bioximia otveti

Эталон ответа на билет №1

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

В лабораторию доставлена моча грудного младенца на общий анализ в количестве 30 мл. Молодая неопытная лаборантка провела все исследования за исключением относительной плотности.


Задание:
Как можно определить относительную плотность мочи, когда мочи мало?
В каких случаях вносятся поправки в значение относительной плотности мочи?
Какими терминами обозначаются повышение и понижение относительной
плотности мочи?
Правила хранения урометра в лаборатории.

Эталон ответа к задаче:

1. Если мочи мало, то ее разводят в 2-3 раза дистиллированной водой, а потом полученную цифру относительной плотности умножают на степень разведения.
2. Урометры откалиброваны для температуры окружающей среды равной 15°С. При повышении температуры на каждые 3°С прибавляют 0,001, а при понижении – вычитают 0,001.
Если в моче имеется белок в количестве, превышающем 6-7 г/л, то вносят поправку: вычитают из относительной плотности мочи 0,00026 на каждый 1 г/л белка.
При наличии глюкозы – вычитают 0,004 на каждый 1% глюкозы.
3. Повышение относительной плотности выше 1,030 – гиперстенурия; понижение ниже 1,010 – гипостенурия.
4. Закончив определение относительной плотности, урометр опускают в стаканчик с дезинфицирующим раствором, дно которого выложено ватой или бинтом. Вне работы урометры хранятся в специальных картонных футлярах цилиндрической формы.


















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Больные сахарным диабетом регулярно сдают кровь на глюкозу и 1 раз в квартал на гликозилированный гемоглобин. Результаты трёх пациентов были следующие:

Гликозилированный гемоглобин
Глюкоза

1. повышен
регулярная гипергликемия

2. норма
регулярная гипергликемия

3. повышен
норма в последний раз


У одного пациента оказалась лабораторная ошибка и анализ повторили.

Задания:

Дайте понятие о гликозилированном гемоглобине.
Расскажите клинико-диагностическое значение гликозилированного гемоглобина.
Объясните принцип метода определения гликозилированного гемоглобина с помощью аффинной хроматографии в микроколонках.
Сделайте вывод, у кого из пациентов явно присутствует лабораторная ошибка.

Эталон ответа к задаче

Гликозилированный гемоглобин является продуктом неферментативной конденсации глюкозы с аминогруппой концевого валина бета-цепей гемоглобина. При увеличении его содержания в тканях развивается гипоксия. Норма гликозилированного гемоглобина - 4 - 6% от общего гемоглобина.
Отмечена прямая зависимость между уровнем глюкозы и содержанием в крови гликозилированного гемоглобина. В отличии от концентрации глюкозы в крови концентрация гликозилированного гемоголобина не подвержена случайным и суточным колебаниям, поэтому он является ретроспективным и интегральным показателем гликемии за предшествующие 3 месяца (за период жизни эритроцитов).
Определение гликозилированного гемоглобина основано на аффинной хроматографии. От гемолизата крови, добавленного в колонку с сорбентом на 1-м этапе отделяется нормальный гемоглобин от гликозилированного гемоглобина, который связывается с 3-аминофенилборной кислотой, привитой к сорбенту, а на 2-м этапе при помощи сорбитола фракция гликозилированного гемоглобина элюируется из колонки.
Лабораторная ошибка присутствует в варианте №3, т.к. гипергликемия должна сопровождаться повышением гликозилированного гемоглобина. Необходимо найти ошибку в результатах определения глюкозы, повторить исследование, обратить внимание на пробоподготовку.






Эталон ответа на билет №2

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

Пациенту с подозрением на эритремию был произведен общий анализ крови.

Задание:
Какие отклонения от нормы возможны в общем анализе крови при подтверждении диагноза?
Изменится ли цветовой показатель при эритремии?
С чем необходимо проводить дифференциальную диагностику?
Достаточно ли информативно при подозрении на эритремию исследование красного костного мозга?
Эталон ответа к задаче:
1. При эритремии повышается концентрация гемоглобина до 200 г/л и более, эритроцитов до 10,0-12,0(1012 /л; может развиться умеренный лейкоцитоз; в лейкоцитарной формуле нейтрофилез со сдвигом влево. Увеличено количество базофилов. Могут встречаться нормобласты. СОЭ замедлена (0-2 мм/час). Умеренный тромбоцитоз.
Таким образом, характерным признаком эритремии является панцитоз – увеличение в крови всех ее элементов: эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов.
2. Цветовой показатель при эритремии остается в пределах нормы.
3. Дифференциальную диагностику следует проводить с симптоматическими эритроцитозами.
4. Исследование красного костного мозга мало информативно при эритремиях. Миелограмма может не отличаться от нормальной.
























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

При вскрытии контрольного материала пробка от флакона упала на пол. Лаборант добавил требуемый объём дистиллированной воды, прижал большим пальцем горлышко и стал встряхивать флакон, чтобы растворить лиофилизат, затем сразу использовал сыворотку для проведения контроля качества.

Задание:
Расскажите, что такое контрольный материал и о цели его применения в лаборатории.
Назовите виды контрольного материала.
Расскажите правила подготовки контрольной сыворотки к работе
Перечислите ошибки допущенные лаборантом при подготовке контрольной сыворотки к работе.

Эталон ответа к задаче:

Контрольным называется однородный материал, результаты исследования которого используются для проведения контроля качества. Контрольный материал применяется на аналитическом этапе лабораторного исследования и это позволяет оценить погрешности, возникающие только на этом этапе.
Контрольные материалы могут быть коммерческого изготовления и собственного приготовления, коммерческого изготовления материалы могут быть сухие и жидкие, с аттестованными и не аттестованным значениями. Контрольные материалы с аттестованными значениями используются для контроля правильности и воспроизводимости, а с не аттестованными значениями – только воспроизводимости.
В паспорте к контрольному материалу указаны правила подготовки контрольного материала. Общие правила следующие: открыть пробку, не допустив потери материала на пробке, налить во флакон 3 или 5 мл. воды (как указано в паспорте), закрыть пробкой, аккуратно перемешать несколько раз переворачивая флакон, но не встряхивать (чтобы не допустить пенообразования), выдержать 30 минут перед началом работы.
Часть лиофилизата потерялась из-за падения пробки; кожные покровы находились в соприкосновении с сывороткой, которую следует рассматривать как потенциально инфицированный материал; встряхивание привело к пенообразованию, чего необходимо избегать; не соблюдалось время растворения сыворотки.








Эталон ответа на билет №3

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При постановке СОЭ кровь в капилляре свернулась.

Задание:
Ваши действия в данной ситуации.
Возможны причины свертывания крови при постановке СОЭ.
Какие внешние факторы могут повлиять на показатель СОЭ?
Сколько капилляров Панченкова упаковывают в бумажные пакеты для стерилизации.

Эталон ответа на задачу:
1. Необходимо повторить определение.
2. К свертыванию крови может привести использование несвежеприготовленного раствора цитрата натрия, неправильное соотношение цитрата натрия и крови, плохое перемешивание крови с цитратом натрия.
3. На показатель СОЭ может повлиять температура окружающей среды: при температуре ниже 18°С оседание эритроцитов замедляется, выше 22°С – ускоряется.
Не рекомендуется переносить штатив с капиллярами, так как при этом СОЭ ускоряется.
Установка капилляров не строго вертикально в штативе также может повлиять на показатель СОЭ.
4. В бумажный пакет для стерилизации упаковывают 5-10 капилляров.

























Задача

«Основы биохимии с методами клинико-диагностических исследований»
Лаборант определял общий билирубин и его фракции в сыворотке крови методом Йендрашика. Все пробы колориметрировал одновременно после 20 минутной экспозиции, что привело к грубой аналитической ошибке и искажению результатов.

Задание:
Дайте характеристику билирубина.
Расскажите принцип определения общего билирубина и его фракций методом Йендрашика.
Объясните, как называются фракции билирубина и в каком процентном соотношении в норме они присутствуют в сыворотке.
Назовите причину, которая привела к искажению результата?
Эталон ответа к задаче:
Билирубин – пигмент желто-красного цвета, обычный пигмент плазмы, образуется при распаде гемоглобина в клетках, токсичен, не растворим в воде, по крови транспортируется в комплексе с альбумином и называется неконъюгированным. Обезвреживается в клетках печени гепатоцитах, взаимодействуя с активной формой глюкуроновой кислоты. Соединение билирубина с глюкуроновой кислотой называется конъюгированный билирубин. Он мало токсичен, растворим в воде, является предшественником пигментов кала и мочи. В плазме находятся обе фракции – конъюгированный и неконъюгированный билирубин.
Общий билирубин определяется на основе реакции с диазотированной сульфаниловой кислотой, после диссоциации неконъюгированного (непрямого, свободного) билирубина при участии кофеинового реагента. Для определения содержания конъюгированного (прямого, связанного) билирубина из реакционной смеси исключается кофеиновый реагент. Концентрация некоъюгированного билирубина рассчитывается разницей концентрации между общим и конъюгированным билирубином.
В сыворотке крови в норме содержится 5,45 – 18,94 мкмоль/л (75-80%) неконъюгированного билирубина и 3,1 – 5,4 мкмоль/л (20-25%) конъюгированного. В сумме он составляет общий билирубин, концентрация которого в сыворотке здорового человека составляет 8,5 – 20,5 мкмоль/л. При уровне билирубина в крови 27 – 34 мкмоль/л и более отмечается появление желтухи.
При определении неконъюгированного билирубина экспозиция после добавления диазосмеси должна быть 5-10 минут. При более длительной экспозиции часть неконъюгированного билирубина начинает взаимодействовать с диазосмесью, что ложно завышает результат конъюгированного билирубина. Для определения общего билирубина экспозиция после добавления диазосмеси должна быть 20 минут.











Эталон ответа на билет №4

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»
При подсчете эритроцитов в камере Горяева в пяти больших разграфленных квадратах по диагонали – 450 эритроцитов.

Задание:
На какую величину надо умножить результат, чтобы вычислить количество эритроцитов в 1 мкл крови?
Сколько эритроцитов у данного пациента в 1 л крови?
Дайте оценку полученному результату.
Какое дезинфицирующее средство применяют для обеззараживания счетных камер?

Эталон ответа к задаче:
1. Для вычисления количества эритроцитов в 1 мкл крови полученный результат необходимо умножить на 10 000.
2. В 1 л крови данного пациента 4,5(1012 /л эритроцитов.
3. Данная цифра соответствует норме.
4. Для обеззараживания счетных камер применяют 6% раствор перекиси водорода в течение 1 часа.




























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
При определении содержания мочевой кислоты в процессе колориметрирования окрашенного комплекса лаборант обратил внимание, что экстинкции одной и той же пробы были нестабильными и постоянно возрастали. Он обнаружил погрешность и устранил её.

Задание:
Дайте характеристику мочевой кислоте.
Расскажите принцип определения мочевой кислоты уриказным методом.
Поясните, что такое экстинкция и от чего она зависит.
Перечислите причины, которые могли привести к нестабильным показателям экстинкции.


Эталон ответа к задаче:

Мочевая кислота это фракция остаточного азота, является продуктом распада пуриновых оснований, находится в плазме в концентрации близкой к насыщению, поэтому любое изменение рН может привести к её кристаллизации и отложению в органах и тканях в виде солей уратов.
Мочевая кислота гидролизуется при каталитическом действии уреазы с образованием перекиси водорода. Образовавшаяся перекись водорода под действием пероксидазы окисляет хромоген с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации мочевой кислоты.
Экстинкция – это оптическая плотность вещества, которая прямо пропорциональна концентрации вещества, толщине слоя и обратно пропорциональна пропусканию света.
Экстинкция при измерении одной и той же пробы возрастала в связи с тем, что по передней рабочей поверхности кюветы стекала капля раствора.





















Эталон ответа на билет №5

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»
У пациента с обширными ожогами при определении гематокрита был получен результат 65%.

Задание:
Каковы нормальные величины гематокрита для мужчин и для женщин?
Дайте оценку полученному результату.
Является ли данный результат следствием истинного эритроцитоза?
Изменится ли показатель СОЭ при данной патологии.

Эталон ответа к задаче
1. Норма для мужчин: 40-48%; для женщин: 36-42%.
2. В данном случае гематокрит выше нормы.
3. Данный результат является следствием потери плазмы из кровяного русла.
4. При данной патологии показатель СОЭ уменьшается.
































Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

При проведении пробы Реберга концентрация креатинина в сыворотке – 80 мкмоль/л, в суточной моче – 8,32 ммоль/л, объём суточной мочи (V) – 1440 мл.


Задание:
Расскажите, с какой целью делают пробу Реберга.
Объясните, почему для постановки этой пробы необходимо исследовать концентрацию креатинина в сыворотке и в моче.
Расскажите принцип определения креатинина методом Яффе.
Рассчитайте клубочковую фильтрацию (Ф), канальцевую реабсорбцию (Р) и сделайте вывод о функциональном состоянии почек у данного пациента.


Эталон ответа к задаче:

Проба Реберга позволяет судить о клубочковой фильтрации и канальцевой реабсорбции. Проба основана на том, что креатинин фильтруется только клубочками, практически не всасывается и не секретируется канальцами. В клинической практике наиболее широко применяется проба Реберга, основанная на определении креатинина в сыворотке крови и моче (часовой или суточный креатинина клиренс-тесты).

Креатинин – беспороговое вещество, не реабсорбируется и не секретируется в почечных канальцах, поэтому параллельное определение креатинина в крови и в моче позволяет оценивать функциональное состояние почек, а именно фильтрацию и реабсорбцию. Параллельное определение концентрации креатинина в крови и моче значительно расширяет диагностические возможности оценки функционального состояния почек, поскольку позволяет получить информацию об интенсивности основных функций нефрона: фильтрации, реабсорбции, секреции, а также почечного кровообращения.

Креатиннин в щелочной среде образует с пикриновой кислотой окрашенный комплекс. Нормы: мужчины – 61 – 115 мкмоль/л, женщины 53 – 97 мкмоль/л; суточная моча 8,8 – 13,3 ммоль/сутки.

Ф = С креат. в моче : С креат. в сыв. Д (минутный диурез),
Д = V : Т (время в минутах). Ф = 8320 : 80 1 = 104 (мл/мин) – норма,
Р = (Ф – Д) : Ф 100%. Р = (104 – 1) : 104 100 = 99% - норма.

В норме клубочковая фильтрация колеблется от 80 до 140 мл/мин.
В норме канальцевая реабсорбция составляет 98-99,9%.







Эталон ответа на билет №6

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»
Зимой пациент принес в лабораторию мочу для исследования. Когда он извлек из пакета флакон с мочой, то очень удивился тому, что она стала мутной и с обильным осадком кирпично-розового цвета, тогда как во время сбора моча была прозрачной и без осадка.

Задание:
Что могло стать причиной мутности мочи?
Чем обусловлен цвет осадка?
Является ли в данном случае мутность мочи и обильный осадок признаком патологии?
Как можно избавиться от осадка в данном случае?

Эталон ответа к задаче:
1. Причиной мутности мочи могло явиться выпадение солей в результате низкой температуры окружающей среды.
2. Цвет осадка обусловлен большим количеством уратов.
3. Мутность мочи и обильный осадок в данном случае не может быть расценен как признак патологии.
4. Избавиться от осадка, вызванного выпадением уратов, можно путем добавления реактива Селена (4 г буры, 4 г борной кислоты, 100 г воды). Реактив Селена наносят на осадок после центрифугирования, размешивают и вновь центрифугируют.

























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Больной В. поступил в инфекционное отделение с подозрением на вирусный гепатит. Получены результаты исследований: в сыворотке – общий билирубин 145 мкмоль/л, билирубин конъюгированный – 112 мкмоль/л, в моче - наличие стеркобилиногена, конъюгированного билирубина, резко увеличено содержание мезобилиногена; в кале наличие стеркобилиногена.

Задание:
Дайте характеристику билирубина.
Расскажите принцип определения билирубина методом Йендрашика.
Рассчитайте содержание неконъюгированного билирубина.
Оцените результаты лабораторных исследований и сделайте вывод о соответствии этих результатов диагнозу.


Эталон ответа к задаче:

Билирубин – пигмент желто-красного цвета, обычный пигмент плазмы, образуется при распаде гемоглобина в клетках, токсичен, не растворим в воде, по крови транспортируется в комплексе с альбумином и называется неконъюгированным. Обезвреживается в клетках печени гепатоцитах, взаимодействуя с активной формой глюкуроновой кислоты. Соединение билирубина с глюкуроновой кислотой называется конъюгированный билирубин. Он мало токсичен, растворим в воде, является предшественником пигментов кала и мочи. В плазме находятся обе фракции – конъюгированный и неконъюгированный билирубин.
Общий билирубин определяется на основе реакции с диазотированной сульфаниловой кислотой, после диссоциации неконъюгированного (непрямого, свободного) билирубина при участии кофеинового реагента. Для определения содержания конъюгированного (прямого, связанного) билирубина из реакционной смеси исключается кофеиновый реагент. Концентрация некоъюгированного билирубина рассчитывается разницей концентрации между общим и конъюгированным билирубином.
Общий билирубин = конъюгированный + неконъюгированный. Неконъюгированный билирубин = общий билирубин – конъюгированный. Неконъюгированный: 145 – 112 = 33 мкмоль/л.
В сыворотке крови в норме содержится 5,45 – 18,94 мкмоль/л (75-80%) неконъюгированного билирубина и 3,1 – 5,4 мкмоль/л (20-25%) конъюгированного. В сумме он составляет общий билирубин, концентрация которого в сыворотке здорового человека составляет 8,5 – 20,5 мкмоль/л. Соответствуют, так как при паренхиматозной желтухе отмечается гипербилирубинемия за счёт конъюгированной и неконъюгированной фракций, билирубинурия, мезобилирубинурия.







Эталон ответа на билет №7

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»
При исследовании мочи на общий анализ качественная проба на глюкозу оказалась положительной. Как выяснилось, пациент собрал мочу в банку из-под варенья, плохо отмыв ее.

Задание:
Ваши действия в данной ситуации?
Какие методы качественного определения глюкозы в моче вам известны?
О чем необходимо предупредить пациента перед сбором мочи на анализ?
Как обрабатывается исследованная моча?

Эталон ответа к задаче:
1. Необходимо повторить исследование, проинструктировав пациента как правильно собрать мочу для анализа.
2. Качественное определение глюкозы в моче можно провести с помощью пробы Гайнеса-Акимова и с помощью индикаторной тест-полоски.
3. Пациента необходимо предупредить, чтобы банка для сбора мочи была тщательно вымыта и высушена. Моча должна быть собрана натощак и доставлена в лабораторию как можно быстрее.
4. Исследованная моча смешивается с сухой хлорной известью в соотношении 1:5 (1часть извести, 5 частей мочи), выдерживается 1 час и выливается в канализацию.


























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

При нарушении процессов дезаминирования и переаминирования, а также усиленном распаде белков изменяется содержание аминокислот в сыворотке и в моче. Количество аминокислот в моче усиливается.


Задание:
Расскажите о процессах дезаминирования
Расскажите о процессах переаминирования.
Скажите, как обозначается термином появление в моче повышенного содержания аминокислот.
Назовите реакции, с помощью которых можно идентифицировать различные аминокислоты в биологических жидкостях


Эталон ответа к задаче:

Дезаминирование - общий путь обмена аминокислот, при котором от аминокислот отщепляется аминогруппа в виде аммиака. Дезаминирование бывает: восстановительное, гидролитическое, внутримолекулярное, окислительное.
Переаминирование (трансаминирование) - общий путь обмена аминокислот, при котором осуществляется обратимый перенос аминогруппы с аминокислоты на кетокислоту без образования аммиака. Этот процесс играет роль в мочевинообразовании, глюконеогенезе, образовании новых аминокислот.
Аминоацидурия.
Все аминокислоты обнаруживают нингидриновой реакцией, циклические аминокислоты – ксантопротеиновой реакцией, аминокислоты, содержащие группу-SH – реакцией Фоля. Для идентификации проводят разделение аминокислот хроматографией.




















Эталон ответа на билет №8

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При подсчете тромбоцитов по Фонио в мазке на 1000 эритроцитов было подсчитано 20 тромбоцитов. Общее количество эритроцитов в 1 л крови 4,5х10№І/л.

Задание:

Сколько тромбоцитов у пациента в 1 л крови?
Дайте оценку результату.
О какой патологии крови может свидетельствовать подобный результат?
Какого результата при исследовании длительности кровотечения по Дуке можно ожидать в данном случае?
Эталон ответа к задаче:

1. У пациента в 1 л крови 90(109 /л тромбоцитов.
2. Этот результат оценивается как тромбоцитопения.
3. Подобный результат может свидетельствовать о геморрагическом диатезе.
4. В данном случае можно ожидать увеличения длительности кровотечения по Дуке.





























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

При исследовании активности (-амилазы лаборант использовал субстратно-буферный раствор 10-ти дневной давности, который хранился при комнатной температуре. При добавлении йода в контрольную и опытную пробы они окрасились крайне слабо. Разницы в экстинкциях опытных и контрольных проб не было.


Задание:
Дайте общую характеристику ферменту (-амилазе.
Расскажите клинико-диагностическое значение этого фермента.
Расскажите принцип метода определения (-амилазы в сыворотке и в моче
Объясните, в чём причина слабой окраски и маленькой разницы в экстинкциях.

Эталон ответа к задаче:

Альфа-амилаза – фермент, катализирующий распад полисахаридов, в том числе крахмала и гликогена. Фермент, в основном, синтезируется поджелудочной и слюнными железами. Сыворотка крови содержит панкреатический и слюнной изоферменты. Так как молярная масса альфа-амилазы сравнительно низкая по сравнению с другими белками, то она фильтруется в клубочках почек и содержится в моче. сыворотка/плазма – 3,3 – 8,9 мг/с х л, моча – до 44 мг/с х л.
Амилаза в самых больших концентрациях находится в поджелудочной железе и слюнных железах соответственно – в форме поджелудочного и слюнного изоферментов. В физиологических условиях амилаза сыворотки крови состоит на 40% из панкреатической амилазы и на 60% из слюнной амилазы. Используя специфические ингибиторы или разделение электрофорезом, можно установить происхождение фермента, присутствующего в плазме. Амилаза удаляется из плазмы почками и экскретируется с мочой. Это обуславливает большую информативность определения активности альфа-амилазы в моче как теста оценки функционального состояния поджелудочной железы. Рост активности амилазы имеет самое большое значение при диагностике заболеваний поджелудочной железы. Гипоамилаземия: некроз поджелудочной железы; гипоамилазурия: болезни почек и печени; гиперамилаземия: острый панкреатит; гиперамилазурия: острый панкреатит, рак подлжелудочной железы.
Под действием альфы-амилазы крахмал гидролизуется с образованием продуктов, не дающих цветной реакции с йодом. Интенсивность уменьшения окраски йод-крахмального комплекса в единицу времени пропорциональна активности фермента.
Субстратно-буферный раствор хранится при t +4оС не более 7 дней. Лаборант использовал субстратно-буферный раствор, в котором произошел гидролиз крахмала в результате бактериального загрязнения, поэтому разницы в экстинкции опытных и контрольных проб не было.






Эталон ответа на билет №9

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При заполнении счетной камеры Горяева лаборантка забыла перемешать взвесь эритроцитов.

Задание:

Будут ли искажение результатов, и если будут, то какие?
Что является разводящей жидкостью для эритроцитов?
Во сколько раз разводят кровь для подсчета эритроцитов в камере Горяева?
Сколько эритроцитов в 1 л крови у здорового мужчины?

Эталон ответа к задаче:

1. Если камера будет заполнена взвесью из верхних слоев пробирки, результат будет занижен и наоборот, если из нижних слоев – завышен. Взвесь должна быть равномерной, что достигается вращением пробирки между ладонями непосредственно перед заполнением камеры. После заполнения камеру нужно положить на столик микроскопа на 1-2 мин, чтобы эритроциты осели, и только после этого можно их подсчитывать.
2. Разводящей жидкостью для эритроцитов является изотонический раствор хлорида натрия. Допускается применение 0,9%-3% раствора, что позволяет сохранить все эритроциты.
3. Кровь для подсчета эритроцитов пробирочным методом в счетной камере разводят в 200 раз, для чего 0,02 мл крови вносят в 4,0 мл изотонического раствора натрия хлорида.
4. В 1 л крови здорового мужчины 4,0-5,0(1012 /л эритроцитов.






















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

В приёмное отделение поступил больной с симптомами хронической почечной недостаточности (ХПН), в том числе, с олигурией. Данные биохимических исследований следующие:
Общий белок – 58 г/л
Альбумин – 24 г/л
Мочевина – 18, 3ммоль/л
Креатинин – 134 мкмоль/л
Мочевая кислота – 478 мкмоль/л
Задания:
Расскажите, из чего состоит фонд азота организма.
Назовите из выше перечисленных вещества, составляющие остаточный азот.
Оцените результаты исследований, применяя терминологию.
Сделайте заключение, какую дополнительную пробу следует проделать больному для выяснения функции почек.


Эталон ответа к задаче:



1.
13 SHAPE \* MERGEFORMAT 1415
Мочевина, креатинин, мочевая кислота
Гипопротеинемия, гипоальбуминемия, уремия, гиперкреатининэмия, гиперурикемия.
Функциональную пробу Реберга для выяснения клубочковой фильтрации и канальцевой реабсорбции.


Эталон ответа на билет №10

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При исследовании мочи по Зимницкому во всех 8-ми порциях значения относительной плотности были близки к 1,010 , а количество мочи около 300 мл. в каждой порции при условии, что пациент правильно собирал мочу и выполнил все инструкции относительно пищевого и питьевого режима под контролем медсестры.

Задание:
Дайте оценку полученному результату.
Каким термином можно обозначить подобный результат?
Нарушение в какой области нефрона может отражать подобный результат?
Какую величину должно превысить значение относительной плотности мочи хотя бы в одной порции при нормальной концентрации функции почек?

Эталон ответа к задаче
1. Данный результат свидетельствует о нарушении концентрационной функции почек.
2. Подобный результат можно назвать изостенурией.
3. Такая "монотонная" моча является признаком нарушений в канальцевом участке нефрона, который ответственен за процесс реабсорбции воды и, соответственно, за концентрационную функцию почек.
4. При нормальной концентрационной функции почек разница между минимальным и максимальным значением относительной плотности мочи должна быть не менее 0,007. И хотя бы в одной порции значение относительной плотности должно быть не менее 1,020.
























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований».
Во время диспансеризации у пациентки К. в моче была обнаружена глюкоза, а в крови глюкоза была в пределах нормы. Повторные анализы на глюкозу в моче и в крови были аналогичные.

Задание:
Дайте общую характеристику глюкозы
Расскажите принцип определения глюкозы глюкозооксидазным методом.
Поясните, что означает понятие « почечный порог для глюкозы» и чему он равен
Назовите термин, обозначающий появление глюкозы в моче и возможные причины её появления в моче.

Эталон ответа к задаче:

Глюкоза – это основной энергетический субстрат организма. Главный источник глюкозы – сахароза, крахмал, гликоген, а также гликогенные аминокислоты и лактат (реакции глюконеогенеза). Содержание глюкозы практически одинаково в плазме и форменных элементах крови. В артериальной крови уровень глюкозы несколько выше, чем в венозной, что объясняется непрерывным использованием глюкозы клетками тканей и органов. Нормальные величины: взрослые –3,3 – 6,7 ммоль/л.
При окислении глюкозы в присутствии глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. При добавлении пероксидазы перекись водорода окисляет аминосодержащий краситель в присутствие фенольного реагента в окрашенный хинонимин, определяемый фотометрически. Концентрация хинонимина прямо пропорциональна концентрации глюкозы в сыворотке.
В почках профильтрованная глюкоза в норме полностью реабсорбируется в проксимальных канальцах нефронов, но при концентрации в крови, превышающих 9 - 10 ммоль/л (почечный порог), вся глюкоза не может быть реабсорбирована, и часть ее появляется в моче. Почечный порог может быть неодинаковым у разных людей.
Глюкозурия – это появление глюкозы в моче. В моче здорового человека глюкоза практически не обнаруживается. В суточной моче может содержаться до 125 – 130 мг глюкозы. Глюкозурия бывает физиологическая (алиментарная и эмоциональная) и патологическая: связанная с гипергликемией (инсулярная (сахарный диабет) и экстраинсулярная (нарушения функций жвс)) и несвязанная с гипергликемией (почечный диабет).













Эталон ответа на билет №11

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При подсчете лейкоцитарной формулы был получен следующий результат: ю – 5%; п/я – 20%; с/я – 60%; мон – 3%; лимф – 11%; э – 1%; б – 0%. Общее количество лейкоцитов в 1 л крови – 11,0х109/л. Эритроцитов – 4,2х1012/л, Hb – 130 г/л, СОЭ – 20 мм/час.

Задание:
Дайте оценку результату.
Объясните причины подобного сдвига.
В какой части мазка подсчитывают лейкоцитарную формулу?
Что означает «линия Меандра»?

Эталон ответа к задаче:

1. В результате анализа можно отметить лейкоцитоз, нейтрофильный сдвиг влево, увеличение СОЭ.
2. Подобный сдвиг лейкоцитарной формулы, с лейкоцитозом и увеличением СОЭ возможен при острых воспалительных реакциях в организме.
3. Лейкоцитарная формула подсчитывается в наиболее тонкой части мазка, где эритроциты расположены одиночно, а не "монетными столбиками".
4. Лейкоциты в мазке располагаются неравномерно: более крупные клетки – моноциты, эозинофилы, нейтрофилы встречаются чаще по краю мазка, более мелкие – лимфоциты – в середине. Поэтому подсчет ведется по зигзагообразной "линии Меандра": 3-5 полей зрения вдоль края мазка, затем 3-5 полей зрения под прямым углом к середине мазка, потом 3-5 полей зрения параллельно краю и вновь под прямым углом возвращаются к краю мазка.




















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Концентрация общего белка в сыворотке составила 59 г/л, концентрация альбумина у того же больного – 29 г/л.


Задание:
Дайте характеристику альбумину и перечислите его основные функции.
Расскажите принцип определения альбумина с бромкрезоловым зелёным.
Рассчитайте альбуминово - глобулиновый (А/Г) коэффициент.
Оцените результаты исследований, применяя медицинскую терминологию.


Эталон ответа к задаче:

Альбумины – однородная и самая большая фракция общего белка. Они создают онкотическое давление и препятствуют выходу жидкости из сосудистого русла, связывают катионы (кальций, медь, железо), участвуют в транспорте жирорастворимых веществ, образуют белковую буферную систему, поддерживая тем самым постоянный уровень рН. Альбумины синтезируются в печени. Норма альбумина в сыворотке 60 – 85 г/л.
Альбумин с бромкрезоловым зелёным в цитратном буфере даёт зелёное окрашивание. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации альбумина.
а) Г = ОБ – А = 59 – 29 = 30 (г/л) – концентрация глобулинов
б) АГ = А : Г = 29 : 30 = 0,97 – альбуминово-глобулиновый коэффициент.
Нормы А/Г 1,7 – 2,1.
Общий белок – гипопротеинемия, альбумин – гипоальбуминемия,
А/Г - диспротеинемия.





















Эталон ответа на билет №12

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При определении осмотической резистентности эритроцитов произошла внутрилабораторная ошибка: вместо 1% раствора натрия хлорида для получения ряда гипотонических растворов с постепенным снижением концентрации в качестве исходного был использован 3% раствор натрия хлорида.

Задание:
Повлияет ли это на результаты анализа и если повлияет, то в какую сторону?
Ваши действия?
Нормальные показатели осмотической резистентности для взрослых.
Диагностическое значение данного исследования.
Эталон ответа к задаче:

1. Повлияет. Минимальная резистентность будет определяться в пробирке с "более низкой" концентрацией раствора. Максимальная же резистентность может вообще не определиться.
2. Необходимо повторить исследование с другим свежеприготовленным 1% раствором натрия хлорида.
3. В норме минимальная резистентность эритроцитов по макроскопическому методу Лимбека и Рибьера равна 0,48-0,46% раствору хлорида натрия. Максимальная резистентность 0,34-0,32% раствору хлорида натрия.
4. Исследование осмотической резистентности эритроцитов проводят при подозрении на гемолитическую анемию. Появление признаков гемолиза эритроцитов при более высокой, чем в норме, концентрации хлорида натрия (0,70-0,75% раствор хлорида натрия) свидетельствует о понижении осмотической резистентности эритроцитов, что характерно для наследственного микросфероцитоза, аутоиммунных гемолитических анемий. Повышение осмотической резистентности эритроцитов наблюдается при талассемии, гемоглобинопатиях.


















Задача
«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
Активность альфа–амилазы больного К. в динамике, поступившего в больницу с приступом острого панкреатита следующая:
Время определения активности альфа-амилазы от начала болевого приступа
Активность альфа–амилазы сыворотки
Активность альфа– амилазы мочи

Через 8 часов
гиперамилаземия
гиперамилазурия

Через 12 часов
гиперамилаземия
норма

Через 24 часа
гиперамилаземия
гиперамилазурия

Через 3 суток
норма
гиперамилазурия

Через 5 суток
норма
норма


Задание:
Дайте характеристику альфа-амилазы и расскажите её клинико-диагностическое значение.
Объясните принцип определения альфа-амилазы методом Каравея и особенность постановки контрольной пробы.
Сделайте вывод по результатам исследования, где присутствует лабораторная ошибка.
Расскажите правила обеззараживания кювет для колориметрирования.

Эталон ответа к задаче:
Альфа-амилаза – фермент, катализирующий распад полисахаридов, в том числе крахмала и гликогена. Фермент, в основном, синтезируется поджелудочной и слюнными железами. Сыворотка крови содержит панкреатический и слюнной изоферменты. Так как молярная масса альфа-амилазы сравнительно низкая по сравнению с другими белками, то она фильтруется в клубочках почек и содержится в моче. Используя специфические ингибиторы или разделение электрофорезом, можно установить происхождение фермента, присутствующего в плазме. Амилаза удаляется из плазмы почками и экскретируется с мочой. Это обуславливает большую информативность определения активности альфа-амилазы в моче как теста оценки функционального состояния поджелудочной железы. Рост активности амилазы имеет самое большое значение при диагностике заболеваний поджелудочной железы. Гипоамилаземия: некроз поджелудочной железы; гипоамилазурия: болезни почек и печени; гиперамилаземия: острый панкреатит; гиперамилазурия: острый панкреатит, рак подлжелудочной железы.
Под действием альфы-амилазы крахмал гидролизуется с образованием продуктов, не дающих цветной реакции с йодом. Интенсивность уменьшения окраски йод-крахмального комплекса в единицу времени пропорциональна активности фермента. Контрольную пробу ставят на каждую сыворотку и мочу, внося их в пробирку только после инкубации.
Лабораторная ошибка присутствует в первом исследовании, так как активность альфа-амилазы в сыворотке увеличивается значительно раньше, чем активность альфа-амилазы в моче с момента болевого приступа. Гиперамилазурия наступает через 24 часа от начала болевого приступа и длится дольше, чем гиперамилаземия. Норма сыворотка/плазма – 3,3 – 8,9 мг/с х л, моча – до 44 мг/с х л.
Кюветы заливают 6% перекисью водорода на 1 час, промывают многократно проточной водой, затем несколько раз ополаскивают дистиллированной водой и сушат на воздухе.


Эталон ответа на билет №13

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При подсчёте количества ретикулоцитов был получен результат 25%.

Задание:
Что такое ретикулоциты?
Дайте оценку полученному результату.
Что могло стать причиной подобного результата?
Назовите один из методов окраски ретикулоцитов и его принцип.

Эталон ответа к задаче:

1. Ретикулоциты – это молодые эритроциты, только что утерявшие ядро. При обычных методах окраски с предварительной фиксацией мазка они выглядят полихроматофилами. При специальных методах окраски в них обнаруживается нежная сеточка и зернистость синего цвета – ретикулум, которая является остатком утерянного ядра.
2. Полученный результат можно оценивать как ретикулоцитоз.
3. Причиной ретикулоцитоза может быть острая кровопотеря или гемолиз эритроцитов.
4. В принципе окраски ретикулоцитов лежит прижизненная окраска без фиксации спиртом. Окраска ведется щелочными красками, например бриллиантовым крезиловым синим.


























Задача
«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
В лаборатории у группы больных определяли креатинин в сыворотке и в суточной моче. Получены следующие результаты исследования:
Пациенты
Результаты креатинина в сыворотке
Результаты креатинина в моче

1(мужчина)
85 мкмоль/л
10,6 ммоль/сутки

2(женщина)
147 мкмоль/л
4,9 ммоль/сутки


Задание:
Дайте общую характеристику креатинину.
Расскажите о его клинико-диагностическом значении.
Объясните принцип определения креатинина методом Яффе.
Оцените результаты исследований, применяя терминологию.

Эталон ответа к задаче:
Креатинин является конечным продуктом распада креатина, который вовлечен в энергетический обмен мышечной и других тканей. Концентрация креатинина в крови и моче зависит от мышечной массы и выделительной способности почек, а количество белков в рационе питания на его уровень не влияет. Определение креатина широко используется для диагностики заболевания почек. Креатин и креатинин – важные компоненты остаточного азота, в синтезе которых принимают участие аминокислоты аргинин, глицин и метионин. Известно два источника креатина в организме. Существует экзогенный креатин, т.е. креатин пищевых продуктов (мясо, печень), и эндогенный креатин, образующийся в процессе синтеза в тканях.
Креатининемия является как ранним показателем развивающейся недостаточности почек. Повышение уровня креатинина в крови указывает на нарушение функции почечного фильтра. Увеличение уровня в сыворотке (плазме) крови обусловлено как усиленным образованием (продукцией), так и задержкой (ретенцией) этого метаболита в организме. Гипокреатининемия коррелирует с уменьшением мышечной массы (мышечные дистрофии и атрофии, параличи, парезы и др.), оно наблюдается при беременности, достигая наибольшей выраженности в первом и втором триместре. Увеличение выведения креатинина с мочой: физической нагрузке (мышечной работе), лихорадочных состояниях, острых инфекционных заболеваниях, ряде эндокринных расстройств (сахарном диабете). Уменьшение выведения креатинина с мочой: длительном обездвижении больных параличах, анемии, лейкозах, гипертиреозе, хронических заболеваниях почек, амилоидозе почек, голодании.
Креатиннин в щелочной среде образует с пикриновой кислотой окрашенный комплекс.
Нормы: мужчины – 61 – 115 мкмоль/л, женщины 53 – 97 мкмоль/л; суточная моча 8,8 – 13,3 ммоль/сутки.
Мужчина – норма, норма.
Женщина – гиперкреатинемия, гипокреатинурия.






Эталон ответа на билет №14

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»
Во врачебно-физкультурном диспансере было произведено лабораторное обследование команды хоккеистов-юниоров вскоре после утренней пробежки и плотного завтрака.

Задание:
Возможны ли в данном случае отклонения от нормы показателей общего анализа крови, и какие?
Возможны ли в данном случае отклонения от нормы показателей общего анализа мочи, и какие?
О чем надо было предупредить спортсменов накануне диспансерного обследования?
Ваши действия в данной ситуации?

Эталон ответа к задаче:

1. В данном случае возможно повышение количества эритроцитов и концентрации гемоглобина, а также пищеварительный лейкоцитоз. Эти изменения являются физиологическими и преходящими.
2. В моче может быть обнаружена физиологическая протеинурия и глюкозурия, связанные с повышенной физнагрузкой, могут быть обнаружены гиалиновые цилиндры в осадке мочи.
3. Накануне обследования спортсменов следовало предупредить о недопустимости любых физических нагрузок и плотного завтрака перед обследованием.
4. Необходимо повторить обследование, предварительно проинструктировав спортсменов.






















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Данные установочной серии для общего белка: Х средняя – 68 г/л, среднеквадратическое отклонение (S) – 2 г/л. По данным была построена карта Шухарта, на которую наносились результаты общего белка в контрольной сыворотке.
Дата
04.02.04
05.02.04
06.02.04
07.02.04
08.02.04

Концентрация
«ОБ» г/л
65,1
70,6
75,4
67,2
68


Задание:
Расскажите, что такое воспроизводимость.
Рассчитайте коэффициент вариации.
Постройте карту Шухарта, используя Х среднее и S.
Нанесите на построенную вами карту значения общего белка в контрольной сыворотке за 5 дней и оцените работу лаборатории за этот период времени.

Эталон ответа к задаче:

Воспроизводимость - это качество, которое характеризует близость друг к другу результатов исследований, выполненных в различных условиях.
КОЭФФИЦИЕНТ ВАРИАЦИИ (СV%) – характеристика воспроизводимости измерений, определяемое как стандартное отклонение, выраженное в процентах от среднего значения.
13 EMBED Equation.3 1415
Где: CV% - коэффициент вариации в %
S - среднеквадратичная ошибка
Хср - среднее значение
СV = 2 : 68 100% = 2,91%
построение карты Шухарта: Строится ось координат, через середину оси ординат проводит прямую, параллельную оси ординат и принимаем её за Х среднее
Параллельно Хсредней проводим предупреждающие и контрольные границы:
Хср + 1S, Хср +2S, Хср +3S, Хср - 1S, Хср -2S, Хср -3S в соответствии с
выбранным масштабом.
4. Нельзя выдавать результаты пациентов «ОБ» лечащим врачам за 06.02.04, так как результат в контрольной сыворотке выходит за пределы Xср.+3S. Необходимо выявить причину грубой ошибки и устранить её, затем повторить анализы пациентов и контрольной сыворотки.











Эталон ответа на билет №15

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

В лабораторию ЦИТО доставлена моча пациента с множественными переломами бедренных и берцовых костей. При исследовании лаборантка заметила присутствие капель жира на поверхности мочи. В остальном общий анализ мочи отклонений от нормы не показал.

Задание:
Что могло явиться причиной присутствия жира в моче в данном случае?
Как удостовериться, действительно ли это жир?
Каким термином называется присутствие жира в моче?
Чем ещё может быть вызвано появление жира в моче?

Эталон ответа к задаче:

1. Причиной присутствия капель жира в моче в данном случае могли явиться множественные переломы трубчатых костей, содержащих в своих полостях жировой костный мозг. С током крови капли жира прошли через почки и выявились в моче.
2. Подтвердить, что это жир можно двумя способами:
а) в пробирку с мочой добавить эфир – жир растворится;
б) добавить раствор Судан Ш – капли жира окрасятся в оранжевый цвет.
3. Присутствие жира в моче называется липурией.
4. Причиной липурии может быть также жировое перерождение почек.
























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
В лабораторию была доставлена моча новорожденного для выявления аминоацидурии и идентификации аминокислоты, которая сопровождает врожденное нарушение обмена аминокислот – фенилкетонурию. В результате лабораторного исследования диагноз фенилкетонурия был подтвержден.


Задание:
Какая аминокислота была обнаружена в моче больного ребенка?
Как называется лабораторный метод, который применили в лаборатории для идентификации аминокислоты?
Расскажите принцип этого метода.
Как идентифицировали обнаруженную аминокислоту?

Эталон ответа к задаче:

При фенилкетонурии в моче накапливается аминокислота фенилаланин.

Метод распределительной хроматографии.


При распределительной хроматографии разделение происходит вследсвие различной растворимости определяемых веществ в двух несмешивающихся фазах. Для этого необходима система, состоящая из неподвижной фазы (носителя) и подвижной фазы (растворителя). На неподвижную фазу наносится смесь веществ, и через неё пропускается ток растворителя. Чем лучше данное вещество растворимо в подвижной фазе, тем дальше оно продвинется по направлению тока растворителя.

В контрольный сектор хроматографической полоски наносят аминокислоту - фенилаланин, а в опытный - мочу больного ребёнка. Проводят хроматографию, Хроматограммы фиксируют, окрашивают, затем рассчитывают коэффициенты распределения аминокислот в контрольном и опытном секторах. Если коэффициенты распределения одинаковые, то в опытном секторе находится та же аминокислота, что и в контрольном.















Эталон ответа на билет №16

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При определении концентрации гемоглобина гемиглобинцианидным методом на КФК у школьницы на диспансеризации был получен результат – 165г/л при нормальном количестве эритроцитов.

Задание:
Дайте оценку полученному результату.
Ваши действия.
Какие ошибки лаборанта могли привести к данному результату.
Как дезинфицируются кюветы от КФК?

Эталон ответа к задаче:
1. Гиперхромемия. Данный результат завышен.
2. Необходимо повторить исследование.
3. К завышению результата могло привести:
а) разведение крови менее чем в 251 раз;
б) выстаивание опытной пробы более 20 мин;
в) использование грязной кюветы.
4. Кюветы от КФК дезинфицируют 6% раствором перекиси водорода в течение часа.



























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

В инструкции к набору для определения креатинина методом Яффе указано, что пикриновую кислоту надо добавлять в пробу в количестве 0,5 мл. Лаборант взял дозатор с переменным объемом от 200 до 1000 мкл.


Задание:
Расскажите правила работы с дозаторами и назовите основные режимы дозирования.
Объясните, соответствует ли дозатор, выбранный лаборантом, указанному объёму пикриновой кислоты.
Переведите микролитры - 5, 20, 1000 (мкл) в миллилитры.
Расскажите, как обеззараживаются и утилизируются отработанные наконечники.


Эталон ответа к задаче:

Основные режимы дозирования: прямое, обратное, многократное дозирование. Прямое дозирование – весь забранный объём жидкости сбрасывается за один полный ход поршня, оно подходит для дозирования водных растворов. Обратное дозирование – в наконечник набирается объём жидкости больший по сравнению с необходимым. По окончании дозирования в наконечнике остаётся остаточный объём жидкости, который нивелирует погрешность, связанную с образованием пены. Этот способ дозирования используется для биологических, вязких и пенящихся жидкостей, а также дозирования очень малых объемов. Многократное дозирование предполагает повторяющиеся операции дозирования идентичных объемов жидкости. В этом случае используют электронные дозаторы, что позволяет повторять дозирование после однократного заполнения наконечника. Правила работы с дозаторами: дозатор подбирается в соответствии с объемом, указанным в методике; в реактив опускается только наконечник, который используется только один раз; при заборе реагента кнопка дозатора нажимается до первого упора, а выпускается реагент из дозатора нажатием кнопки до второго упора (в случае прямого дозирования).
Да соответствует, так как 0,5 мл - это тоже самое, что 500 мкл.
0,005 мл; 0,02 мл; 1 мл
4. Наконечники обеззараживаются любым дез. средством на 1 час, или автоклавирование. Утилизация: в пакетах.














Эталон ответа на билет №17

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

Общий анализ крови у пациента М. показал:
HGB – 150 г/л
RBS – 4,5x1012/л
WBS – 6,5х109 /л
СОЭ – 8мм/час
Лейкограмма: Gran 65%; Eo – 3%; Baso – 0%; Mon – 8%; Lymph – 24%.

Задание:
Вычислите цветовой показатель.
Дайте оценку результату анализа.
Клинико-диагностическое значение цветового показателя крови.
Как обработать стол, испачканный кровью?

Эталон ответа к задаче:

1. Цветовой показатель равен 1. Он вычисляется по формуле: Цв.пок.= Нb(3/первые три цифры количества эритроцитов, т.е. 150 ( 3/450 = 1.
2. Результат анализа отклонений от нормы не показывает.
3. Цветовой показатель отражает относительное содержание гемоглобина в эритроцитах. Нормальная величина ЦП колеблется от 0,85 до 1,05. ЦП имеет значение для определения типа анемии. ЦП менее 0,85 свидетельствует о гипохромии, 0,85-1,1 – о нормохромии, более 1,1 – о гиперхромии.
4. Стол, испачканный кровью, накрывают ветошью, смоченной дезраствором на 1 час. Затем его протирают другой ветошью с дезинфицирующим раствором и еще раз водой и вытирают насухо. Ветошь замачивают в специальной емкости с дезинфицирующим раствором на час, затем выбрасывают.



















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

В аналитической характеристике к набору для определения общего белка биуретовым методом указано, что линейность метода сохраняется до 120 г/л. На калибровочном графике это соответствует экстинкции - 0,397. Экстинкция одной из опытных проб составила – 0,418.


Задание:
Дайте понятие общего белка и расскажите принцип биуретового метода.
Расскажите алгоритм построения калибровочного графика.
Объясните, как можно рассчитать концентрацию белка без калибровочного графика.
Назовите действия, которые надо предпринять в данной ситуации, чтобы определить содержание общего белка.

Эталон ответа к задаче:

Общий белок с сульфатом меди в щелочной среде даёт сине-фиолетовый комплекс, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна содержанию общего белка.
Калибровочный график строится на миллиметровой бумаге, масштаб выбирается так, чтобы график проходил под углом в 45 градусов. Проводится ось координат. На оси абсцисс откладываются известные концентрации стандартных растворов, а на оси ординат - соответствующие им значения оптической плотности. Через точки пересечения проводят прямую линию. Составляют калибровочную таблицу или рассчитывают калибровочный коэффициент.
Содержание аналита можно определить с помощью стандартной пробы. Стандартную пробу обрабатывают параллельно с опытной, а затем рассчитывают концентрацию в опытной пробе по формуле: Сопыта = (Еопыта : Естанд.) Сстанд.
При более высокой величине экстинкции сыворотку следует развести 0,9% NaCl в 2 раза, исследование повторить, а результат умножить на степень разведения.

















Эталон ответа на билет №18

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»
У пациента с жалобами на повышенную ломкость капилляров (самопроизвольно возникающие гематомы, пурпурные пятна, точечные кровоизлияния на коже) при подсчете количества тромбоцитов отмечена тромбоцитопения.


Задание:
Что такое тромбоцитопения?
Количество тромбоцитов в норме?
Какова аббревиатура, обозначающая тромбоциты в гематологических анализаторах.
Изменится ли время свертывания крови по Сухареву при данной патологии.

Эталон ответа к задаче:

1. Тромбоцитопения – это уменьшение количества тромбоцитов в единице объема крови.
2. Количество тромбоцитов в норме в периферической крови здоровых людей 180,0-320,0(109 /л.
3. Тромбоциты по Фонио подсчитывают в окрашенном мазке крови параллельно с эритроцитами, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов. Для удобства счета используют ограничитель поля зрения. Затем производят перерасчет количества тромбоцитов на число эритроцитов в 1 л крови.
4. Время свертывания при данной патологии не должно меняться, т.к. оно зависит не от количества тромбоцитов, а от плазменных факторов свертывания крови.























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
Концентрация альбумина сыворотке крови у группы больных следующая:
а) 42 г/л в) 56 г/л
б) 25 г/л г) 38 г/л


Задание:
Дайте общую характеристику альбумину и перечислите его функции в сыворотке крови.
Расскажите принцип определения альбумина с бромкрезоловым пурпурным.
Объясните клинико-диагностическое значение определения альбумина
Оцените результаты исследования, применяя терминологию.


Эталоны ответов к задаче:

Альбумин – это основной белок плазмы крови, вырабатываемый в печени человека. А) Связывание и транспорт катионов (Cu, Zn, Ca), малых и больших анионов, билирубина, жирных кислот, витамина С, лекарств, гормонов щитовидной железы; б) Поддерживает онкотическое (коллоид-осмотическое) давление. В) Резерв белка (аминокислот).
Бромкрезоловый пурпуровый (БКП) образует с альбумином в слабокислой среде в присутствии поверхностно активных веществ комплекс, который определяют фотометрически.
Гиперальбуминемия: острое обезвоживание, прием анаболических стероидов. Гипоальбуминемия: Пониженный синтез: цирроз печени, недоедание, синдром мальабсорбции, анальбуминемия. Повышенный катаболизм: травма, инфекции, сепсис, лихорадка, опухоли, гипоксия, синдром Кушинга, гипертиреоз, гиперкортицизм. Аномальные потери: шок, кровотечение, энтероколиты, нефротический синдром. Патологическое распределение: после операционного вмешательства, при ожогах, токсикозе, асците, плеврите. Наследственное отсутствие альбумина – анальбуминемия Расслоением при электрофорезе зоны альбумина на 2 или более полосы - бисальбуминемия.
норма: 35 – 53 г/л. А) норма, б) гипоальбуминемия, в) гиперальбуминемия, г) норма.














Эталон ответа на билет №19

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

У пациента с жалобами на боль в костях общий анализ крови выявил относительный лимфоцитоз, небольшое количество плазматических клеток, увеличение СОЭ до 60 мм/час. В моче обнаружен белок Бенс-Джонса.


Задание:

Какое заболевание можно предположить?
Дополнительные исследования, необходимые для подтверждения диагноза.
Может ли увеличение СОЭ считаться специфическим показателем воспаления?
Какие изменения состава крови способствуют увеличению СОЭ?

Эталон ответа на задачу:

1.У пациента можно предположить миеломную болезнь.
2. Для подтверждения диагноза необходимо:
а) исследовать пунктат красного костного мозга – увеличение количества плазматических клеток в пунктате красного костного мозга до десятков процентов подтверждает диагноз;
б) провести биохимическое исследование крови: при миеломной болезни увеличивается количество общего белка сыворотки крови за счет парапротеина. Может также увеличиться уровень мочевины и креатинина.
3. Нет, СОЭ не является специфическим показателем воспаления.
4. Увеличению СОЭ способствует:
а) эритроцитопения (относительная или абсолютная);
б) увеличение в плазме уровня глобулиновой фракции белков;
в) увеличение уровня холестерина и фибриногена.


















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

В лаборатории при исследовании общего белка биуретовым методом у группы больных получены следующие результаты:
а) 56 г/л в) 152 г/л
б) 72 г/л г) 84 г/л


Задание:
Дайте определение понятия «общий белок».
Оцените результаты исследований, применяя терминологию.
Перечислите, какие дополнительные исследования нужно провести больному с концентрацией общего белка - 152 г/л, чтобы выявить характер протеинемии.
Назовите источники ошибок при определении общего белка биуретовым методом.


Эталон ответа к задаче:

Общий белок- это сумма всех белков плазмы. В настоящее время в плазме идентифицировано более100 белков.
норма: 65 – 85 г/л.
а) гипопротеинемия
б) норма
в) гиперпротеинемия
г) норма
Хранение биуретового реактива на свету, нарушение экспозиции проб при развитии цветной реакции, погрешности дозирования, колориметрирования, гемолизированная сыворотка, неточный калибровочный график.
Необходимо дополнительно провести электрофорез белков сыворотки для выявления парапротеинов и исследовать мочу на наличие белка Бенс-Джонса, чтобы выяснить характер гиперпротеинемии. Парапротеинемия сопровождает миеломную болезнь.




















Эталон ответа на билет №20

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

В лабораторию из отделения терапии доставлено 8 банок с мочой на исследование по Зимницкому. При анализе обнаружено резкое снижение показателей относительной плотности в дневных порциях, сочетающееся с полиурией. При расспросе пациента врач выяснил, что в течение дня тот ел в большом количестве арбуз.

Задание:

Как вы оцениваете результат?
О чём необходимо было предупредить пациента накануне сбора мочи по Зимницкому?
Соотношение дневного и ночного диуреза в норме.
Каким термином называется превышение ночного диуреза над дневным и признаком какой патологии оно может являться?

Эталон ответа к задаче:

1. Данный результат не поддается оценке, так как моча была собрана неправильно.
2. Накануне сбора мочи по Зимницкому пациента необходимо предупредить, что он должен соблюдать обычный питьевой режим, не превышающий 1,5 л жидкости в день и обычный пищевой режим.
3. В норме дневной диурез в 2-3 раза превышает ночной.
4. Превышение ночного диуреза называется никтурией. Никтурия может являться следствием снижения концентрационной способности почек, т.е. развития хронической почечной недостаточности, а также следствием сердечной недостаточности.



















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Пациенту Н. в гематологическом отделении была сделана биохимия крови. Общий белок - 145 г/л, альбумин – 25 г/л., электрофорез белков выявил фракцию парапротеинов, в моче был обнаружен белок Бенс-Джонса.



Задание:
Дайте понятие о парапротеинах.
Рассчитайте альбуминово-глобулиновый коэффициент.
Оцените результаты исследования, применяя терминологию.
Назовите особенности белка Бенс-Джонса.

Эталон ответа к задаче:

Парапротеины – это патологические белки, иммуноглобулины, лишенные свойств антител.
Норма А/Г=1,7–2,1. Глобулины = общий белок – альбумины. Глобулины = 145 – 25 = 120 г/л. А/Г = 25 / 120 = 0,21.
гиперпротеинемия и гипоальбуминемия.
белок Бенс-Джонса – альбумин; белок обнаруживаемый в моче при миеломной болезни, представляющий собой легкие цепи иммуноглобулинов. Белок Бенс-Джонса выпадает в осадок при подкислении мочи и нагревании ее до 40 – 600 С и последующим растворением осадка при нагревании до 85 – 1000С.
























Эталон ответа на билет №21

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При определении группы крови с Цоликлонами агглютинации не произошла ни в одной лунке.

Задание:
Как вы оцените результат?
Из чего готовят Цоликлоны?
Клинико-диагностическое значение определения групп крови.
Как дезинфицируется планшет для определения групп крови?

Эталон ответа к задаче:

1. Если агглютинация эритроцитов с Цоликлонами не наступила, то это означает, что кровь принадлежит 0 (1) группе.
2. Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей-носителей анти-А и анти-В гибридом. Цоликлон анти-АВ представляет собой смесь моноклональных антиА и анти-В антител.
3. Определение группы крови наиболее важно для трансфузиологии, т.к. определяется совместимость при переливании крови.
4. Лунки планшета для определения групп крови заливаются на 1 час 6% раствором перекиси водорода, затем промываются водой и высушиваются.

























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Концентрация мочевины в сыворотке у группы больных следующая:
2,18 ммоль/л
7, 34 ммоль/л
23, 1 ммоль/л
4, 59 ммоль/л

Задание:
Дайте характеристику мочевины.
Расскажите о клинико-диагностическом значении мочевины.
Расскажите принцип определения мочевины уреазным методом.
Оцените результаты исследования, применяя терминологию.


Эталон ответа к задаче:

Мочевина – это фракция остаточного азота, она является продуктом обезвреживания аммиака, синтезируется в печени из 2-х молекул аммиака и 1-й молекулы углекислого газа. Мочевина является маркёром интоксикации организма, так как сама не токсична, но вместе с ней увлекаются через мембраны клеток токсические вещества и вода, вызывающая отёки тканей.
Повышение концентрации мочевины в крови (уремия) наблюдается при почечной недостаточности, нарушении оттока мочи (камни, опухоли), а также при заболеваниях, связанных с усиленным распадом белков, желудочно-кишечными кровотечениями, инфекционными заболеваниями, отравлениями некоторыми ядами, при поражениях печени и др. Снижение концентрации мочевины в крови (гипоуремия) наблюдается при голодании, после гемодиализа, при тяжелых заболеваниях печени. В моче концентрация мочевины увеличивается при выведении ее избытка из крови, что может быть при усилении обмена веществ, в том числе белков, при повышенной функции щитовидной железы или избыточном введении тироксина, при отравлении фосфором. Пониженное содержание мочевины в моче свидетельствует о почечной недостаточности или уменьшении ее образования при печеночной недостаточности.
Мочевина под действием уреазы гидролизуется с образованием карбоната аммония. Ионы аммония реагируют в присутствии нитропруссида натрия с фенолом и гипохлоритом, образуя окрашенный комплекс. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации мочевины в пробе.
а) пониженное содержание мочевины
б) норма
в) уремия
г) норма








Эталон ответа на билет №22

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При исследовании физических и химических свойств мочи пациента отклонений от нормы лаборант не отметил. Однако когда врач-лаборант проводил микроскопию осадка мочи, была выявлена лейкоцитурия, цилиндрирурия, и микрогематурия, а также наличие клеток почечного эпителия.

Задание:
Была ли допущена ошибка в работе лаборанта, и если была, то в чем она заключается?
Подтверждением какого типа протеинурии – почечной или внепочечной является цилиндрурия?
В каких случаях указывают количетво элементов осадка «в поле зрения», а в каких – «в препарате»?
Что означает термин «лейкоцитурия»?

Эталон ответа к задаче:
1. Лаборант допустил ошибку при исследовании физических и химических свойств мочи. Моча, скорее всего, была мутновата, так как содержала значительное количество клеточных элементов осадка. Кроме того, выявление цилиндрурии доказывает наличие протеинурии, то есть выделение белка с мочой.
2. Цилиндрурия указывает на органическую протеинурию почечного происхождения, так как цилиндры – это белковые слепки канальцев нефрона. Это подтверждается также нахождением клеток почечного эпителия и эритроцитов в осадке мочи.
3. При малом количестве элементов осадка указывают их количество в препарате при малом увеличении (8(10). Если элементов осадка много, указывают их количество в поле зрения при большом увеличении (40(10).
4. Нахождение лейкоцитов в количестве свыше 5 в каждом поле зрения обозначается термином "лейкоцитурия". Лейкоцитурия может быть проявлением воспалительного процесса в почках или мочевыводящих путях.
















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Мочевая кислота в сыворотке крови у пациента Г. - 820 мкмоль/л


Задание:

Дайте характеристику мочевой кислоте.
Расскажите принцип определения мочевой кислоту уриказным методом.
Назовите основные причины повышения мочевой кислоты в крови.
Оцените результаты, применяя терминологию.

Эталон ответа к задаче:

Мочевая кислота является фракцией остаточного азота и конечным продуктом обмена пуриновых оснований (аденина и гуанина), входящих в состав нуклеопротеидов. Образующийся в процессе дезаминирования аденозина - гипоксантин превращается в ксантин, который далее окисляется с участием фермента ксантиноксидазы в мочевую кислоту.
Содержащаяся в пробе мочевая кислота окисляется под действием фермента уриказы с образованием эквимолярного количества перекиси водорода. В присутствии пероксидазы перекись водорода окисляет хромогены с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски прямопропорциональна концентрации мочевой кислоты в пробе.
Концентрация мочевой кислоты в плазме зависит от быстроты разложения пуриновых нуклеотидов (поступающих с пищей и синтезированных в организме) и выделения ее через почки. Показатель увеличивается при: высоком содержании пуринов в пище, заболеваниях почек, подагре, лейкозах, тяжелом сахарном диабете, заболеваниях печени и желчевыводящих путей.
повышена (гиперурекемия). Нормы в сыворотке (плазме): мужчины 202 – 416 мкмоль/л, женщины 142 – 339 мкмоль/л; моча 1,49 – 4,46 мкмоль/24 часа.

















Эталон ответа на билет №23

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При микроскопическом исследовании препарата из волос обнаружены пораженные волосы окутаны чехликом из мелких спор диаметром 1-3мкм, расположенных мозаично, кучками, тесно прилегающих друг к другу. При надавливании на покровное стекло чехол разрушается и внутри волоса можно видеть септированные нити мицелия и кучки мелких спор.

Задание:
Какое заболевание волос дает подобную микроскопическую картину?
Техника приготовления препарата из волос.
Как выявляются очаги пораженных волос при микроскопии?
Как уничтожается материал из волос, кожи, ногтей после исследования?

Эталон ответа к задаче:

1. Подобную микроскопическую картину дает микроспория.
2. Волосы помещают на предметное стекло, измельчают скальпелем, наносят 1-2 капли едкой щелочи (20-30% КОН) и подогревают над пламенем горелки (не доводя до кипения). Препарат покрывают покровным стеклом, оставляют на 5 мин и микроскопируют.
3. При подозрении на микроспорию используют ультрафиолетовую лампу Вуда, в лучах которой волосы, пораженные микроспорумом, отдают зеленоватым свечением. Благодаря такой флюоресценции удается быстро обнаружить даже единичные пораженные волосы.
4. После исследования материал из кожи, ногтей и волос, а также бумага, в которую был упакован материал, сжигают.





















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

При определении билирубина методом Йендрашика были получены следующие результаты:
Экстинкция общего билирубина – 0,079;
Экстинкция конъюгированного билирубина – 0,025.


Задание:
Дайте характеристику билирубина.
Расскажите принцип определения билирубина методом Йендрашика.
Рассчитайте концентрацию общего, конъюгированного и неконъюгированного билирубина, если калибровочный фактор равен 520 мкмоль/л.
Назовите нормальные значения билирубина и оцените результаты, применяя терминологию.

Эталон ответа к задаче:

Билирубин – пигмент желто-красного цвета, обычный пигмент плазмы, образуется при распаде гемоглобина в клетках, токсичен, не растворим в воде, по крови транспортируется в комплексе с альбумином и называется неконъюгированным. Обезвреживается в клетках печени гепатоцитах, взаимодействуя с активной формой глюкуроновой кислоты. Соединение билирубина с глюкуроновой кислотой называется конъюгированный билирубин. Он мало токсичен, растворим в воде, является предшественником пигментов кала и мочи. В плазме находятся обе фракции – конъюгированный и неконъюгированный билирубин.
Общий билирубин определяется на основе реакции с диазотированной сульфаниловой кислотой, после диссоциации неконъюгированного (непрямого, свободного) билирубина при участии кофеинового реагента. Для определения содержания конъюгированного (прямого, связанного) билирубина из реакционной смеси исключается кофеиновый реагент. Концентрация некоъюгированного билирубина рассчитывается разницей концентрации между общим и конъюгированным билирубином.
Концентрация опыта = экстинкция опыта х калибровочный фактор.
Общий билирубин = 0,079 х 520 = 41,08 мкмоль/л
Конъюгированный билирубин = 0,025 х 520 = 13 мкмоль/л
Неконъюгированный = общий билирубин – конъюгированный
Неконъюгированный = 41,08 – 13 = 28,08 мкмоль/л
В сыворотке крови в норме содержится 5,45 – 18,94 мкмоль/л (75-80%) неконъюгированного билирубина и 3,1 – 5,4 мкмоль/л (20-25%) конъюгированного. В сумме он составляет общий билирубин, концентрация которого в сыворотке здорового человека составляет 8,5 – 20,5 мкмоль/л. При уровне билирубина в крови 27 – 34 мкмоль/л и более отмечается появление желтухи.
Общий билирубин – повышен (гипербилирубинемия)
Конъюгированный билирубин – повышен
Неконъюгированный билирубин – повышен



Эталон ответа на билет №24

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При проведении общего анализа крови у пациента были получены следующие результаты:
Гемоглобин 100 г/л
Эритроциты 2,5х1012/л
Лейкоциты 4,5х109/л
П/я – 1%; с/я – 75%; э – 1%; б – 0%; мон – 3%; лимф – 24%.
Гиперсегментация нейтрофилов, базофильная пунктация нейтрофилов, анизоцитоз, пойкилоцитоз эритроцитов, кольца Кебота, тельца Жолли. Мегалоциты.

Задание:

Вычислите цветовой показатель крови у данного пациента.
Дайте оценку полученному результату.
Какое заболевание можно предположить по данной картине крови?
Классификация анемий по этио-патогенетическому признаку.

Эталон ответа к задаче:

1. Цветовой показатель крови равен 1,2.
2. По результатам анализа выявляется: снижение концентрации гемоглобина; эритроцитопения; гиперхромия; небольшой нейтрофилез со сдвигом вправо; изменения в эритроцитах по величине и по форме, патологические включения в эритроцитах.
3. По данной картине крови можно предположить В12-фолиеводефицитную анемию.
4. По этио-патогенетическому признаку анемии можно классифицировать как:
а) анемии, связанные с кровопотерей (постгеморрагические) острые и хронические;
б) анемии, связанные с нарушением кровообразования (железодефицитные, В12-фолиеводефицитные, апластические, гипопластические);
в) анемии, связанные с повышенным кроворазрушением – гемолитические (наследственные и приобретенные).
















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Лаборант центрифугировал кровь. Во время центрифугирования пробирка с кровью разбилась.

Задание:

Перечислите причины, которые могли привести к данной нештатной ситуации
Назовите действия, которые должен предпринять лаборант, чтобы ликвидировать аварию.
Расскажите, какие пакеты применяют для сбора и хранения медицинских отходов разных классов.
Объясните правила сбора опасных (рискованных) отходов.


Эталон ответа задачи:

Нарушение правила уравновешивания пробирок при центрифугировании, центрифугирование уже треснутых пробирок и в пробирках не пригодных для этой процедуры, неустойчивое положение центрифуги.
Открыть центрифугу спустя 40 минут после аварии, чтобы успел осесть аэрозоль. Залить дез. раствором стаканы для пробирок на 60 минут, протереть ветошью, смоченной дез. раствором все поверхности центрифуги дважды с интервалом в 15 минут. После 60 минутной экспозиции в дез. растворе сгустки крови, осколки пробирки собрать в мешок для утилизации отходов класса Б или В. Зарегистрировать случай аварии в специальном журнале.
Для сбора и хранения медицинских отходов существует несколько классов пакетов. Пакеты класса А (белый) – для неопасных отходов, класс Б (жёлтый) – опасные ( рискованные) отходы, класса В (красные) – чрезвычайно опасные отходы, Г (чёрные) – отходы, близкие к промышленным.
После заполнения пакета примерно на 3/4 (уже обеззараженными отходами) из него удаляется воздух, и сотрудник, ответственный за сбор отходов в данном медицинском подразделении, осуществляет его герметизацию с помощью замка-стяжки (скотчем, резиновой лентой), прикрепляет бирку, где указывается учреждение, № подразделения и Ф.И.О. ответственного за утилизацию и дата.














Эталон ответа на билет №25

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

В лаборатории была исследована моча, случайно несколько часов простоявшая возле батареи центрального отопления. При исследовании отмечена выраженная мутность, резкий аммиачный запах. При микроскопии осадка много живых подвижных бактерий, дрожжеподобные грибы.


Задание:
Как можно оценить результат анализа?
Чем могли быть вызваны подобные патологические изменения в моче?
Как следует хранить пробу мочи, если нет возможности исследовать её сразу.
Как обозначают в бланке исследования прозрачность мочи?

Эталон ответа к задаче:

1. Данный результат не подлежит оценке, так как моча долго простояла в тепле. За это время в ней могли размножиться бактерии и грибы, вызвавшие аммиачное брожение. Необходимо повторить анализ свежесобранной мочи,
2. Мутность мочи обусловлена большим количеством бактерий и дрожжеподобных грибов. Аммиачный запах вызван аммиачным брожением.
3. Если нет возможности исследовать мочу сразу, ее необходимо хранить в холодильнике с добавлением консервантов.
4. Прозрачность мочи в бланке обозначают как: прозрачность полная, неполная, мутноватая и мутная.






















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

При проведении электрофореза белков лаборант налил в камеру прибора буферный раствор с pH 4,6. По методике предусмотрен буфер с pH 8,6. Разделение белков на фракции не получилось.


Задание:
Назовите функции белков плазмы.
Расскажите цель и принцип проведения электрофореза белков.
Дайте понятие об изоэлектрической точке.
Сделайте вывод, почему не произошло разделения белков.


Эталон ответа к задаче:

Функции: структурная, участие в процессах свертывания крови, поддерживают коллоидно-осмотическое давление, транспортная, играют роль в иммунных процессах, белковый резерв организма.
Белки сыворотки, имеющие заряд, передвигаются в электрическом поле с разной скоростью, которая зависит от молекулярной массы, заряда белковой молекулы, носителя и напряжения электрического поля. За одно и тоже время разные белки продвинутся на разное расстояние. После разделения белки определяют фотометрически.
Фактором. Определяющим поведение белка как катиона или аниона, является реакция среды, которая определяется концентрацией водородных ионов и выражается величиной рН. Однако при определенных значениях рН число положительных и отрицательных зарядов уравниваются и молекула становится электронейтральной, т.е. она не будет перемещаться в электрическом поле. Такое значение рН определяется как изоэлектрическая точка белков. Для большинства природных белков она находится в слабокислой среде (рН 4,8 – 5,4).





































Эталон ответа на билет №26
Задача
«Методы клинических лабораторных исследований»
При работе на КФК лаборант, определяя белок в моче количественно, в нарушение правил, брал кюветы без перчаток за рабочие поверхности.


Задание:
Может ли отразиться подобное нарушение на результате исследования и, если может, то в какую сторону?
Что лежит в принципе количественного определения белка на КФК?
Классификация протеинурий.
Как дезинфицируют кюветы от КФК?

Эталон ответа к задаче:

1. Подобное нарушение может отразиться на результате исследования в сторону увеличения концентрации, так как чем больше помутнение, тем выше концентрация белка, а отпечатки пальцев создают дополнительную мутность.
2. В принципе количественного определения белка на КФК лежит свойство белка коагулироваться сульфосалициловой кислотой. При этом возникает помутнение, интенсивность которого зависит от концентрации белка. В основе определения – метод нефелометрии – определения оптической плотности мутных растворов.
3. Протеинурии различают почечные (ренальные) и внепочечные (экстраренальные).
Почечные протеинурии делятся на функциональные и органические. Функциональные протеинурии временные, быстропроходящие, могут быть связаны с приемом в пищу большого количества легкоусвояемого белка (алиментарные), с резкой переменой положения тела (ортостатические), с резкими перепадами температуры окружающей среды, с нагрузками на нижние конечности (маршевые). Органические протеинурии связаны с поражением нефрона (канальцевые и клубочковые).
Внепочечная протеинурия связана с инфекцией мочевыводящих путей.
Ложная протеинурия бывает при попадании воспалительного экссудата из половых путей.
4. Кюветы от КФК дезинфицируют 6% раствором перекиси водорода в течение часа.


















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

Лаборант готовил растворы крахмала, глюкозы, мальтозы, и сахарозы, но перепутал этикетки.

Задание:
Назовите реакции, с помощью которых можно отличить приготовленные растворы.
Расскажите принцип определения глюкозы в растворе.
Для каких биохимических исследований применяют раствор крахмала?
Назовите функции углеводов и дайте им объяснение.

Эталон ответа к задаче:

1. Глюкозу можно обнаружить реакцией Троммера, крахмал – реакцией с йодом, мальтозу – с аммиаком в щелочной среде при нагревании, сахарозу – исключением.

2. Глюкоза в щелочной среде восстанавливает окись меди в закись, при этом сама окисляется до глюконовой кислоты.

3. Раствор крахмала используют для обнаружения амилазы и определения её активности в сыворотке и в моче.

4. Энергетическая – глюкоза самый значительный поставщик энергии; структурная – углеводы основной компонент межклеточного вещества соединительной ткани, входят в состав гликолипидов, гликопротеинов, нуклеиновых кислот, составляют основу гликокаликса мембран клеток; рецепторная – углеводы составная часть антител; обезвреживающая – производное глюкозы УДФ-глюкуроновая кислота связывает в печени токсические соединения; анаболическая – углеводы – основной источник жирных кислот, гликогенных аминокислот, витамина С во многих живых организм (но не у человека).



















Эталон ответа на билет №27

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»
Пациенту назначено исследование мочи по Нечипоренко.


Задание:
Правила сбора мочи для исследования по Нечипоренко.
Какое количество мочи берётся для центрифугирования при исследовании по Нечипоренко?
Какое количество осадка с надосадочной жидкостью оставляют в центрифужной пробирке после центрифугирования для подсчёта в камере по Нечипоренко?
Нормальные анализы мочи по Нечипоренко.

Эталон ответа к задаче:

1. Для исследования мочи по Нечипоренко берут свежесобранную мочу, взятую в середине мочеиспускания и имеющую слабокислую среду (в моче со щелочной реакцией может быть частичный распад клеточных элементов).
2. Для центрифугирования берется 10 мл свежесобранной утренней мочи, взятой в середине мочеиспускания.
3. После центрифугирования в течение 3 мин при 2500 об/мин пастеровской пипеткой удаляют надосадочную жидкость, оставляя вместе с осадком 0,5 мл при незначительном осадке или 1,0 мл – при обильном осадке.
4. Нормальные показатели анализа мочи по Нечипоренко:
эритроцитов – до 1000 в 1 мл мочи;
лейкоцитов – до 2000 в 1 мл мочи;
цилиндров – не должно быть в 1 мл мочи.





















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
Больному Ю. с диагнозом острый инфаркт миокарда определили С-реактивный белок на 3-ий день начала болезни. Результат оказался резко положительным.


Задание:
Дайте общую характеристику С-реактивному белку.
Расскажите клинико-диагностическое значение определения СРБ.
Расскажите, на какой иммунологической реакции основано определение СРБ.
Сделайте вывод о соответствии результата исследования поставленному диагнозу

Эталон ответа к задаче:

С-реактивный белок –
·2-глобулин, минорный белок плазмы, содержание в норме не менее 0,005 г/л. Концентрация СРБ в плазме человека очень низка, но при воспалительных процессах и некрозах может увеличиваться в 20 – 25 раз. Поэтому его относят к так называемым «белкам острой фазы». СРБ – это компонент неспецифического иммунного ответа, который встречается на ранних стадиях после проникновения антигена в организм и действует благодаря стимуляции фагоцитоза.
СРБ является продуктом распада тканей при различных воспалительных и некротических процессах, особенно с выраженным экссудативным компонентом. Реакция положительна при ревматизме, септическом эндокардите, инфаркте миокарда, коллагенозах, туберкулезе, раке, перитонитах, различных воспалительных процессах. При ревматизме СРБ обнаруживается у 60-80% больных в периоде обострения, а в неактивный период не определяется.
Сыворотка крови, содержащая СРБ (АГ) образует хлопьевидный преципитат при взаимодействии со специфической преципитирующей иммунной сывороткой, содержащей АТ к данному АГ.
Соответствует.




















Эталон ответа на билет №28

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

В микологической лаборатории при микроскопическом исследовании препарата их волос обнаружено: контур волоса четкий, внутри волоса редкие септированные нити мицелия, тонкие и толстые. Споры полиморфные – круглые, прямоугольные, крупные и мелкие, расположены в виде скоплений и цепочками. Местами – пузырьки воздуха и капли жира.

Задание:
Какое заболевание волос дает подобную микроскопическую картину?
Назовите возбудителя данного заболевания.
Приведите классификацию микозов.
Назовите этапы лабораторной диагностики микозов.

Эталон ответа к задаче:
1. Подобную микроскопическую картину волоса дает заболевание – парша (фавус).
2. Возбудителем парши является Трихофитон Шенлейна.
3. Классификация микозов:
а) кератомикозы;
б) дерматомикозы;
в) кандидамикозы;
г) глубокие микозы.
4. Этапы лабораторной диагностики микозов:
а) обнаружение возбудителя (микроскопия патологического материала);
б) выделение возбудителя (посевы на питательную среду);
в) идентификация возбудителя по выросшим колониям;
г) изучение ответной реакции макроорганизма по серологическим, иммунологическим, реакциям, а также гистологические исследования и экспериментальное заражение животных.


















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
При проведении глюкозо-толерантного теста (ГТТ) больному Ш. получены результаты:
Время
натощак
через 1 час
через 2 часа
через 3 часа

Концентрация глюкозы в сыворотке в моль/л
5,7
7,6
5,0
5,7


Задание:
Объясните понятие «толерантность к глюкозе»
Расскажите цель и правила проведения глюкозо-толерантного теста. построения гликемической .
Постройте гликемическую кривую по данным и сделайте вывод о толерантности к глюкозе у данного больного.
Назовите противопоказания для проведения ГТТ и чем его можно заменить.

Эталон ответа к задаче:

У обследуемого пациента толерантность к глюкозе в норме.

ГТТ проводится следующим образом: у обследуемого натощак берут кровь из пальца и определяют в ней содержание глюкозы, затем пациенту дают выпить раствор глюкозы (50-75 г. глюкозы в зависимости от массы тела на 250 мл H2O).Через каждый час в течение 3-х часов определяют содержание глюкозы в крови. По полученным данным строят гликемическую кривую.

Неоднократное измерение глюкозы необходимо для того, чтобы знать быстроту, высоту подъёма, продолжительность гипергликемии и характер её снижения в ответ на введённую глюкозу. Замедленное возвращение глюкозы в крови к исходному уровню показывает, что нарушена секреция инсулина в ответ на введённую глюкозу.















Умеренная гипергликемия натощак, сахарный диабет. При панкреатите раствор глюкозы вводят внутривенно.
Эталон ответа на билет №29
Задача
«Методы клинических лабораторных исследований»

В лабораторию доставлена моча насыщенного цвета "пива" с желтой пеной.
Задание:
1. Чем может быть обусловлен такой цвет мочи и пены?
2. Какие дополнительные пробы необходимо провести, не дожидаясь специального назначения врача?
3. Какие виды желтух Вам известны?
4. Какой цвет имеет моча при разных видах желтух?

Эталон ответа к задаче
1. Моча цвета "пива" и желтый цвет пены бывает при паренхиматозной желтухе. Это обусловлено билирубинурией и увеличением концентрации уробилина в моче.
2. Необходимо сделать дополнительные пробы:
а) определение билирубина в моче (проба Розина и проба Фуше, или при помощи тест-полосок);
б) определение уробилина в моче (проба Флоранса, проба Шлезингера или с помощью тест-полоски).
3. Возможны три вида желтух:
а) паренхиматозная;
б) механическая (обтурационная);
в) гемолитическая.
4. При паренхиматозной желтухе моча имеет цвет "пива", при механической – зеленовато-бурый, при гемолитической – темный, почти черный.
























Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

При проведении электрофореза на бумаге, после колориметривания окрашенных протеинограмм получены результаты экстинкций:
Е альбуминов 0,21 х 3 = 0,63
Е альфа1-глобулинов 0,07
Е альфа2-глобулинов 0,05
Е бета-глобулинов 0,12
Е гамма- глобулинов 0,19

Задание:

Назовите основные функции белков плазмы.
Объясните, на какие фракции разделяются белки при электрофорезе на бумаге или на пленках из ацетат целлюлозы.
Рассчитайте относительное содержание белковых фракций.
Назовите термин, обозначающий количественное изменение белковых фракций и оцените результаты исследования.

Эталон ответа к задаче:

Функции: структурная, участие в процессах свертывания крови, поддерживают коллоидно-осмотическое давление, транспортная, играют роль в иммунных процессах, белковый резерв организма.
Альбумины, глобулины: альфа1, альфа2, бета и гамма глобулины.

· = 0,63 + 0, 05 + 0,07 + 0,12 + 0,19 = 1,06 Альбумины = 59,43%, альфа 1 глобулины = 4,72%, альфа 2 глобулины = 6,6%, бета глобулины = 11,32%, гамма глобулины = 17,92% - норма.
. Диспротеинемия. Норма ( альбумины – 56,5 – 66,8%, глобулины – 33,2 – 43,5%: альфа1 – 3 – 5,6%, альфа2 – 6,9 – 10,5%, бета – 7,3 – 12,5%, гамма – 12 – 19%).




















Эталон ответа на билет №30
Задача
«Методы клинических лабораторных исследований»
В лабораторию доставлена моча на общий анализ с обильным кирпично-розовым осадком.

Задание:
Чем обусловлен такой осадок?
Как можно избавиться от подобного осадка, если он является помехой для микроскопического исследования.
В какой моче – кислой или щелочной встречается подобный осадок?
Правила приготовления препарата мочи для микроскопического исследования.

Эталон ответа к задаче
1. Такой осадок обусловлен выпадением солей – уратов.
2. Избавиться от осадка вызванного выпадением уратов, можно путем добавления реактива Селена (на 100 мл воды 4г буры и 4г борной кислоты) в пробирку с осадком после центрифугирования. После этого осадок перемешивают и вновь центрифугируют.
3. Подобный осадок встречается в кислой моче.
4. Моча для микроскопического исследования осадка должна быть сежей, так как при хранении ее при комнатной температуре в течение 2-3 ч разрушается до 50% клеточных элементов.
Мочу перемешивают и вносят 10 мл в центрифужную пробирку. Центрифугируют 5 мин при 2000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, стараясь не взболтать осадок. Небольшую каплю осадка с минимальным количеством жидкости, спустившейся по стенке пробирки после сливания, после предварительного перемешивания с помощью пипетки переносят на середину предметного стекла и накрывают покровным.
В правильно приготовленном препарате не должно быть пузырьков воздуха и жидкость, растекаясь, не должна выходить за пределы покровного стекла.






















Задача
«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
При обследовании у пациента И. были получены результаты анализов в сыворотке:
общий белок – 72 г/л
альбумин – 40 г/л
мочевина – 5,7 ммоль/л
креатинин – 96 мкмоль/л
мочевая кислота – 302 мкмоль/л
общий билирубин – 8,7 мкмоль/л
СРБ – отрицательный.

Задание:
Оцените результаты, применяя терминологию.
Скажите, какие из перечисленных аналитов относятся к фракциям остаточного азота, а какие к белкам?
Расскажите, что понимают под термином «остаточный азот».
Назовите причины повышения остаточного азота.


Эталон ответа к задаче:

общий белок – норма (65 -85 г/л); альбумин – норма (35 – 50 г/л), мочевина – норма (1,7 – 8,3 ммоль/л), креатинин – норма (ж: 53 – 97 мкмоль/л и м: 61 – 115 мкмоль/л), мочевая кислота – норма (ж: 142 – 339 мкмоль/л, м:202 – 416 мкмоль/л), общий билирубин – норма (8,5 – 20,5 мкмоль/л), СРБ – норма.
К фракциям остаточного азота относятся: мочевина, креатинин, мочевая кислота. Остальные относятся к простым и сложным белкам.
Под остаточным азотом понимают тот небелковый азот, который определяется в надосадочной жидкости, получаемой после осаждения белков сыворотки (плазмы) крови трихлоруксусной, фосфорно-молибденовой и фосфорно-вольфрамовой (вольфрамовой) кислотами.
азотемия – это повышение уровня остаточного азота в крови. Чаще всего это связано с нарушением процессов образования и выведения продуктов азотистого обмена (усиленное образование компонентов остаточного азота, задержкой азотистых шлаков при нарушении выделительных функций почек при их патологии).
















Эталон ответа на билет №31

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

В лабораторию поступила моча пациента с запахом ацетона. Качественная проба на глюкозу оказалась положительной.

Задание:
Какое дополнительное исследование мочи необходимо провести, не дожидаясь назначения врача?
Какие методы определения кетоновых тел Вам известны?
Может ли быть кетонурия без глюкозурии?
Возможные причины кетонурии?

Эталон ответа к задаче:

1. При наличии запаха ацетона в моче, при глюкозурии лаборант обязан провести определение кетоновых тел в моче без назначения врача. В обычных случаях это исследование относится к дополнительным пробам и выполняется по специальному назначению врача.
2. Для определения кетоновых тел в моче применяются:
а) Проба Ланге: к 4-6 мл мочи прибавляют 8-10 капель ледяной уксусной кислоты и несколько капель свежеприготовленного насыщенного раствора нитропруссида натрия. На полученную смесь осторожно наслаивают 20% раствор аммиака. Пробу считают положительной, если в течение 3 мин на границе между аммиаком и остальной смеси образуется красно-фиолетовое кольцо.
б) экспресс-метод с помощью диагностических таблеток или тест-полосок, в основе которого лежит проба Лестраде.
3. Да, кетонурия может быть и без глюкозурии.
4. Причиной кетонурии может быть сахарный диабет, заболевания щитовидной железы, черепно-мозговая травма, токсическая диспепсия, длительное голодание, безуглеводная диета, ацетонемическая рвота у детей.
















Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
Пациентке, обратившейся к врачу с жалобами на повышенную утомляемость, слабость, головокружение до приема пищи, были назначены лабораторные исследования, в том числе определение глюкозы в крови и моче. По результатам анализов (концентрация глюкозы в сыворотке составила – 3,1 ммоль/л., в моче были обнаружены следы глюкозы) дополнительно провели тест толерантности к глюкозе (ТТГ). Получены результаты:
натощак – 3,2 ммоль/л
через час после нагрузки – 4,5 ммоль/л
через 2 часа после нагрузки – 2,9 ммоль/л
через 3 часа после нагрузки – 3,0 ммоль/л
В моче опять была обнаружена глюкоза – 0,5 ммоль/л

Задание:
Оцените результаты исследований, применяя терминологию.
Назовите причины снижения глюкозы в крови и появления её в моче.
Расскажите принцип определения глюкозы глюкозооксидазным методом.
Как называется процесс образования глюкозы из неуглеводных компонентов?

Эталон ответа к задаче:
натощак – гипогликемия, через час – норма, через 2 ч – гипогликемия, через 3 ч – гипогликемия; в моче глюкозурия. Норма глюкозы в сыворотке – 3,3 – 6,7 ммоль/л.
Причины гипогликемии: углеводное голодание, нарушение процессов переваривания и всасывания в ЖКТ, гиперсекреция инсулина, гипосекреция контринсулярных гормонов, некоторые виды коллагенозов, нарушение реабсорбции, передозировка инсулином. Причины глюкозурии: гипергликемия, нарушение реабсорбции.
при окислении глюкозы в присутствии глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. При добавлении пероксидазы перекись водорода окисляет аминосодержащий краситель в присутствие фенольного реагента в окрашенный хинонимин, определяемый фотометрически. Концентрация хинонимина прямо пропорциональна концентрации глюкозы в сыворотке.
глюконеогенез.

















Эталон ответа на билет №32

Задача

«Методы клинических лабораторных исследований»

При проведении общего анализа мочи проба на белок оказалась положительной.

Задание:
Перечислите качественные методы определения белка в моче.
Что лежит в принципе определения белка в моче?
Правила пользования тест-полосками
Какие количественные методы определения белка в моче Вам известны?
Эталон ответа к задаче
1. Наиболее чувствительной и распространенной качественной пробой на белок является проба с 20% раствором сульфосалициловой кислоты. Моча для этой пробы должна быть прозрачной и иметь кислую реакцию.
Второй качественной пробой на белок является кольцевая проба Геллера.
2. В принципе определения белка лежит способность белка коагулироваться под воздействием кислоты.
3. При пользовании тест-полосками необходимо соблюдать следующие правила:
а) тщательно закрывать пенал после извлечения из него полоски;
б) не захватывать пальцами индикаторные зоны;
в) использовать тест-полоски только в пределах указанного срока годности;
г) соблюдать правила хранения тест-полосок;
д) проводить оценку результатов в соответствии с инструкцией.
4. Имеется два унифицированных метода количественного определения белка в моче:
а) метод Брандберга-Робертса-Стольникова в модификации Эрлиха и Альтгаузена:
При наслаивании мочи, содержащей белок, на раствор азотной кислоты (50%) или реактив Ларионовой, на границе двух сред образуется белое кольцо, причем, если белое нитевидное кольцо появляется на третьей минуте, то содержание белка равно 0,033 г/л. Появление кольца ранее 3 мин свидетельствует о большем содержании белка в моче.
Степень разведения мочи определяется в зависимости от вида кольца, т.е. его ширины, компактности и времени появления. Если кольцо имеет нитевидную форму, то мочу следует развести в два раза, при широкой форме кольца мочу разводят в четыре раза, при компактной форме – в восемь раз. Количество белка вычисляется путем умножения 0,033 г/л на степень разведения.
б) метод количественного определения белка в моче с 3% раствором сульфосалициловой кислоты на КФК.
В принципе метода – способность белка давать помутнение с кислотой, интенсивность которого зависит от концентрации белка.









Задача

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»
Пациентке Л.были назначены лабораторные исследования Результаты анализов:
Общий белок – 58 г/л, альбумин – 28 г/л, глюкоза 4,8 ммоль/л, мочевина – 18 ммоль/л, креатинин – 98 мкмоль/л, мочевая кислота 384 мкмоль/л. В моче обнаружен белок и глюкоза, в осадке мочи - неизменённые эритроциты и единичные цилиндры.

Задание:
Оцените результаты исследований, применяя терминологию.
По результатам анализа сделайте вывод, о патологии какого органа может идти речь.
Предложите, какую функциональную пробу надо провести, чтобы подтвердить патологию предполагаемого органа.
Расскажите, на чём основана эта проба.


Эталон ответа к задаче:
общий белок – норма (65 – 85 г/л), альбумин – гипоальбуминемия (35 – 50 г/л), глюкоза – норма (3,3 – 6,7 ммоль/л), мочевина – гиперуремия (1,7 – 8,3 ммоль/л), креатинин – норма (ж: 53 – 97 мкмоль/л и м: 61 – 115 мкмоль/л), мочевая кислота – гиперурекимия (или норма) (ж: 142 – 339 мкмоль/л, м:202 – 416 мкмоль/л).
о патологии почек.
пробу Реберга.
Проба Реберга позволяет судить о клубочковой фильтрации и канальцевой реабсорбции. Проба основана на том, что креатинин фильтруется только клубочками, практически не всасывается и не секретируется канальцами.









13PAGE 15


13PAGE 144815



Общий азот

Азот белков

Остаточный азот

азот аминокислот

Азот мочевины

Другие азотсодержащие вещества

Резидуальный азот






















Д °Root Entry

Приложенные файлы

  • doc 24057665
    Размер файла: 542 kB Загрузок: 1

Добавить комментарий