованных инфекционных заболеваниях, например при бруцеллёзе, туляремии, колибактериозе, стафилококковых инфекциях и др., для стимулирования процесса образования антител. Для В. используют вакцины из убитых микробов, анавакцины, анатоксины, антивирусы, лизаты микробных тел, аутовакцины, бактериофаги и др.

132.Серотерапия и серопрофилактика.( Характеристика антитоксических, антибактериальных и антивирусных иммунных сывороток и иммуноглобу-линов.)
Серотерапия
(от лат. serum сыворотка и Терапия)
        метод лечения заболеваний человека и животных (преимущественно инфекционных) при помощи иммунных сывороток. Лечебный эффект основан на явлении пассивного [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]а обезвреживании микробов (токсинов) антителами (антитоксинами), содержащимися в сыворотках, которые получают путём гипериммунизации животных (главным образом лошадей). Для С. применяют также очищенные и концентрированные сыворотки [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]; гетерогенные (полученные из сывороток иммунизированных животных) и гомологичные (полученные из сывороток иммунизированных или переболевших людей).
Серопрофилактика
(от лат. serum сыворотка и Профилактика)
        метод предупреждения инфекционных болезней человека и животных при помощи иммунных сывороток; создаётся сравнительно непродолжительный (14 нед) пассивный [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. В современной медицинской практике для С. всё шире применяют [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]. С. проводят в эпидемических очагах лицам, имевшим контакт с больными (например, корью, коклюшем), при травмах (для предупреждения столбняка), при укусах животных (для профилактики бешенства) и клещей (для предупреждения клещевого энцефалита). Плановая С. осуществляется для профилактики инфекционного гепатита.




Рисунок 1Описание: 674.jpgРисунок 2Описание: Безымянный.pngdђ Заголовок 1ђђ Заголовок 2dђ Заголовок 315

Приложенные файлы

  • doc 26206120
    Размер файла: 951 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий